HSYA通过激活自噬作用，经由NLPR3/IL-1β/PCSK9信号通路抑制LPS诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）来源的泡沫细胞形成

《Chinese Medical Journal》：HSYA inhibits LPS-induced VSMC-derived foam cell formation through the NLPR3/IL-1β/PCSK9 signaling pathway via activation of autophagy

羟基红花黄色素A通过激活自噬抑制NLRP3炎症小体活化，调控PCSK9/LDLR表达从而抑制血管平滑肌细胞泡沫细胞形成，为动脉粥样硬化治疗提供新策略。

　　动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）是大多数心血管疾病（Cardiovascular Diseases, CVDs）的病理基础，也是全球范围内导致死亡和残疾的主要原因之一。作为一种复杂的疾病，AS涉及多种机制的相互作用，包括炎症反应、脂质代谢异常以及细胞表型转变等。近年来，研究发现血管平滑肌细胞（Vascular Smooth Muscle Cells, VSMCs）的表型转换在AS的发展过程中起着关键作用。VSMCs在正常情况下具有维持血管结构和功能的功能，但在AS的病理过程中，它们可以转变为类似巨噬细胞的形态，形成泡沫细胞（Foam Cells），从而加速动脉粥样斑块的形成和进展。

泡沫细胞的形成通常与脂质的异常积累有关。当VSMCs摄取过量的低密度脂蛋白（Low-Density Lipoprotein, LDL）后，这些细胞会经历表型变化，最终转变为泡沫细胞。泡沫细胞不仅在动脉粥样斑块的形成中扮演重要角色，还通过促进炎症反应、抑制脂质清除以及加剧细胞死亡等方式，进一步推动AS的恶化。因此，研究如何有效抑制VSMC来源的泡沫细胞形成，成为探索AS治疗策略的重要方向。

在众多与AS相关的分子机制中，PCSK9（Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9）的作用尤为突出。PCSK9作为一种丝氨酸蛋白酶，主要通过促进低密度脂蛋白受体（Low-Density Lipoprotein Receptor, LDLR）的降解，从而减少细胞表面LDLR的表达，降低LDL的清除效率，导致血浆中LDL-胆固醇（LDL-C）水平升高。高LDL-C水平是AS发生发展的核心风险因素之一。因此，抑制PCSK9的表达或功能，被认为是一种有潜力的治疗策略，可以改善脂质代谢并减少AS的发生。

与此同时，自噬（Autophagy）作为一种细胞自我降解机制，在AS的病理过程中也发挥着重要作用。自噬通过清除细胞内多余的脂质和受损的细胞器，有助于维持细胞的稳态，减少泡沫细胞的形成。研究表明，自噬的激活能够显著抑制NOD-like receptor protein 3（NLRP3）炎症小体的激活，从而减少炎症因子如IL-1β、IL-6和TNFα的释放。这些炎症因子不仅促进泡沫细胞的形成，还进一步加剧AS的进展。因此，激活自噬被认为是一种有效的干预手段，能够从多个层面抑制AS的发展。

羟基红花黄色A（Hydroxysafflor Yellow A, HSYA）是一种从红花中提取的主要活性成分，被广泛用于治疗心血管疾病。HSYA具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎以及促进自噬等作用。已有研究表明，HSYA能够通过调控NLRP3炎症小体的激活，减少炎症反应并改善心血管健康。然而，HSYA在抑制VSMC来源泡沫细胞形成中的具体作用机制尚未完全阐明。

本研究旨在探讨HSYA对VSMC来源泡沫细胞形成的影响及其潜在的分子机制。我们采用脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine, 3-MA）作为刺激因素，诱导VSMCs发生表型转变并形成泡沫细胞。通过细胞活力检测、油红O染色（Oil Red O Staining）以及自噬相关分子的表达分析，我们评估了HSYA对泡沫细胞形成和自噬活动的调控作用。实验结果表明，HSYA能够显著降低LPS诱导的泡沫细胞形成，并通过激活自噬，减少NLRP3炎症小体的激活和IL-1β的释放，从而抑制PCSK9的表达并促进LDLR的表达。

具体而言，HSYA通过调控自噬相关蛋白如Beclin 1、p62和LC3的表达，增强了自噬活性。这不仅有助于清除细胞内的脂质沉积，还能够减少炎症因子的释放，从而抑制泡沫细胞的形成。此外，HSYA还通过抑制NLRP3炎症小体的激活，进一步降低PCSK9的表达，减少LDL-C的积累，从而延缓AS的发展。这一发现表明，HSYA可能通过激活自噬，调控NLRP3/IL-1β/PCSK9信号通路，从而发挥其在AS治疗中的作用。

本研究的实验设计充分考虑了HSYA在不同条件下的作用效果。我们首先通过细胞活力检测确定了HSYA的最佳处理浓度和时间，即30 μmol/L和24小时。随后，我们利用油红O染色评估HSYA对泡沫细胞形成的影响，并结合自噬抑制剂3-MA，进一步验证HSYA对自噬的调控作用。结果显示，HSYA能够显著抑制LPS和3-MA诱导的泡沫细胞形成，并通过增强自噬活性，减少脂质沉积和炎症反应。

在分子机制层面，我们通过Western blotting和qPCR等技术，检测了NLRP3炎症小体相关蛋白（如NLRP3、ASC和Caspase-1）以及PCSK9和LDLR的表达变化。实验数据表明，HSYA能够显著抑制NLRP3、ASC和Caspase-1的表达，同时促进LDLR的表达并抑制PCSK9的表达。这些结果进一步支持了HSYA通过调控自噬和NLRP3/IL-1β/PCSK9信号通路，来抑制泡沫细胞形成和AS进展的假设。

此外，我们还发现，HSYA在抑制泡沫细胞形成的过程中，可能通过多种机制协同作用。一方面，HSYA能够激活自噬，从而促进脂质的清除，减少泡沫细胞的形成；另一方面，HSYA能够抑制NLRP3炎症小体的激活，减少炎症因子的释放，从而降低AS的炎症反应。这两方面的机制共同作用，使得HSYA在抑制AS方面表现出显著的潜力。

本研究的结果不仅揭示了HSYA在抑制VSMC来源泡沫细胞形成中的作用，还为其在AS治疗中的应用提供了理论依据。HSYA作为一种天然来源的化合物，具有良好的安全性和生物活性，其在心血管疾病治疗中的潜力值得进一步探索。未来的研究可以围绕HSYA在不同病理条件下的作用机制，以及其与其他治疗手段的协同效应展开，以期为AS的治疗提供更多的选择和策略。

综上所述，HSYA通过激活自噬，调控NLRP3/IL-1β/PCSK9信号通路，显著抑制了VSMC来源泡沫细胞的形成，从而对动脉粥样硬化的发展起到了一定的抑制作用。这些发现为HSYA在心血管疾病治疗中的应用提供了新的视角，并为进一步探索其分子机制奠定了基础。未来的研究可以深入探讨HSYA与其他药物或治疗手段的联合应用，以期在临床实践中发挥更大的作用。