没食子酸乙酯通过调控神经免疫通路改善纤维肌痛模型小鼠的痛觉超敏及共病行为研究

《Biomedicine & Pharmacotherapy》：Exploring the anti-hyperalgesic effects of ethyl gallate in fibromyalgia-like behaviors in mice

本研究针对纤维肌痛（FM）临床治疗药物疗效有限、机制单一的问题，通过计算机模拟与动物实验相结合的策略，系统探究天然酚类化合物没食子酸乙酯（EG）的抗痛觉超敏作用。结果表明，EG具有优良的成药特性（口服生物利用度高、安全性好），可显著缓解利血平与酸性盐水诱导的FM样小鼠模型的机械性痛觉超敏、冷热异常性疼痛及快感缺失行为，其作用可能与调节PPAR-δ、TLR1/2、维生素D3受体等多靶点神经免疫通路相关。该研究为开发基于天然产物的FM多靶点治疗策略提供了实验依据。

　　

纤维肌痛（Fibromyalgia, FM）是一种以全身广泛性疼痛、疲劳、睡眠障碍和情绪异常为核心特征的复杂慢性疾病，全球患病率约2.7%，女性患者尤为多见。目前临床常用药物（如抗抑郁药、抗惊厥药）虽能部分缓解症状，但存在疗效个体差异大、副作用明显、对共病行为（如快感缺失）改善有限等问题。因此，寻找具有多靶点作用机制、高安全性且能同时改善疼痛与情感障碍的新型化合物成为FM治疗研究的重要方向。

在此背景下，来自巴西圣卡塔琳娜联邦大学的研究团队将目光投向天然酚类化合物——没食子酸乙酯（Ethyl Gallate, EG）。EG是没食子酸的乙酯衍生物，广泛存在于药用植物中，作为食品添加剂其抗氧化特性已被熟知，既往研究提示其具有抗炎、抗菌、抗糖尿病等多种生物活性。然而，EG是否对FM具有治疗潜力，其作用靶点与机制何在，尚待系统揭示。为此，研究人员整合计算机模拟分析与体内实验，深入探索EG在FM样动物模型中的抗痛觉超敏作用及其潜在机制。该研究成果发表于《Biomedicine 》杂志，为天然产物在慢性疼痛治疗中的应用提供了新的实验证据。

本研究主要采用以下关键技术方法：首先通过计算机模拟（ADMET-SAR、PASS online、ChemProt、SEA服务器）预测EG的成药性、药代动力学特性及分子靶点；其次，利用利血平诱导的FM模型（通过连续3天皮下注射利血平耗竭单胺类神经递质）和酸性盐水诱导的慢性广泛性疼痛模型（通过两次腓肠肌内注射pH 4.0酸性盐水）模拟FM的痛觉超敏及共病行为；通过小鼠面部表情疼痛量表、Von Frey纤维丝机械刺激试验、丙酮冷刺激试验、热甩尾试验等行为学测试评估EG对自发痛、机械性痛觉超敏和热异常性疼痛的影响；并通过甩尾悬停实验和蔗糖水喷溅实验评估其对抗快感缺失样行为的作用。所有动物实验均遵循随机、盲法原则，数据采用GraphPad Prism进行统计学分析。

3.1. ADMET分析、分子靶点预测与大鼠血浆稳定性

计算机模拟分析显示，EG（分子量198.17 g/mol）具有较好的水溶性、口服生物利用度及安全性，不易透过血脑屏障，且非P-糖蛋白或CYP450酶底物。靶点预测提示EG可能作用于铜含酶、芳基硫酸磺基转移酶、维生素D₃受体、前列腺素G/H合酶1、糖皮质激素受体、过氧化物酶体增殖物激活受体δ（PPAR-δ）以及Toll样受体1/2（TLR1/2）等靶点，表明其可能通过调节神经炎症通路发挥镇痛作用。血浆稳定性实验发现，EG在37℃下孵育8小时后浓度显著下降，提示其在生理温度下稳定性有限，可能影响口服生物利用度。

3.2. 没食子酸乙酯抑制利血平诱导的自发痛与机械性痛觉超敏

在利血平诱导的FM模型中，预防性（从造模第0天开始）及治疗性（从第4天开始）口服EG（100 mg/kg）均能显著降低小鼠面部疼痛表情评分（MGS），并减轻机械性痛觉超敏（Von Frey试验）。两种给药方案在造模后第4、6、8、10、12、15天均表现出持续的抗痛觉超敏效果，且疗效相当。

3.3. 没食子酸乙酯口服治疗抑制利血平诱导的热异常性疼痛

EG对冷刺激引起的异常性疼痛（丙酮试验）具有显著抑制作用，尤其在预防性给药组效果更为稳定。然而，在热甩尾试验中，EG对利血平诱导的热痛敏改善作用不明显，提示其镇痛效应可能具有模态特异性。开阔场实验证实EG本身不影响小鼠自主活动，排除了其镇痛作用由运动功能抑制引起的可能性。

3.4. EG在FM模型中的抗快感缺失样效应

在蔗糖水喷溅实验中，EG治疗（无论是预防性还是治疗性方案）均能显著增加利血平模型小鼠的理毛时间与理毛次数，表明EG可改善模型动物的快感缺失样行为。然而，在甩尾悬停实验中，EG对不动时间等抑郁样行为指标改善有限，提示其情感调节作用可能更具选择性，主要针对奖赏系统而非广泛的情绪环路。

3.5. 口服EG对CWP模型自发痛与机械性痛觉超敏的影响

在酸性盐水诱导的慢性广泛性疼痛模型中，EG同样表现出显著镇痛效果。预防性及治疗性给药均能降低小鼠MGS评分，并有效缓解机械性痛觉超敏，进一步验证了EG在不同FM样模型中的普适性抗痛觉超敏作用。

3.6. 口服EG缓解CWP诱导的热异常性疼痛

EG对CWP模型小鼠的冷异常性疼痛也具有抑制作用，且在预防性给药组效果更为显著。热痛敏测试结果再次显示EG对热刺激引起的疼痛反应改善有限，与其在利血平模型中的表现一致。

本研究通过多维度实验证实，天然酚类化合物EG具有良好的成药特性，并能通过多靶点调节机制有效缓解FM样动物模型的痛觉超敏与部分情感共病行为。计算机模拟提示其作用可能与调控PPAR-δ、TLR1/2、维生素D₃受体等神经免疫相关靶点有关。尽管EG存在口服生物利用度与稳定性方面的挑战，但其 multimodal （多模式）作用特点为开发FM新型治疗策略提供了有价值先导化合物。未来研究可进一步优化EG的剂型（如采用纳米载药系统），并深入解析其在中枢神经系统内的具体作用通路（如小胶质细胞活化、细胞因子网络调节、氧化应激反应等），以推动其向临床转化。该工作不仅深化了对天然产物镇痛机制的理解，也为纤维肌痛这一复杂疾病的药物研发提供了新的视角与实验依据。