围手术期循环肿瘤细胞动态变化对可切除结直肠癌淋巴结转移预测及预后评估的临床价值

《BMC Cancer》：Clinical relevance of perioperative changes in circulating tumor cells in resectable colorectal cancer

本研究针对可切除结直肠癌(CRC)患者围手术期循环肿瘤细胞(CTCs)变化与淋巴结转移(LNM)及预后的关联问题，通过前瞻性队列设计，采用微流控芯片技术检测81例患者术前术后CTCs。结果发现术前CTC阳性率76.6%与淋巴结转移显著相关(OR=8.017)，术后CTC持续阳性者无病生存期(DFS)更短。该研究为CRC术后辅助治疗决策提供了新型液体活检依据。

　　

在当今全球癌症负担日益加重的背景下，结直肠癌(Colorectal Cancer, CRC)作为第三大高发恶性肿瘤，每年导致近百万患者死亡，其防治形势尤为严峻。尽管手术切除和放化疗技术不断进步，但仍有相当比例的患者在治疗后出现复发转移，这提示我们可能存在肉眼难以发现的微转移灶，或手术操作导致肿瘤细胞入血播散。传统影像学和血清肿瘤标志物监测手段存在滞后性，而组织病理学又难以实现动态监测。正是在这样的临床困境下，循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells, CTCs)作为"肿瘤转移的种子"，逐渐成为液体活检领域的研究热点。

近日发表在《BMC Cancer》的一项前瞻性研究，由江阴市人民医院冯强等学者牵头，针对81例可切除结直肠癌患者，创新性地采用螺旋微流控芯片技术，系统分析了围手术期CTCs动态变化与临床病理特征的关系。研究发现术前CTC计数中位数高达16个/5ml血液，术后显著降至4个(P<0.001)，证实了手术切除原发灶的有效性。更值得关注的是，术前CTC阳性（定义≥3个CTCs）与淋巴结转移风险显著相关(OR=8.017)，而术后CTC持续阳性患者则表现出更短的疾病无生存期(Disease-Free Survival, DFS)。这些发现为结直肠癌的精准分期和个体化治疗提供了重要依据。

关键技术方法包括：1）建立81例可切除CRC患者的前瞻性队列（来自江阴市人民医院2023-2024年病例），设置20例腺瘤患者对照；2）采用螺旋微流控芯片进行CTCs的无标记分离，通过免疫荧光染色（CK+/CD45-/DAPI+）鉴定；3）通过单因素/多因素逻辑回归分析淋巴结转移风险因素，ROC曲线确定预测阈值；4）采用Kaplan-Meier曲线进行生存分析。

围手术期CTCs动态变化

通过比较术前(T0)和术后7天(T1)的血液样本，研究发现CTCs数量从术前中位数16个显著下降至术后4个(P<0.001)。值得注意的是，有8例患者术后CTCs不降反升，作者分析可能与术中操作挤压肿瘤或静脉污染有关。在阳性率方面，术前76.6%的患者CTC≥3个，术后降至56.8%，这一变化具有统计学意义(P<0.001)。

CTCs与淋巴结转移的关系

在36例发生淋巴结转移的患者中，单因素分析显示T3-4分期、神经侵犯、血管侵犯和术前CTC阳性与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。多因素逻辑回归进一步证实血管侵犯(OR=20.528)和术前CTC阳性(OR=8.017)是淋巴结转移的独立危险因素。ROC曲线分析显示，以15.5个CTCs为界值预测淋巴结转移的AUC达0.835，敏感性和特异性分别为83.3%和75.6%。

预后分析结果

生存分析显示，术后CTC阴性患者的DFS显著优于持续阳性者(Log-rank P=0.047)。而术前阳性但术后转阴的患者，其预后与持续阴性者无显著差异，提示术后CTC清除的重要性。

研究讨论部分指出，目前CTCs检测尚缺乏统一阳性阈值，本研究参考CellSearch平台设定≥3个为阳性，但ROC分析提示微流控技术下最佳预测值为15.5个，这反映了技术差异对结果的影响。作者强调，虽然大多数患者术后CTCs下降，但部分患者持续阳性可能提示高危复发风险，需加强随访。该研究的创新点在于首次系统阐述微流控技术检测围手术期CTCs对结直肠癌淋巴结转移的预测价值，为临床制定个体化辅助治疗方案提供了新思路。

然而研究也存在一定局限：螺旋微流控芯片可能遗漏小尺寸CTCs；单次采血存在随机误差；未进行CTCs表型分型；样本量有限且随访时间较短。未来研究可结合循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA, ctDNA)等多组学指标，进一步提升预测准确性。

该研究最终得出结论：术前CTC阳性与淋巴结转移风险增加显著相关，术后CTC状态对预后评估具有指导意义。围手术期CTCs动态监测可为结直肠癌术后辅助治疗决策提供重要参考，推动液体活检在肿瘤精准医疗中的临床应用。