CircANKRD52 通过吸收 miR-141-3p 并上调 PRKACB 的表达，促进黑色素瘤细胞的生长和侵袭能力

《Journal of Cellular and Molecular Medicine》：CircANKRD52 Augments the Growth and Invasion of Melanoma Cells by Sponging miR-141-3p and Upregulating PRKACB

环状RNA circANKRD52在黑色素瘤中高表达并与预后不良相关，通过海绵化miR-141-3p上调PRKACB促进细胞增殖、侵袭及血管生成。方法包括GEO数据分析和qRT-PCR验证，EdU、Transwell等实验检测细胞功能，RIP和RNA pulldown验证相互作用。结果支持circANKRD52/PRKACB/miR-141-3p轴在黑色素瘤进展中的作用。

　　近年来，黑色素瘤作为一种高发且恶性的皮肤癌，其发病率和死亡率持续上升，成为全球癌症研究的重要课题之一。尽管目前已有多种系统性治疗手段，如BRAF和MEK抑制剂的靶向治疗，以及抗PD-1和抗CTLA4的免疫治疗，但这些疗法在临床上仍面临疗效短暂、患者耐药性等问题。因此，深入研究黑色素瘤的分子机制，寻找新的治疗靶点和生物标志物，对改善患者预后具有重要意义。在众多非编码RNA中，环状RNA（circRNA）因其独特的结构和功能特性，逐渐受到关注。circRNA是一类由前体mRNA通过反向剪接形成具有稳定结构的环状RNA分子，具有组织特异性、高度保守性和调控基因表达的能力。它们不仅在癌症的进展中扮演关键角色，还可能通过多种机制参与黑色素瘤的发生、发展及转移过程。

在本研究中，科学家们通过GEO数据库的分析，发现circANKRD52（hsa_circ_0026926）在黑色素瘤组织样本和细胞系中显著上调，并与患者的不良预后及肿瘤复发密切相关。进一步通过实验验证，发现circANKRD52在黑色素瘤细胞中具有促进细胞增殖和侵袭的能力，同时在体内实验中，circANKRD52的过表达显著增强了肿瘤的生长和转移能力。这些发现表明，circANKRD52可能在黑色素瘤的发病机制中发挥关键作用，具有潜在的治疗和诊断价值。

为了进一步揭示circANKRD52的作用机制，研究人员通过生物信息学分析、RNA免疫沉淀（RIP）、RNA拉下实验（RNA pull-down）和荧光素酶报告基因实验等方法，确认了circANKRD52与miR-141-3p的特异性结合。miR-141-3p是一种小分子非编码RNA，其功能通常与抑制肿瘤细胞生长和转移有关。然而，在本研究中，circANKRD52通过“海绵”效应（sponge effect）结合miR-141-3p，从而阻断其对靶基因PRKACB的调控作用。PRKACB是一种cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基，其表达水平在黑色素瘤组织中升高，且与肿瘤的生长、侵袭和血管生成密切相关。通过实验验证，发现miR-141-3p的表达水平与circANKRD52呈负相关，而PRKACB则与circANKRD52呈正相关。这表明，circANKRD52通过与miR-141-3p结合，间接上调PRKACB的表达，从而促进黑色素瘤细胞的增殖和侵袭。

在细胞层面，研究团队通过多种实验手段，如EdU增殖实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术检测凋亡率、管形成实验（tube formation assay）评估血管生成能力等，全面验证了circANKRD52对黑色素瘤细胞行为的影响。结果显示，circANKRD52的过表达显著增强了细胞的增殖和侵袭能力，同时抑制了细胞的凋亡，而其敲低则产生了相反的效果。这进一步支持了circANKRD52在黑色素瘤中的促癌作用。此外，通过体外和体内实验，发现circANKRD52能够显著促进血管生成，这与PRKACB的表达变化密切相关，表明其可能通过调控PRKACB来影响黑色素瘤的血管化过程，从而促进肿瘤的生长和转移。

在动物模型中，研究人员将circANKRD52过表达或敲低的黑色素瘤细胞注射到裸鼠体内，观察其对肿瘤形成和生长的影响。结果表明，circANKRD52的过表达显著促进了肿瘤的生长和体积增大，而其敲低则有效抑制了肿瘤的形成和生长。免疫组织化学（IHC）分析进一步显示，circANKRD52的过表达导致肿瘤组织中CD31和VEGF的表达水平显著上升，而其敲低则显著降低了这些蛋白的表达。CD31是内皮细胞的标志物，而VEGF是一种重要的促血管生成因子，这些结果支持了circANKRD52在黑色素瘤血管生成中的作用。

通过一系列实验，研究人员明确了circANKRD52的分子机制。circANKRD52通过与miR-141-3p的结合，阻断了miR-141-3p对PRKACB的调控，从而导致PRKACB的表达上调。PRKACB的上调可能通过多种途径促进黑色素瘤的进展，包括增强细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进血管生成等。这一机制不仅为理解黑色素瘤的分子机制提供了新的视角，也为开发新的治疗策略提供了理论依据。

本研究的意义在于揭示了circANKRD52在黑色素瘤中的关键作用及其调控网络。circANKRD52作为一种新型的环状RNA，其在黑色素瘤组织和细胞中显著上调，与患者的不良预后和肿瘤复发密切相关。这提示，circANKRD52可能是一个重要的生物标志物，可用于黑色素瘤的早期诊断和预后评估。此外，通过调控miR-141-3p和PRKACB，circANKRD52可能成为一种新的治疗靶点，为黑色素瘤的靶向治疗提供了新的思路。

综上所述，circANKRD52在黑色素瘤的发生和发展中扮演着重要角色。它通过与miR-141-3p结合，间接调控PRKACB的表达，从而促进黑色素瘤细胞的增殖、侵袭和血管生成。这一发现不仅有助于揭示黑色素瘤的分子机制，还为未来的精准治疗提供了新的方向。未来的研究可以进一步探索circANKRD52在黑色素瘤中的具体作用机制，以及其在不同患者群体中的表达差异，以期为临床治疗提供更加个性化的策略。同时，circANKRD52作为潜在的治疗靶点，有望在新型RNA疗法中发挥作用，为黑色素瘤的治疗带来新的希望。