肠病毒D68：一种新型抑制剂揭示了病毒侵入和脱壳的潜在分子机制

《Journal of Medical Virology》：Enterovirus D68: A Novel Inhibitor Reveals Underlying Molecular Mechanisms of Viral Entry and Uncoating

EV-D68重症呼吸道疾病和急性弛缓性脊髓炎的有效抑制剂GCA被鉴定，其通过稳定病毒衣壳（RNA释放温度从51℃升至53℃）和阻断硫酸肝素蛋白聚糖受体（不干扰ICAM-5）双重机制发挥作用，在细胞和动物实验中均显示显著疗效，但需同时突变VP1 T92N和NSP2 K6R基因才会产生耐药性

　　

摘要

尽管肠道病毒D68（EV-D68）已成为一种重要的儿童病原体，可导致严重的呼吸道疾病和急性弛缓性脊髓炎，但目前尚无有效的治疗方法。通过系统地筛选天然产物，我们发现香叶基-p-反式香豆酸（GCA）是一种高效的EV-D68抑制剂，其对多种临床菌株的EC₅₀值在20–40 μM之间。添加时间分析表明，GCA主要作用于病毒的早期侵入过程，在吸附阶段具有最强的抑制作用。机制研究表明，GCA直接与EV-D68颗粒结合，阻止病毒脱壳，同时不干扰病毒与细胞的初始结合。热稳定性测试和PaSTRy实验证实GCA能够稳定病毒衣壳，使RNA的释放温度从51°C升高到53°C。受体结合实验显示，GCA选择性地抑制病毒与硫酸肝素蛋白聚糖的相互作用，但不影响ICAM-5，这表明其对病毒与次级受体的结合具有特异性干扰作用。耐药性研究发现了VP1（T92N）和非结构蛋白2C（K6R）中的关键突变，耐药性需要同时存在这两个突变，提示其具有协同的双重靶向机制。分子对接分析显示GCA与VP1峡谷区域结合，与普乐卡瑞（Pleconaril）的联合使用表现出协同效应（联合指数=0.83）。单独的突变不会影响药物敏感性，但双重突变体表现出显著的耐药性（EC₅₀ > 200 μM），证实了GCA对病毒衣壳和细胞宿主因子的双重靶向作用。体内疗效研究表明，GCA具有剂量依赖性的保护作用，每天12 mg/kg的剂量可使存活率提高至71%，而对照组仅为18%（p < 0.01），并且显著减少了脑组织和肌肉组织中的病毒载量。这些发现表明GCA是一种具有前景的治疗EV-D68的候选药物，其作用机制具有新颖性。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。