DLBCL细胞在CD19 CAR T细胞后出现，这些CD19 CAR T细胞具有交叉抗原耐药性，并且存在一种能够预测临床CAR T细胞反应的基因特征。 开放获取

《Blood Cancer Discovery》：DLBCL Cells Emerge after CD19 CAR T Cells with Cross-Antigen Resistance and a Gene Signature Predictive of Clinical CAR T-cell Response Open Access

研究CD19 CAR T细胞耐药的DLBCL细胞模型，发现耐药与CD19下调及凋亡抵抗相关，双靶策略及Mcl-1抑制剂可逆转耐药，并鉴定出预测临床响应的基因特征。

　　在当前对弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的治疗中，CAR T细胞疗法已经成为一种重要的治疗手段，特别是在复发或难治性病例中。然而，尽管这种疗法在部分患者中显示出显著的疗效，仍有相当一部分患者对治疗产生耐药性，且部分患者在初次治疗后并未出现有效的反应。因此，研究CAR T细胞治疗中肿瘤细胞的内在耐药机制对于提高治疗效果至关重要。

研究发现，CD19作为CAR T细胞治疗的重要靶点，其表达水平在治疗失败的患者中常常出现下降，这种现象被称作抗原丢失，是导致治疗失败的常见原因之一。然而，令人惊讶的是，治疗前CD19表达水平与CAR T细胞的敏感性之间并没有显著的相关性，这意味着抗原丢失并不是唯一的耐药机制。进一步研究显示，一些细胞系在CAR T细胞治疗后表现出CD19的可逆性下调，但一旦恢复表达，这些细胞对CAR T细胞的杀伤作用并没有随之恢复，说明CD19的表达水平并不能完全预测CAR T细胞的敏感性。

此外，研究还发现CD19的下调可能与其他抗原（如CD20和CD22）的表达变化有关。例如，在一些CAR T细胞耐药的DLBCL细胞系中，CD20和CD22的表达水平也出现了下降，表明这些细胞可能在多个抗原层面都表现出耐药性。这种跨抗原的耐药现象表明，即使肿瘤细胞重新表达CD19，它们仍可能对其他靶向抗原的CAR T细胞产生抵抗。因此，单纯依赖某一抗原的CAR T细胞治疗可能无法有效克服耐药性。

为了更深入地理解CAR T细胞耐药的机制，研究人员利用长期共培养的方法，从不同抗原表达水平的细胞系中筛选出耐药的DLBCL细胞系。这些细胞系在CAR T细胞治疗后表现出不同的耐药特征，如CD19和CD58的表达水平下降。值得注意的是，CD58的丢失在某些情况下可以被高剂量的CAR T细胞治疗所逆转，而CD19的下调则可能更加稳定。这提示我们，肿瘤细胞的耐药性可能是由多种机制共同作用的结果，而不仅仅是抗原表达的改变。

在细胞系中，研究人员还发现了一些基因表达模式的变化，这些变化可能与CAR T细胞耐药性相关。例如，Mcl-1和Bcl-2等抗凋亡蛋白的表达增加，可能导致肿瘤细胞在CAR T细胞作用下存活率提高。进一步的实验表明，使用Mcl-1抑制剂可以显著提高CAR T细胞对这些细胞的杀伤效果，而Bcl-2抑制剂的效果则相对较弱。这提示我们，Mcl-1可能在CAR T细胞耐药性中起着更为关键的作用。

研究还发现，一些CAR T细胞耐药的细胞系在治疗后表现出对其他抗原的CAR T细胞也具有耐药性，这可能与肿瘤细胞的基因表达变化有关。例如，某些耐药细胞系中出现了TP63和KLF13等转录因子的上调，这些基因在B细胞恶性肿瘤中已被报道与不良预后相关。此外，其他一些基因如HK2、TMBIM1、WRNIP1、B4GALT5和COA3也被发现与耐药性有关，这些基因可能通过影响细胞凋亡和免疫逃逸等机制导致耐药。

值得注意的是，研究还发现，某些耐药细胞系中出现了CD19的突变，这种突变可能是治疗后抗原表达下降的原因之一。然而，这些突变并非在治疗前就已经存在，而是在治疗过程中获得的，这表明抗原丢失可能是肿瘤细胞在CAR T细胞治疗压力下的一种适应性反应。这种适应性反应可能导致肿瘤细胞在治疗后失去对CAR T细胞的识别能力，从而产生耐药性。

此外，研究还探讨了CAR T细胞治疗的临床相关性。通过分析多个临床试验中的患者样本，研究人员发现CD19、CD20和CD22的表达水平与患者对CAR T细胞治疗的反应存在一定的相关性。例如，在治疗前的样本中，CD19的表达水平较高且具有B细胞特征的患者通常对CAR T细胞治疗反应较好，而CD19表达水平较低且具有免疫抑制性基因特征的患者则更可能对治疗产生耐药性。这提示我们，肿瘤细胞的基因表达模式可能在预测治疗反应和耐药性方面具有重要意义。

综上所述，这项研究揭示了CAR T细胞治疗中肿瘤细胞耐药性的多种机制，包括抗原丢失、抗凋亡蛋白表达增加以及跨抗原的耐药性等。同时，研究还提出了可能的策略来克服这些耐药性，例如使用Mcl-1抑制剂进行联合治疗，以及在治疗初期采用双靶点CAR T细胞疗法。这些发现不仅有助于我们更好地理解CAR T细胞治疗的耐药机制，还为未来临床治疗策略的优化提供了重要的参考。