综述：开发用于多发性骨髓瘤的反义疗法

《Cell Reports Physical Science》：Developing antisense therapeutics for multiple myeloma

本综述系统探讨了反义寡核苷酸（ASO）作为多发性骨髓瘤（MM）精准治疗新策略的潜力。文章聚焦于靶向致癌microRNA（miRNA，如miR-17-92簇、miR-125a-5p）和关键基因（如IRF4、XBP-1、STAT3）以抑制肿瘤生长、克服耐药性（如针对MCL1、NEAT1）及改善骨病（如靶向RANKL、HIF-1α）。作者强调ASO（如GapmeR、LNA）可定制化设计，联合现有疗法（如蛋白酶体抑制剂、IMiDs）有望改善复发/难治性MM患者的预后，代表了癌症治疗的新前沿。

　　

miRNA促进癌症生长和增殖

在多发性骨髓瘤（MM）中，多种miRNA通过调控关键信号通路促进肿瘤的恶性进展。例如，miR-17作为miR-17-92簇的成员，通过抑制促凋亡蛋白BIM的表达来加速肿瘤生长，其过表达与MM患者较差的生存期相关。研究显示，使用LNA GapmeR抑制剂靶向miR-17初级转录本，可有效抑制整个miR-17-92簇，并在多种MM细胞系中诱导细胞死亡。

反义寡核苷酸（ASO）的作用机制涉及三个主要阶段：杂交前、杂交和杂交后。ASO通过载体蛋白介导的内存作用进入细胞，与靶标RNA特异性杂交，进而通过招募RNase H1降解靶RNA或通过空间位阻效应抑制其翻译。ASO的化学修饰（如磷硫酰骨架、锁核酸LNA）增强了其稳定性和靶向性。

miR-125a-5p在MM中通过抑制p53及其下游效应分子（如miR-192和miR-194）来促进肿瘤生长。实验表明，抑制miR-125a-5p可上调p53活性，从而显著降低MM细胞活力。

miRNA促进骨病

MM相关的骨病主要由破骨细胞过度活化和成骨细胞功能抑制导致。miR-182不仅与药物耐药相关，还能通过抑制蛋白激酶R（PKR）来促进破骨细胞生成。研究发现，使用磷硫酰LNA ASO抑制miR-182可有效逆转这一过程。

miR-221和miR-222通过下调肿瘤抑制因子PTEN来增强破骨细胞分化，并导致地塞米松耐药。针对miR-221的LNA抑制剂在MM模型中能上调促凋亡蛋白PUMA和BBC3的表达，显著抑制细胞活力。

基因靶点促进癌症生长和增殖

多个基因在MM的增殖和存活中扮演关键角色。IRF4是浆细胞分化和存活的核心转录因子，其表达对MM细胞存活至关重要。研究表明，利用LNA模拟物抑制miR-125b-5p（其靶向IRF4 mRNA）可导致MM细胞大量死亡。

XBP-1是内质网应激和抗体分泌的关键调节因子，对浆细胞分化至关重要。在斑马鱼模型中，吗啉代寡核苷酸抑制XBP-1会破坏内质网的功能组织。胰岛素样生长因子1（IGF-1）和成纤维细胞生长因子（FGF2）等由骨髓基质细胞（BMSC）分泌的生长因子，通过激活JAK/STAT、RAS等信号通路促进MM细胞增殖、迁移和血管生成。针对这些通路的ASO（如靶向IGF-1R的2'-甲氧基乙基修饰ASO）在前列腺癌模型中显示出显著抗肿瘤效果。

基因靶点促进骨破坏

核因子κB受体活化因子配体（RANKL）是破骨细胞分化和骨吸收的主要激活剂。在MM中，RANKL的表达显著上调。使用含CpG基序的磷硫酰寡核苷酸抑制RANKL，可在体外抑制破骨细胞分化。低氧诱导因子-1α（HIF-1α）作为细胞低氧反应的主要转录调节因子，在MM中通过上调血管内皮生长因子（VEGF）等因子促进血管生成和骨破坏。针对HIF-1α的LNA抑制剂（EZN-2968）能有效降低其下游效应分子的表达。

STAT3是细胞因子（如IL-6）信号通路的关键介质，其持续激活不仅促进MM细胞增殖和耐药，还通过上调核因子ATC1（NFATc1）和RANKL来驱动破骨细胞分化。针对STAT3的第二代ASO（如AZD9150）在临床前模型中显示出良好的应用前景。

基因靶点促进耐药性

MM细胞通过多种机制对现有疗法产生耐药。例如，对抗凋亡蛋白MCL1的适应性上调是抵抗蛋白酶体抑制剂（如硼替佐米）的重要机制。ASO介导的MCL1敲低可使MM细胞对蛋白酶体抑制剂重新敏感。在免疫调节药物（IMiDs）耐药的情况下，IRF4/MYC轴的持续激活是关键因素，靶向IRF4的ASO能破坏这一促生存环路。针对NEAT1（一种长链非编码RNA）的LNA GapmeR可通过破坏 paraspeckle 的形成，削弱DNA损伤修复，从而增强MM细胞对烷化剂（如美法仑）的敏感性。

临床开发与治疗管线

尽管ASO在MM领域的临床应用仍处于早期阶段，但一些候选药物已进入临床试验。例如，靶向IRF4的Frenlosirsen（ION251）在I期试验中显示出良好的耐受性。此外，靶向B细胞成熟抗原（BCMA）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）以及端粒酶（如Imetelstat）的ASO也在其他血液恶性肿瘤或实体瘤中进行了探索，为MM的治疗提供了潜在的新方向。

递送挑战

ASO在MM治疗中的应用面临递送效率低的挑战。其负电荷和大分子量限制了其被动跨膜运输和细胞内摄取，且易被核酸酶降解。当前策略包括使用脂质纳米颗粒（LNP）封装、GalNAc偶联等靶向递送系统，以及利用MM细胞表面高表达的抗原（如CD38、SLAMF7、BCMA）进行抗体-寡核苷酸偶联，以提高ASO的靶向性和细胞内递送效率。

未来方向

ASO疗法有望与CAR-T、双特异性抗体等新兴免疫疗法以及CRISPR-Cas9等基因编辑技术联合使用，形成针对MM的多层次治疗策略。利用MM局限于骨髓的特点，局部递送ASO组合（如同时靶向IRF4、RANKL、IL-6）可能实现高效且低毒的治疗效果，为治愈MM带来新的希望。