欧洲野牛中边缘无形体（Anaplasma marginale）的首例报道——波兰地区新发现及其对濒危物种保护的警示

《Parasites & Vectors》：First report of Anaplasma marginale in the European bison Bison bonasus

本刊推荐：研究人员针对波兰濒危物种欧洲野牛（Bison bonasus）开展无形体属（Anaplasma）感染调查，首次在波兰境内及欧洲野牛中发现边缘无形体（A. marginale）。通过16S rDNA和msp4基因标记检测，揭示该病原体在东北部种群感染率达42.1%，并发现两种基因型。此发现为气候变暖背景下病原体北扩提供证据，对濒危物种健康管理具有重要警示意义。

　　

在波兰广袤的森林中，生活着一种珍贵的巨兽——欧洲野牛（Bison bonasus）。作为世界上体型最大的陆地哺乳动物之一，欧洲野牛曾一度濒临灭绝，经过百年保护努力，全球种群数量恢复至约1.1万头，其中四分之一栖息在波兰。然而，这个成功故事正面临新的挑战：有限的基因库使欧洲野牛对传染病异常敏感，而气候变化正在改变病原体的分布格局。

正是在这样的背景下，华沙大学的Anna W. Myczka带领的研究团队展开了一项关于无形体属细菌感染状况的调查。无形体是一类专性细胞内寄生的微生物，其中边缘无形体（Anaplasma marginale）对牛科动物危害尤为严重，可引起牛无形体病，表现为发热、贫血、流产甚至死亡，给畜牧业造成巨大经济损失。传统认为这种病原体主要分布在热带和亚热带地区，但近年来随着气候变暖，其分布范围不断北扩。

研究人员在2012-2024年间收集了45头欧洲野牛的脾脏样本，这些样本来自波兰两个主要野牛种群分布区：东北部的比亚沃维耶扎原始森林和克内申森林（19头），以及东南部的别什恰迪山脉（26头）。通过分子生物学方法，他们获得了令人惊讶的发现。

主要技术方法

研究采用巢式PCR和常规PCR技术，针对16S rDNA和msp4两个遗传标记进行扩增和测序。样本来源包括自然死亡、路杀个体以及经管理部门批准的选择性捕杀个体。通过系统发育分析，将获得的序列与GenBank数据库中的参考序列进行比对，构建进化树以确定菌株亲缘关系。

分子检测结果

在检测的45份样本中，无形体属总体感染率为40%（18/45）。其中，嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）检出10例，而更令人关注的是边缘无形体检出8例。值得注意的是，边缘无形体仅在波兰东北部地区发现，当地感染率高达42.1%（8/19），而东南部种群则未检测到该病原体。

基因型特征

研究人员通过msp4基因分析发现了两种不同的边缘无形体基因型。基因型1（5个序列）与匈牙利报道的导致牛致命性无形体病的菌株存在明显差异，而基因型2（3个序列）则与来自肯尼亚、乌干达、俄罗斯和以色列的菌株完全一致。16S rDNA序列分析也证实了这两种基因型的存在，它们之间仅有单个核苷酸差异。

系统发育分析

基于msp4基因构建的系统发育树显示，波兰欧洲野牛中发现的边缘无形体菌株分为两个进化枝。基因型1与欧洲菌株（匈牙利）聚为一类，而基因型2则与非洲（乌干达、肯尼亚）和俄罗斯莫斯科地区的菌株亲缘关系更近。这一发现支持了边缘无形体正在从非洲向欧洲北扩的假说，可能与气候变化有关。

讨论与意义

这是首次在波兰境内确认边缘无形体的存在，也是该病原体在欧洲野牛中的首例报道。更重要的是，这一发现将边缘无形体的分布北界从匈牙利-奥地利-瑞士一线推进到了更北的波兰地区，为气候变暖影响病原体分布提供了有力证据。

边缘无形体对欧洲野牛的健康构成严重威胁。作为牛科动物，欧洲野牛可能出现与家牛类似的临床症状，而野生种群的医疗干预难度远高于养殖动物。特别值得关注的是，波兰的欧洲野牛种群是欧洲多个重引入项目的种源基础，这意味着感染个体可能将病原体传播到新的地区。

关于传播途径，研究提出了一个有趣假设：边缘无形体在波兰的传播可能与网纹革蜱（Dermacentor reticulatus）的分布相关。该蜱种在波兰东北部大量存在，而东南部较少，这与边缘无形体的感染分布模式高度吻合。然而，这一假设仍需通过检测蜱虫携带率来验证。

结论

本研究首次证实边缘无形体已传播至波兰的欧洲野牛种群，发现了两种不同的基因型，提示可能存在多条传播路径。这一发现对欧洲野牛保护具有重要启示：首先，需加强对无形体病的监测和防控；其次，在野牛重引入项目中需考虑病原体传播风险；最后，气候变化对野生动物健康的影响需要更多关注。未来研究应着重明确边缘无形体在波兰的传播媒介和传播机制，为制定有效的保护策略提供科学依据。