CRISPR诊断的工程指南

《Chemical Communications》：Engineering guidelines for CRISPR diagnostics

CRISPR检测方法工程指南，涵盖动力学研究现状、荧光信号校准方法及常见重大错误，指出实验设计需完善信号校准和参数验证，灵敏度受酶动力学及报告分子降解限制，最后评述微流控技术的应用进展与挑战。

　　

本文综述了CRISPR检测方法设计的工程指南，包括经过实验验证的理论模型以及关于实验研究实践和报告的建议。首先，本文回顾了CRISPR动力学研究的最新进展。接着，指出了CRISPR-Cas酶动力学常数报告中普遍存在的严重错误，并指出许多CRISPR研究提供的数据不足以验证一致性或进行校准。正确的实验程序（包括信号校准）对于CRISPR动力学检测方法及其诊断技术的评估、设计和未来发展至关重要。随后，本文提供了基于荧光的CRISPR检测方法校准指南。荧光是最常见的检测方式，而校准不当是导致该领域出现重大错误的原因之一。此外，本文还讨论了酶动力学速率和报告分子降解对CRISPR检测灵敏度的影响。最后，本文总结了CRISPR检测方法在微流控技术中的应用进展及其面临的挑战。