大麻提取物组分F7通过抑制F-肌动蛋白和黏着斑重组抑制卵巢癌相关血管生成

《Pharmacological Research - Natural Products》：Suppression of ovarian cancer -related angiogenesis processes by cannabis extract fraction in vascular endothelial cells is associated with reduced F-actin and focal adhesion points reorganization

本研究聚焦卵巢癌治疗难题，探讨大麻提取物组分F7对肿瘤血管生成的影响。研究人员通过体外实验发现，尽管F7会上调血管内皮生长因子(VEGF)表达，但能显著抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的迁移和出芽能力。机制研究表明，F7通过下调CDC42、Arp2/3等关键基因表达，破坏F-肌动蛋白细胞骨架重组和黏着斑形成，从而阻断血管生成过程。该研究为开发新型抗血管生成疗法提供了新思路。

　　

在妇科恶性肿瘤中，卵巢癌以其高死亡率备受关注。多数患者确诊时已属晚期，常规手术联合铂类化疗虽为标准方案，但疾病复发和多药耐药现象普遍，导致治疗陷入困境。值得注意的是，肿瘤血管生成在这一过程中扮演关键角色——新生血管为肿瘤提供氧气和营养，支持其生长转移。然而，当前抗血管生成疗法效果参差不齐，个体差异和耐药问题突出，亟需开发新型治疗策略。

近年来，大麻(Cannabis sativa)的药用价值引起学界关注。这种植物含有上百种活性成分，包括多种萜烯、黄酮类和150余种植物大麻素。其中，大麻提取物组分F7因其对卵巢癌细胞的显著细胞毒性而备受关注。此前研究发现，F7能诱导内质网应激、阻滞细胞周期进程并促进癌细胞凋亡。但F7是否影响肿瘤微环境中的血管生成过程，仍是一个待解之谜。

为探究这一问题，研究人员开展了一项发表于《Pharmacological Research - Natural Products》的创新研究。他们建立了一套模拟肿瘤微环境的共培养体系，将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与卵巢癌细胞(OVCAR3)共同培养，系统评估F7对血管生成相关过程的影响。

研究团队运用了多种关键技术方法，包括划痕实验检测细胞迁移能力、基于细胞珠的体外出芽实验评估血管生成潜能、定量PCR分析基因表达变化、蛋白质印迹检测蛋白水平，以及共聚焦显微镜观察细胞骨架和黏着斑动态重组。这些方法为揭示F7的作用机制提供了多层次证据。

F7抑制HUVEC细胞迁移

通过划痕实验发现，F7处理22小时后能显著抑制HUVEC的迁移能力，仅有50.4%的划痕区域保持开放，而对照组几乎完全闭合(7.1%)。值得注意的是，纯化的Δ9-四氢大麻酚(THC)虽然也抑制迁移，但效果弱于F7，提示F7中的多种成分可能存在协同作用。

F7和niraparib减少HUVEC细胞出芽

在血管出芽实验中，卵巢癌细胞的存在显著促进了HUVEC的出芽能力，而F7处理则能逆转这一效应，其抑制效果与抗VEGF单克隆抗体贝伐珠单抗相当。这表明F7能有效阻断肿瘤细胞诱导的血管生成过程。

F7和THC处理增加HUVEC和OC细胞中VEGFA表达

令人意外的是，尽管F7表现出抗血管生成活性，但它却上调了HUVEC和卵巢癌细胞中血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达。这一看似矛盾的现象提示，F7可能通过干预VEGF下游信号通路发挥抑制作用。

F7处理降低肌动蛋白重组相关基因和蛋白表达

深入机制研究发现，F7能显著降低与肌动蛋白聚合和分支相关的基因表达，包括Arp2、Arp3、VASP和WAVE。同时，细胞分裂周期42(CDC42)的表达也受到抑制，这一小G蛋白是调节VEGF诱导的F-肌动蛋白细胞骨架重组的关键因子。共聚焦显微镜观察证实，F7处理确实减少了应激纤维的形成。

F7处理降低黏着斑形成相关基因和蛋白表达

血管出芽过程中，尖端细胞通过丝状伪毛引导方向，这些结构通过黏着斑(FA)锚定在细胞外基质上。研究发现，F7能降低整合素αV(ITGαv)、整合素β1(ITGβ1)、桩蛋白(PXN)、踝蛋白(TLN1)和纽蛋白(VCL)等黏着斑相关基因的表达。Western blot和免疫荧光进一步证实，ITGαv、ITGβ1和PXN蛋白水平降低，且PXN在细胞边缘的定位减少，而在胞质中分布增加，表明黏着斑组装受损。

研究结论与讨论部分指出，尽管F7处理上调了VEGF表达，但它通过抑制CDC42-Arp2/3信号轴，破坏了F-肌动蛋白细胞骨架重组和黏着斑形成，从而有效阻断了内皮细胞迁移和出芽这两个血管生成的关键步骤。这种"上游激活、下游抑制"的独特作用模式，使F7成为一种有前景的抗血管生成剂。

该研究的创新之处在于首次揭示了大麻提取物组分F7通过靶向细胞骨架动力学抑制肿瘤血管生成的新机制。不同于传统的VEGF靶向药物，F7作用于血管生成过程的更下游环节，可能为克服现有抗血管生成药物的耐药问题提供新策略。

然而，研究人员也谨慎指出，由于大麻成分的复杂性，F7的确切活性成分及其相互作用仍需进一步解析。此外，尽管体外实验结果令人鼓舞，但F7在体内对肿瘤血管化的影响及其对正常组织血管生成的可能副作用，仍需通过动物实验验证。

总之，这项研究为大麻提取物的抗肿瘤应用提供了新的理论依据，提示在常规癌症治疗方案中联合使用特定大麻提取物组分，可能通过抑制肿瘤诱导的血管生成而增强治疗效果。随着医学大麻研究的深入，这种古老植物的现代药用价值正被不断发掘，为癌症治疗带来新的希望。