亚得里亚海弧菌抗菌耐药性初步评估：空间格局与"一体健康"启示

《Regional Studies in Marine Science》：Preliminary assessment of antimicrobial resistance in Vibrio spp. from the Adriatic Sea: spatial patterns and One Health implications

本研究针对亚得里亚海养殖区弧菌属的抗菌耐药性（AMR）问题，通过采集258株分离株进行耐药性分析，发现哈维弧菌群和灿烂弧菌群对氨苄青霉素（62.8%）、红霉素（33.3%）等抗生素呈现高耐药性，58.5%分离株对≥2种抗生素耐药，首次揭示了南北海域差异化的耐药模式，为地中海养殖业AMR监测提供了重要基线数据。

　　

在亚得里亚海碧蓝的海水之下，一场看不见的微生物战争正在上演。弧菌属细菌——这些天然存在于海洋环境中的微生物，既是水生生态系统的重要组成部分，也是潜在的健康威胁者。随着全球水产养殖业的快速发展，特别是欧洲鲈鱼（Dicentrarchus labrax）和金头鲷（Sparus aurata）等经济鱼类的集约化养殖，抗生素的广泛使用导致抗菌耐药性（AMR）问题日益严峻。克罗地亚作为地中海地区重要的水产养殖国，其沿海养殖业预计到2030年将增长15%，但关于当地弧菌耐药性的系统性研究却十分匮乏。

更令人担忧的是，弧菌不仅影响养殖鱼类的健康，导致 vibriosis（弧菌病）造成大量死亡和经济损失，还可能通过污染的海产品或海水接触传播给人类。其中，副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）、创伤弧菌（V. vulnificus）和溶藻弧菌（V. alginolyticus）等物种对人类健康构成直接威胁。尽管克罗地亚遵循欧盟抗生素使用规定，但缺乏对当地细菌种群耐药性模式的深入了解，加之亚得里亚海南北部存在显著环境差异——北部受淡水输入和富营养化影响，南部则水温较高、营养更贫乏——这些因素都可能影响耐药性的空间分布格局。

正是在这样的背景下，由Karla Orli?领导的研究团队在《Regional Studies in Marine Science》上发表了这项开创性研究。研究人员采用"一体健康"（One Health）理念，首次对亚得里亚海东部养殖系统的弧菌AMR进行了综合评估。他们从2016年至2021年间，分季节采集了北部、中部和南部亚得里亚海三个养殖场的样本，包括养殖鱼类（皮肤和鳃）、海水、沉积物和生物污损贻贝，共获得258株弧菌分离株。

关键技术方法包括：通过16S rRNA基因测序进行弧菌属/群水平的分类鉴定；采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗生素敏感性测试，测试涵盖氨苄青霉素、红霉素、链霉素等常用抗生素；计算多药耐药指数（MAR）评估耐药程度；利用统计学方法分析不同海域和生态 compartments（水体、沉积物、生物体）间的耐药性空间差异。

研究地点和样本收集

研究在亚得里亚海北部（NA）、中部（CA）和南部（SA）的三个海水鱼类养殖场进行，这些养殖场采用10米水深的浮动网箱半开放海域养殖模式。采样时间跨度从2016年秋季至2021年夏季，共收集258株弧菌分离株，来源包括鱼类皮肤和鳃、海水、沉积物以及污损贻贝。

结果

样本分布显示明显的区域特征：北部亚得里亚海分离株主要来自海水（57.7%），中部各来源分布相对均匀，而南部则以贻贝为代表（37.0%）。 taxonomic assignment（分类学归属）鉴定出 Harveyi群（47.29%）和 Splendidus群（43.02%）为优势菌群，Anguillarum群占9.69%。

抗生素敏感性测试揭示了令人担忧的耐药模式：对氨苄青霉素的耐药率最高（62.8%），其次为红霉素（33.3%）、链霉素（29.1%）、亚胺培南（23.3%）和土霉素（19.4%）。更值得关注的是，58.5%的分离株对≥2种抗生素耐药，37.6%的分离株表现出多药耐药指数（MAR）≥0.25。

空间分析发现了明显的南北差异：来自北部和中部亚得里亚海的Harveyi群分离株对氨苄青霉素表现出更高的耐药性，而南部亚得里亚海的Splendidus群分离株则对氟苯尼考和四环素有更强耐药性。

讨论

本研究首次在弧菌属/群水平上对亚得里亚海养殖环境中的AMR进行了综合评估。高耐药率特别是对氨苄青霉素的普遍耐药（62.8%），与最近的地中海全基因组学研究结果一致，所有弧菌分离株均对氨苄青霉素表现表型耐药。58.5%的分离株对≥2种抗生素耐药，且37.6%的MAR指数≥0.25，表明耐药性问题已相当严重。

空间变异模式提示，局部环境条件和水产养殖实践共同塑造了耐药性动态。北部亚得里亚海较高的富营养化程度和淡水输入可能促进了Harveyi群对氨苄青霉素的耐药性发展，而南部较温暖、稳定的环境条件可能有利于Splendidus群对氟苯尼考和四环素的耐药性选择。

从"一体健康"视角看，弧菌在海洋生态系统中的多种生态位——从水体、沉积物到生物污损群落和鱼类共生部位——为抗菌素耐药基因的储存和传播提供了多重途径。耐药细菌可能通过水、沉积物和海洋生物扩散，影响野生鱼类种群和海鲜安全。

结论

本研究为亚得里亚海弧菌的AMR提供了新颖见解，揭示了菌群和区域间的明显空间差异，确认Harveyi、Splendidus和Anguillarum群因高MAR值而具有特殊相关性。这些发现强调耐药菌株不仅威胁水产养殖生产力，还可能通过耐药基因转移带来更广泛的生态和公共卫生风险。

为解决这些挑战，需要制定区域适应的抗生素管理策略，并建立基于"一体健康"的监测框架。未来研究应结合环境参数（温度、盐度）和抗生素使用数据，以更全面理解AMR驱动机制。本研究为地中海水产养殖业的AMR监测和公共卫生政策制定提供了重要基线数据。