基于RNAi的PLGA纳米颗粒，用于靶向沉默NNV衣壳蛋白

《Aquaculture International》：RNAi-based PLGA nanoparticles for targeted silencing of NNV capsid protein

垂直传播的神经坏死病毒（NNV）对水产养殖危害显著，本研究通过双乳液法成功制备了PLGA纳米颗粒递送系统，其优化后的物理化学性质（粒径110nm，zeta电位+30.91mV）确保了高稳定性和高效细胞递送。实验证实三款靶向CP的siRNA可完全逆转病毒诱导的EPC细胞毒性，并发现PBS悬浮体系包封效率显著优于DEPC处理水。该成果为RNAi介导的纳米抗病毒疗法提供了重要技术参数。

　　

摘要

神经坏死病毒（NNV）可以通过垂直传播从亲代传递给后代，导致幼鱼的高死亡率。因此，对受精卵进行有效的消毒对于可持续的水产养殖生产至关重要。本研究开发了负载siRNA的PLGA纳米颗粒（NPs），用于靶向沉默NNV衣壳蛋白（CP），并在体外评估了其治疗潜力。通过双乳化方法合成了具有优化理化特性的siRNA-PLGA纳米颗粒：PLGA-PEI/三氯甲烷/PEG（W/O/W）体系制备出了单分散、球形的纳米颗粒（超声处理后粒径约为110纳米），具有较高的ζ电位（+30.91 mV），从而保证了胶体稳定性和高效的细胞递送能力。在EPC细胞中过度表达NNV CP会导致快速的细胞毒性反应，包括核异常和细胞死亡，这种情况可以通过同时给予三种合理设计的针对CP的siRNA得到完全缓解。值得注意的是，重新悬浮在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中的纳米颗粒显示出更高的siRNA包封效率，而重新悬浮在经过二乙基焦碳酸酯处理的水中的纳米颗粒则几乎没有siRNA的包封效果。这些发现强调了配方参数在纳米颗粒设计中的重要性，并凸显了基于RNAi的PLGA纳米疗法在对抗水生病毒感染方面的潜力。