基于OTP/ASCL1表达分型的肺神经内分泌肿瘤表型图谱：组织学、激素表达与预后的相关性研究

《Endocrine Pathology》：Phenotypic Landscape of Pulmonary Neuroendocrine Tumors: Subtyped by OTP/ASCL1 Expression Correlated with Histology, Hormones and Outcome

本研究针对肺神经内分泌肿瘤（NET）的分子异质性，通过OTP和ASCL1转录因子表达谱将152例原发肺NET分为四个亚型（O+/A+、O+/A-、O-/A+、O-/A-），系统分析了各亚型与组织学特征、激素表达（GRP/ACTH/calcitonin/serotonin）、治疗靶点（SSTR2A/SSTR5/DLL3）及预后的关联。研究发现OTP阴性亚型预后较差，但多因素分析显示Ki-67为基础的WHO分级（G1-G3）是唯一独立预后因素。该研究为肺NET的精准分型提供了新的生物学依据。

　　

肺神经内分泌肿瘤（Neuroendocrine Tumors, NETs）作为肺部罕见肿瘤，长期以来依赖典型类癌（Typical Carcinoid, TC）与非典型类癌（Atypical Carcinoid, AC）的组织学分类。然而，临床实践中发现，即使组织学类型相同的患者，其疾病进展速度和治疗反应也存在显著差异，提示肺NET存在尚未被充分认识的分子异质性。近年来，研究开始聚焦于转录因子在肿瘤分型中的价值，其中 orthopedia homeobox 蛋白（OTP）和 achaete-scute 家族 bHLH 转录因子 1（ASCL1）在肺NET中的表达模式逐渐受到关注。OTP被认为是肺NET的特异性标记物，其表达与较好预后相关，而ASCL1则参与神经内分泌分化过程。然而，这些转录因子表达与肿瘤的组织学特征、激素产生模式以及临床结局之间的系统性关联仍不明确。为此，由 Ayako Ura 等学者在《Endocrine Pathology》发表的研究，首次通过大样本队列揭示了基于OTP/ASCL1表达的肺NET分子分型图谱，为理解该疾病的生物学多样性提供了新视角。

本研究采用多中心回顾性设计，纳入170例肺NET患者，其中152例为原发切除肿瘤。关键技术方法包括：1) 组织微阵列（TMA）构建及免疫组织化学染色检测OTP、ASCL1、激素（GRP、ACTH、calcitonin、serotonin）和治疗相关标记（SSTR2A、SSTR5、DLL3）；2) 组织学评估基于WHO胸部和内分泌器官肿瘤分类标准；3) 统计学分析采用Kaplan-Meier生存分析和多因素Cox回归模型；4) 通过27例匹配原发与转移灶样本验证分子亚型的稳定性。

OTP和ASCL1在152例原发肺NET中的表达分组

研究首先通过免疫组化检测OTP和ASCL1表达，发现61%的肿瘤表达OTP，47%表达ASCL1。根据表达组合将肿瘤分为四组：O+/A+（38%）、O+/A-（23%）、O-/A+（14%）和O-/A-（25%）。

TTF1在O+/A+亚型中高表达（74%），而HNF1A多见于O+/A-和O-/A-亚型。CD44表达与OTP阳性显著相关，尤其在O+/A-亚型中达68%。

临床病理学特征

各亚型呈现 distinct 的临床特征：O+/A+亚型多见于老年女性（中位年龄72岁），肿瘤体积小（中位1.2 cm），中央或外周分布均匀；O+/A-亚型患者更年轻（中位56岁），以女性为主，肿瘤多位于中央；O-/A+亚型年龄分布居中（中位58岁），性别比例均衡；O-/A-亚型则多见于老年男性吸烟者（中位70岁），以中央型为主。各组在肿瘤侧别、Ki-67指数或淋巴结状态上无显著差异。

组织学特征

组织学上，O+/A+亚型以实体生长模式（97%）和纺锤体细胞特征（76%）为主，常伴有气道播散（STAS, 77%）和神经内分泌细胞增生（PNECH）；O+/A-和O-/A-亚型则更多表现为梁状结构（各43%）；oncocytic特征集中见于OTP阴性亚型（O-/A+和O-/A-共占86%）。

支持细胞（SOX10阳性）在O+/A+亚型中最多见（68%），而O-/A-亚型中完全缺失。

激素表达

GRP是最常表达的激素（68%），且在O+/A+亚型中呈弥漫性强阳性（100%）；ACTH和calcitonin表达多见于O+/A+亚型（79%和31%），而serotonin主要在O-/A-亚型中检出（24%）。

三名库欣综合征患者的肿瘤均显示弥漫性ACTH表达，但无激素相关临床症状的病例多呈局灶阳性。

治疗相关标记表达

SSTR2A在O-/A-亚型中表达最高（76%），SSTR5多见于O+/A-亚型（30%），而DLL3高表达集中于O+/A+亚型（60%）。这些标记的表达差异为靶向治疗提供了潜在依据，例如DLL3高表达亚型可能对DLL3靶向疗法敏感。

12例患者肿瘤间异质性比较

对12例多病灶患者的27个样本分析显示，OTP/ASCL1表达谱在原发与转移灶间高度一致。

激素表达在匹配样本中也基本稳定，仅两例转移灶中出现局灶性serotonin表达异质性。转移灶的Ki-67指数显著高于原发灶（中位数9% vs. 2%），提示增殖活性增强是疾病进展的共性特征。

患者结局

单因素分析显示，OTP阴性肿瘤与较差的无病生存（DFS）相关（p=0.006），而ASCL1表达无预后价值。

亚型间比较发现O+/A-亚型10年DFS达100%，而O-/A-亚型仅为50%。多因素分析确认Ki-67为基础的WHO分级是DFS的独立预测因子（p=0.04），强调增殖指数在预后分层中的核心地位。

本研究通过整合OTP和ASCL1表达，将肺NET划分为四个具有独特临床病理和分子特征的亚型。O+/A+亚型以纺锤体形态、弥漫性GRP表达和高DLL3为特征；O+/A-亚型与梁状结构和SSTR高表达相关；OTP阴性亚型（O-/A+和O-/A-）则富集oncocytic特征和serotonin表达，且预后较差。尽管OTP表达具有预后提示价值，Ki-67指数仍是当前最可靠的独立预后指标。该分子分型框架不仅深化了对肺NET异质性的理解，还为未来靶向治疗和临床试验设计提供了生物学基础。尤其值得注意的是，日本患者中OTP阴性亚型比例显著高于德国队列，这一人群差异的机制有待进一步探索。