地高辛通过下调ANGPTL3蛋白，作用于BHLHE40通路，从而抑制宫颈癌细胞中的上皮-间充质转化过程

《Journal of Natural Medicines》：Digoxin targets BHLHE40 to inhibit epithelial-mesenchymal transition in cervical cancer cells via downregulation of ANGPTL3

本研究揭示BHLHE40通过激活ANGPTL3促进宫颈癌上皮-间质转化及肺转移，地高辛靶向抑制该轴发挥抗转移作用。

　　

摘要

本研究旨在探讨BHLHE40及其靶向药物地高辛在宫颈癌中的作用机制。通过UALCAN和Human Protein Atlas数据库评估了BHLHE40在宫颈癌样本中的临床意义。随后，利用CCK-8、伤口愈合实验、Transwell迁移实验和Western blot分析，研究了BHLHE40对细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化（EMT）的影响。进一步建立了小鼠肺转移模型，以验证BHLHE40在体内的促转移作用。通过JASPAR基序预测、染色质免疫沉淀-定量PCR（ChIP-qPCR）和荧光素酶报告基因实验，阐明了BHLHE40对ANGPTL3的转录调控机制。分子对接实验和细胞热位移分析（CETSA）用于明确地高辛与BHLHE40之间的分子相互作用。研究发现，BHLHE40在宫颈癌组织中显著上调，并与肿瘤晚期、淋巴结转移和不良预后呈正相关。敲低BHLHE40可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，并减弱EMT过程；沉默BHLHE40可减少裸鼠体内的肺转移结节数量。机制研究表明，BHLHE40直接结合到ANGPTL3的启动子区域并增强其转录活性。敲低ANGPTL3可逆转BHLHE40引起的迁移和侵袭能力增强以及EMT相关表型变化。地高辛结合到BHLHE40的保守结构域，下调BHLHE40和ANGPTL3的表达，从而抑制EMT和细胞运动性；而BHLHE40的过表达可逆转地高辛的这些抑制作用。综上所述，我们的研究结果表明，BHLHE40通过转录激活ANGPTL3促进宫颈癌中的EMT和转移过程，而地高辛则通过靶向这一途径发挥抗EMT作用。这些数据强调了BHLHE40-ANGPTL3轴在宫颈癌进展中的关键作用，并提示重新利用地高辛可作为抑制该疾病EMT的新治疗策略。

图形摘要

BHLHE40/ANGPTL3在宫颈上皮癌（CESC）中的作用示意图：BHLHE40通过ANGPTL3促进CESC的上皮-间质转化，而地高辛通过特异性结合BHLHE40来阻断这一过程。

本研究旨在探讨BHLHE40及其靶向药物地高辛在宫颈癌中的作用机制。通过UALCAN和Human Protein Atlas数据库评估了BHLHE40在宫颈癌样本中的临床意义。随后，利用CCK-8、伤口愈合实验、Transwell迁移实验和Western blot分析，研究了BHLHE40对细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化（EMT）的影响。进一步建立了小鼠肺转移模型，以验证BHLHE40在体内的促转移作用。通过JASPAR基序预测、染色质免疫沉淀-定量PCR（ChIP-qPCR）和荧光素酶报告基因实验，阐明了BHLHE40对ANGPTL3的转录调控机制。分子对接实验和细胞热位移分析（CETSA）用于明确地高辛与BHLHE40之间的分子相互作用。研究发现，BHLHE40在宫颈癌组织中显著上调，并与肿瘤晚期、淋巴结转移和不良预后呈正相关。敲低BHLHE40可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，并减弱EMT过程；沉默BHLHE40可减少裸鼠体内的肺转移结节数量。机制研究表明，BHLHE40直接结合到ANGPTL3的启动子区域并增强其转录活性。敲低ANGPTL3可逆转BHLHE40引起的迁移和侵袭能力增强以及EMT相关表型变化。地高辛结合到BHLHE40的保守结构域，下调BHLHE40和ANGPTL3的表达，从而抑制EMT和细胞运动性；BHLHE40的过表达可逆转地高辛的这些抑制作用。综上所述，我们的研究结果表明，BHLHE40通过转录激活ANGPTL3促进宫颈癌中的EMT和转移过程，而地高辛通过靶向这一途径发挥抗EMT作用。这些数据强调了BHLHE40-ANGPTL3轴在宫颈癌进展中的关键作用，并提示重新利用地高辛可作为抑制该疾病EMT的新治疗策略。

图形摘要

BHLHE40/ANGPTL3在宫颈上皮癌（CESC）中的作用示意图：BHLHE40通过ANGPTL3促进CESC的上皮-间质转化，而地高辛通过特异性结合BHLHE40来阻断这一过程。