在受控条件下，应用卵巢授精方法实现里海 Kutum 鱼（Rutilus frisii）的人工繁殖

《Aquaculture Reports》：Application of ovarian insemination method for the artificial reproduction of Caspian kutum ( Rutilus frisii) under controlled conditions

提高 Caspian kutum 人工繁殖效率，通过卵巢注射技术（sGnRHa+domperidone）与传统激素诱导（IP）及人工授精方法对比，发现卵巢注射组（T3）受精率达96.9%，显著高于其他组（C1/C2未排卵，T2a/T4a受精率低于80%），但孵化率、存活率与畸形率无差异。研究证实卵巢注射可替代传统IP激素注射，但需结合新鲜精子以提高效率。

　　这项研究聚焦于一种新的鱼类繁殖技术——卵巢注射法，旨在将其与传统的激素诱导和人工授精方法进行比较，以评估其在控制繁殖中的效果，特别是在黑海 Kutum（Rutilus frisii）这一重要经济鱼类的繁殖过程中。黑海 Kutum 是一种来自黑海的本土鱼类，属于鲤科，不仅在生态上具有重要价值，而且对当地渔业产业至关重要。由于其自然繁殖受到栖息地破坏和河流污染的影响，黑海 Kutum 的种群数量面临严峻挑战，因此人工繁殖技术成为保护这一物种的关键手段。

在实验中，研究人员选取了60条雌鱼，平均体重为1484.9±46.7克，随机分配到六个不同的处理组中，每个组有10条鱼。这些处理组包括：通过腹腔注射生理盐水（C1）、通过导管将生理盐水注入卵巢（C2）、通过腹腔注射 sGnRHa 和 domperidone（T1）、通过腹腔注射 sGnRHa 和 domperidone 并通过导管将精子注入卵巢（T2）、通过导管将 sGnRHa 和 domperidone 注入卵巢（T3）、以及通过导管将 sGnRHa、domperidone 和精子混合物注入卵巢（T4）。此外，研究人员还设定了两个子组，用于测试卵巢注射精子的质量，包括使用额外新鲜精子（T2b 和 T4b）和不使用额外精子（T2a 和 T4a）的情况。

研究结果显示，控制组（C1 和 C2）中没有鱼发生排卵，说明单纯的生理盐水注射无法诱导排卵。而在实验组中，所有处理均成功诱导了排卵，达到了100%的排卵成功率。其中，T3组的受精率最高，达到96.9±0.47%，显著高于T2a（73.7±1.52%）和T4a（76.7±1.90%）。尽管受精率存在差异，但孵化率、存活率和畸形率在所有处理组之间没有显著差异，表明卵巢注射技术在提高繁殖成功率的同时，并未对后代质量造成负面影响。

卵巢注射技术是一种非侵入性的方法，它通过将激素或精子直接注入卵巢，从而实现对鱼类繁殖的控制。这种方法相比传统的体外受精，减少了对母鱼同步化的需求，同时还能提高操作的灵活性和效率。在实验中，通过导管将激素和精子混合物注入卵巢的T3组和T4组均实现了100%的排卵率，这说明该技术在诱导最终卵母细胞成熟和促进繁殖方面具有显著效果。然而，值得注意的是，当不使用额外的新鲜精子进行受精时，受精率较低，这表明在卵巢注射后，精子的质量可能会有所下降。因此，研究人员建议，这种技术更适合在需要短期精子储存的情况下使用，而非完全替代传统方法。

在实际操作中，卵巢注射需要特别注意精子的储存时间。研究表明，精子在卵巢中可以保持受精能力长达48小时，这为人工繁殖提供了更多的时间选择。此外，实验中还发现，注射后精子的活力和浓度对于最终的受精效果至关重要。因此，在选择注射方法时，需要综合考虑精子质量、鱼类的成熟度以及操作的具体条件。

除了排卵和受精率，研究还评估了孵化率、幼鱼存活率以及畸形率等关键指标。这些指标在所有处理组中均表现出相似的结果，表明卵巢注射技术在维持后代质量方面具有良好的表现。这种技术的实施不仅有助于提高人工繁殖的成功率，还能够减少对母鱼的依赖，从而降低繁殖成本并提高繁殖效率。

在讨论部分，研究人员指出，卵巢注射技术的应用需要充分考虑多种因素，包括鱼类的成熟度、精子的质量、注射的时机和位置等。这些因素可能会影响该技术的最终效果。例如，某些研究显示，卵巢注射在某些鱼类中对受精率没有显著影响，而在其他鱼类中则可能降低受精成功率。因此，为了确保卵巢注射技术的有效性，必须根据具体的鱼类特性进行调整和优化。

此外，卵巢注射技术的生理机制仍然需要进一步研究。尽管已有研究表明，激素可以通过卵巢壁进入血液循环，进而影响脑部和垂体的激素分泌，但这些激素在卵巢中的具体作用机制仍不明确。因此，未来的研究应着重探讨卵巢注射技术对鱼类繁殖过程的生理影响，以及其在不同水产养殖系统中的可行性。

总体而言，这项研究为黑海 Kutum 的人工繁殖提供了新的思路和方法。虽然卵巢注射技术在某些情况下可能不如传统方法高效，但其在诱导排卵和提高繁殖成功率方面的潜力不容忽视。未来，随着对这一技术的深入研究，有望进一步优化其操作流程，提高其在实际应用中的效果，从而为黑海 Kutum 的保护和可持续发展提供有力支持。