腹腔镜与半腹腔镜胚胎移植对母羊应激水平及躺卧行为影响的短期比较研究

《Journal of Animal Science》：Short communication: salivary cortisol concentrations and lying behavior of ewes in response to semi-laparoscopic and laparoscopic embryo transfer

本研究针对绵羊胚胎移植(ET)过程中不同手术方式对动物福利的影响问题，开展了腹腔镜(L)与半腹腔镜(SL) ET技术对母羊唾液皮质醇浓度和躺卧行为的比较研究。结果表明两种ET技术与对照组相比均未引起显著应激差异，证实了在适当麻醉和镇痛下，这两种微创技术均可作为动物福利友好的繁殖技术选择。

　　

在现代化畜牧业发展中，辅助生殖技术(ART)已成为推动遗传改良和提高繁殖效率的重要工具。其中胚胎移植(ET)技术尤其受到重视，它能够使优质母羊产生比自然繁殖更多的后代。然而，这些技术的应用必须建立在动物福利保障的基础上，如何最大限度地减少手术对动物造成的疼痛和应激，是科研人员和兽医工作者面临的重要课题。

目前，绵羊胚胎移植主要采用腹腔镜(L)和半腹腔镜(SL)两种技术。腹腔镜技术创伤小、操作快，但需要特殊设备和专业技能；半腹腔镜技术虽然切口稍大，但在某些条件下更易实施。传统观点认为，侵入性较小的手术方式应该对应激水平影响较小，但这一假设需要科学数据的验证。此外，单纯的手术操作与动物在手术过程中的束缚、麻醉等因素都可能对动物造成应激，如何区分这些因素的影响程度，对于优化手术方案、提高动物福利具有重要意义。

为了解决这些问题，来自匈牙利德布勒森大学和兽医大学的Melinda Bagi等研究人员在《Journal of Animal Science》上发表了一项创新性研究，通过监测唾液皮质醇浓度和躺卧行为变化，系统评估了两种胚胎移植技术对母羊应激水平的短期影响。

研究人员采用了多项关键技术方法开展本研究。实验选取40只2-6岁的杂交肉用型母羊，随机分为腹腔镜组(L，n=15)、半腹腔镜组(SL，n=10)和对照组(Control，n=15)。所有动物在手术前2天被安置在独立栏位中进行适应，对照组动物仅被置于腹腔镜支架中6分钟而不进行实际手术操作。

唾液皮质醇检测采用放射免疫分析法(RIA)，使用特异性皮质醇抗体，在手术前、术后1小时、2小时和24小时四个时间点采集样本。行为监测采用HOBO Pendant G加速度计固定于羊左后腿，以30秒间隔记录躺卧和站立行为，数据分析时去除了术后1小时的麻醉恢复期数据。统计分析使用R软件(4.4.1版本)建立线性混合模型，比较各组间差异。

唾液皮质醇浓度

研究结果显示，唾液皮质醇浓度在不同处理组间无显著差异(p=0.4113)。所有组别的皮质醇浓度在术后1小时(对照组：4.8±0.5 ng/mL；L组：5.1±0.5 ng/mL；SL组：4.2±0.7 ng/mL)和2小时(对照组：5.5±0.5 ng/mL；L组：5.9±0.5 ng/mL；SL组：4.8±0.7 ng/mL)均较基线水平(对照组：3.8±0.5 ng/mL；L组：3.7±0.5 ng/mL；SL组：3.1±0.7 ng/mL)有所升高，但在术后24小时恢复至基线水平。值得注意的是，仅对照组和L组的术后升高达到统计学显著性，而SL组的变化不显著。

躺卧行为

躺卧行为分析表明，各组在手术前后24小时的总躺卧时间无显著差异(p=0.7905)。然而，所有组别的躺卧次数在术后显著减少(p<0.0001)，同时平均躺卧持续时间相应延长(p<0.0001)。具体而言，对照组躺卧次数从10.8±1.6次减少到7.1±1.6次，L组从14.6±1.8次减少到8.3±1.8次，SL组从12.1±1.9次减少到5.4±1.9次。相应地，平均躺卧持续时间在各组均显著延长，对照组从41.5±6.6分钟增加到65.2±6.6分钟，L组从40.0±7.4分钟增加到75.3±7.4分钟，SL组从28.5±8.1分钟增加到57.9±8.1分钟。最大躺卧持续时间在各组间无显著差异。

研究结论表明，腹腔镜和半腹腔镜胚胎移植技术在适当的麻醉和镇痛条件下，不会对母羊造成显著的额外应激。这一发现具有重要的理论和实践意义。首先，它证实了现代微创生殖技术在动物福利方面的优势，为这些技术在畜牧业中的推广应用提供了科学依据。其次，研究结果提示，手术过程中的束缚和准备程序本身就会产生一定的应激反应，这与实际手术操作的应激程度相当。这一发现有助于重新认识手术应激的主要来源，为优化手术流程提供了方向。

值得注意的是，半腹腔镜组在某些指标上表现出更低的应激反应，这一现象值得进一步研究。可能的原因包括不同麻醉方案的效果差异，或者手术持续时间等因素的影响。此外，所有组别在术后表现出的躺卧行为变化(躺卧次数减少但持续时间延长)可能与麻醉后效应、疼痛缓解措施的有效性，或术前饥饿和隔离的累积影响有关。

本研究采用了唾液皮质醇检测和加速度计行为监测两种非侵入性方法，为动物应激评估提供了更加福利友好的技术路径。这些方法不仅减少了实验动物的痛苦，也提高了数据的可靠性和连续性，为未来相关研究提供了方法论参考。

总之，这项研究为评估和比较不同胚胎移植技术的动物福利影响提供了重要科学数据，证实了在规范操作下，腹腔镜和半腹腔镜技术均可作为应激较小的选择。研究结果对促进动物福利友好的畜牧业发展，平衡生产效率与动物福利的关系具有积极意义，也为相关技术的优化和改进指明了方向。未来的研究可以进一步扩大样本量，细化监测时间点，以更全面地揭示手术应激的动态变化规律。