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通过镧系螯合标记和ICP-MS检测技术,利用C–CP光纤尖端分离尿外泌体的综合工作流程
《Analytical Chemistry》:Integrated Workflow for the Quantification of Urinary Exosomes Isolated via C–CP Fiber Tips with Lanthanide Chelation Labeling and ICP-MS Detection
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年11月07日 来源:Analytical Chemistry 6.7
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外泌体定量新方法基于毛细管通道聚合物纤维尖端结合铒盐氯化物标记和电感耦合等离子体质谱检测,通过优化标记浓度和条件实现线性关系(R2>0.95)及检测限1.16×102 exosomes/mL,有效解决了复杂生物样本中纯化与形态保持难题。

外泌体是一类尺寸在30至150纳米之间的细胞外囊泡(EVs),在临床诊断和生化研究中发挥着重要作用。它们从细胞中释放出来,参与多种生物过程,包括细胞间通信和疾病传播。然而,定量外泌体面临的主要挑战在于如何从复杂的生物基质中分离出纯净且形态完整的外泌体。本研究提出了一种新的外泌体定量方法:使用带有毛细通道的聚合物(C–CP)纤维进行分离,去除未结合的金属标记物(氯化镱YbCl3)进行标记,再通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)进行定量分析。采用聚酯(PET)材质的C–CP纤维不仅能够快速、经济地分离外泌体,还能保持其形态完整性。三价镧系离子(此处为Yb3+)与外泌体磷脂双层中的磷酸基团之间存在众所周知的螯合作用,使得定量分析具有高灵敏度;最佳标记条件为在37°C下使用10 mM的YbCl3处理30分钟。实验结果显示,YbCl3的ICP-MS信号强度与外泌体数量之间存在线性关系(R2 > 0.95),检测限为每毫升1.16 × 102个外泌体。这种集成工作流程有望与靶向生物标志物标记技术结合,成为一种用于临床诊断的全面定量和鉴定方法。
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