利用无标记荧光适配体酶在现场检测实际样品中的多种肝毒性吡咯里西啶生物碱

《Analytical Chemistry》：On-Site Detection of Multiple Hepatotoxic Pyrrolizidine Alkaloids in Real Samples Using Label-Free Fluorescent Aptazymes

无标记荧光aptazyme传感器LFAzyme用于快速检测肝毒性吡咯里西啶生物碱（HPAs），通过血红素和过氧化氢淬灭荧光，HPAs结合aptamer导致传感器分解恢复荧光，检测限低至43 nM，茶和蜂蜜样本验证回收率97.00–103.15%，适用于现场肉眼可见检测。

　　

肝毒性吡咯里西啶生物碱（HPAs）是一种环境和食物中的毒素，存在于6000多种开花植物中，对人类健康构成严重威胁。因此，在生产、加工和运输过程中快速、准确地检测HPAs是减少人体接触这些毒素的初步方法。在这项研究中，我们开发了一种无标记荧光适配体酶（LFAzyme），可用于实时样品中HPAs的快速、低成本且可视化的检测。LFAzyme由一个识别段（RS）和一个“辅助”DNA（HD）自组装而成，在血红素和H?O?的存在下能够抑制罗丹明B（RhB）的荧光。当加入HPAs时，目标物质会优先与含有适配体序列的RS结合，导致LFAzyme失活并恢复RhB的荧光。该检测方法能够在5分钟内肉眼识别出低至0.1 μM的HPAs浓度，整个分析过程仅需15分钟。使用微孔板读数仪测得的检测限为43 nM。通过对含HPAs的真实样品（包括茶叶和蜂蜜）进行验证，我们发现HPAs的回收率在97.00–103.15%之间，结果令人满意。LFAzyme有望用于现场检测以及利用现有适配体进行其他目标物质的肉眼识别。