滁州菊花总黄酮对大鼠脑血管扩张的作用机制

《Chinese Journal of Integrative Medicine》：Effect and Mechanism of Cerebrovasodilation Induced by Total Flavonoids of Chuzhou Chrysanthemum in Rats

本实验探究了滁州菊花总黄酮（TFCC）在大鼠脑基底动脉（CBA）中的血管舒张作用及其机制，发现TFCC通过内皮依赖和非依赖途径降低血管平滑肌细胞内钙浓度，抑制L型钙通道并激活BK钙通道。

　　

摘要

目的

研究滁州菊花（TFCC）中的总黄酮类化合物对大鼠脑血管的舒张作用及其机制。

方法

分离出大鼠的脑基底动脉（CBA），并在用100 nmol/L U₄₆₆₁₉或30 mmol/L KCl预处理后，利用压力测力系统测量TFCC（10–2,560 mg/L）引起的血管舒张效应。添加H₂S合成酶半胱硫氨酸-γ-裂解酶（CSE）抑制剂dl-丙炔基甘氨酸（PPG，100 μmol/L）、大 conductance Ca²⁺激活的钾离子（BK_Ca）通道阻滞剂伊贝里毒素（IBTX，100 nmol/L）和L型Ca²⁺通道阻滞剂硝苯地平（100 nmol/L），以确定这些抑制剂对TFCC诱导的血管舒张作用的影响。使用KCl（30 mmol/L）作为收缩剂，通过测量大鼠脑血管平滑肌细胞（VSMCs）的长轴长度来检测TFCC引起的舒张效应。通过荧光方法测定IBTX或硝苯地平预处理对VSMCs对TFCC诱导的细胞舒张作用以及细胞内游离Ca²⁺浓度（[Ca²⁺]_i）的影响。将内皮细胞（ECs）与VSMCs共培养，以观察内源性H₂S对VSMCs中TFCC诱导的舒张作用的影响。

结果

TFCC在用KCl或U₄₆₆₁₉预处理的大鼠CBA中引起浓度依赖性的血管舒张（P<0.01）。去除内皮细胞后，这种血管舒张作用显著减弱，但仍然具有显著性（P<0.01）。PPG、IBTX和硝苯地平显著抑制了TFCC诱导的脑血管舒张（P<0.01）。TFCC显著使大鼠CBA的VSMCs发生舒张（P<0.01）。与野生型脑内皮细胞共培养时，TFCC诱导的VSMCs舒张作用显著增强（P<0.05），并且H₂S含量也增加（P<0.01）。TFCC降低了VSMCs中的[Ca²⁺]_i浓度（P<0.01），这一效果被PPG和IBTX减弱。

结论

TFCC以依赖内皮和非依赖内皮的方式扩张大鼠CBA。其依赖内皮的舒张作用可能涉及内源性H₂S激活VSMCs中的BK_Ca通道，从而阻断L型Ca²⁺通道；而非依赖内皮的舒张作用主要源于直接阻断VSMCs中的L型Ca²⁺通道。