一项关于生肌膏联合菠萝蛋白促进糖尿病足肌腱暴露创面愈合的随机对照试验：结合16S rDNA测序和代谢组学分析

《Frontiers in Pharmacology》：A randomized controlled trial of Shengji ointment combined with bromelain in promoting healing of tendon-exposed diabetic foot wounds: integrated 16S rDNA sequencing and metabolomics analysis

糖尿病足腱暴露患者采用Shengji ointment联合bromelain与水胶体对照治疗4周。实验组肉芽组织覆盖率、愈合率及Maryland评分显著提高。微生物组分析显示治疗减少Erysipelatoclostridium、Lachnoclostridium等致病菌，增加Cetobacterium等有益菌。代谢组学揭示苯丙烷类、酪氨酸及氨基酸代谢通路被调控，Pontimonas、Hydrogenovibrio与多数差异代谢物负相关，提示其协同促愈机制。

　　糖尿病足腱暴露是一种严重且复杂的并发症，常见于糖尿病患者的下肢，尤其是在溃疡发展的中晚期阶段。这种病症不仅可能导致感染、组织坏死和治疗周期延长，还可能引发截肢甚至危及生命。因此，探索一种安全、有效的治疗方式对于改善患者预后和生活质量至关重要。传统中医治疗方式，如使用“生肌玉红膏”配合菠萝酶（Bromelain）治疗糖尿病足腱暴露伤口，显示出一定的初步疗效。然而，其作用机制、治疗前后伤口微生物群落和代谢物的变化仍需进一步研究，以明确其对伤口愈合的促进作用。

本研究采用随机对照试验设计，纳入60名符合条件的患者，按1:1比例随机分为实验组和对照组。实验组接受“生肌玉红膏”与菠萝酶的联合治疗，对照组则使用标准的水胶体敷料。治疗周期为4周，实验组在治疗前后采集伤口渗出液样本，进行16S rDNA测序和非靶向代谢组学分析，以评估微生物群落和代谢物的变化。同时，对两组患者的临床疗效进行评估，包括肉芽组织覆盖面积、伤口愈合率和马里兰足功能评分。

研究结果显示，实验组在治疗后，肉芽组织覆盖率、伤口愈合率和马里兰足功能评分均显著优于对照组。这表明，采用“生肌玉红膏”与菠萝酶的联合治疗方案在促进糖尿病足腱暴露伤口愈合方面具有明显优势。进一步的微生物群落分析显示，治疗后，潜在致病菌如埃里希氏梭菌（Erysipelatoclostridium）、类杆菌（Lachnoclostridium）、Pontimonas、氢化菌（Hydrogenovibrio）和Aquabacterium的丰度显著降低，而具有修复功能的菌群如Cetobacterium和Allisonella则显著增加。这些变化表明，该治疗方案能够有效调节微生物群落结构，减少有害菌群，同时增加有益菌群，从而为伤口愈合创造更适宜的微环境。

代谢组学分析揭示了治疗前后共检测到4,034种差异代谢物，其中1,907种代谢物上调，2,127种下调。这些代谢物涉及关键代谢通路，如苯丙烷类化合物生物合成、酪氨酸代谢和氨基酸生物合成。研究还发现，Pontimonas、Hydrogenovibrio和Aquabacterium与大多数差异代谢物呈显著负相关，提示这些菌群可能在代谢物的降解或代谢平衡调节中发挥重要作用。通过分析这些代谢物与微生物群落之间的相关性，可以推测治疗可能通过改变微生物群落结构，进而影响代谢物的种类和浓度，从而促进伤口愈合。

本研究还讨论了“生肌玉红膏”与菠萝酶联合治疗的潜在作用机制。菠萝酶是一种由菠萝果实中提取的蛋白酶混合物，具有抗炎、抗氧化、纤溶和免疫调节等多重功能。它能够有效降解坏死组织，减少物理屏障效应，从而提高“生肌玉红膏”中活性成分的渗透性。此外，“生肌玉红膏”能够刺激营养分泌，营造湿润的伤口环境，有助于维持菠萝酶的生物活性，并促进坏死组织的液化和引流。这些协同作用可能共同促进了伤口愈合和组织再生。

进一步分析表明，治疗后，与伤口愈合相关的代谢物如苯丙烷类化合物和酪氨酸代谢物的浓度发生变化，可能通过调节慢性炎症反应和炎症因子的释放，改善糖尿病足溃疡的微环境。氨基酸作为蛋白质合成的基本单元，对新组织的形成至关重要，同时在细胞代谢通路中发挥调节作用，有助于成纤维细胞和角质形成细胞的增殖和迁移。因此，增强氨基酸生物合成可能成为促进伤口愈合的关键机制之一。

此外，研究发现，治疗后，某些潜在致病菌的丰度显著下降，而有益菌群显著增加，这可能意味着该治疗方案有助于减少感染风险，同时促进组织修复。然而，该研究也指出了一些局限性。例如，缺乏长期随访数据，无法全面评估治疗的远期效果和安全性；伤口渗出液的分析可能无法完全反映伤口组织的代谢状况和微生物组成；此外，未对对照组进行微生物和代谢组学的详细分析，限制了对治疗效果的全面比较。未来的研究需要进一步探讨这些微生物和代谢物的具体功能，以及它们在糖尿病足溃疡治疗中的潜在作用。

总体而言，本研究揭示了“生肌玉红膏”与菠萝酶联合治疗在调节糖尿病足腱暴露伤口微生物群落和代谢环境方面的作用。该治疗方案不仅能够减少潜在致病菌的丰度，还能增加可能有益的菌群，从而为伤口愈合提供更良好的微环境。同时，通过影响关键代谢通路，如苯丙烷类化合物生物合成、酪氨酸代谢和氨基酸生物合成，该治疗方案可能在改善慢性炎症、促进组织修复方面发挥重要作用。这些发现为糖尿病足溃疡的治疗提供了新的思路，并为进一步研究其作用机制奠定了基础。