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用于免疫球蛋白G纯化的磁性聚(N-异丙基丙烯酰胺-4-乙烯基苯基硼酸)热敏微冷冻凝胶的制备
《Journal of Separation Science》:Preparation of Magnetic Poly(N-Isopropylacrylamide-4-Vinylphenylboronic Acid) Thermosensitive Microcryogel for Immunoglobulin G Purification
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年11月08日 来源:Journal of Separation Science 2.8
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本研究制备了含不同磁性物质(Fe3O4)的热敏性微凝胶,用于IgG纯化。通过SEM、FTIR-ATR等表征,发现微凝胶在pH7.4、40℃时吸附容量达147mg/g(Langmuir模型拟合,R2=0.9976),可重复使用10次,并通过SDS-PAGE验证纯度。其热敏性与磁性结合,提供可调硼酸基吸附能力。
本研究制备了具有不同磁含量的聚(N-异丙基丙烯酰胺-4-乙烯基苯基硼酸)热敏微冷冻凝胶,用于免疫球蛋白G(IgG)的纯化。随后,通过扫描电子显微镜、傅里叶变换红外衰减全反射光谱仪、电子自旋共振光谱仪和光学显微镜对制备的磁性热敏微冷冻凝胶进行了表征。使用不同浓度的水溶液中的IgG研究了其结合能力。在pH 7.4的磷酸盐溶液和40°C条件下,含有23.0 mg Fe3O4的微冷冻凝胶的最大IgG结合能力为137 mg/g,含有11.5 mg Fe3O4的微冷冻凝胶为72.0 mg/g,含有5.62 mg Fe3O4的微冷冻凝胶为48.6 mg/g,而不含Fe3O4的微冷冻凝胶为39.2 mg/g。实验观察到,聚(N-异丙基丙烯酰胺-4-乙烯基苯基硼酸)热敏微冷冻凝胶可重复使用十次。根据吸附结果,IgG在制备的磁性聚(N-异丙基丙烯酰胺-4-乙烯基苯基硼酸)热敏微冷冻凝胶上的吸附符合朗缪尔等温模型(Qmax:147 mg/g,R2:0.9976)。在优化实验条件后,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳确认了洗脱出的IgG的纯度。所开发的微冷冻凝胶结合了热响应性和磁性特性,实现了高效的IgG纯化,并可通过基于硼酸的亲和力调节其结合能力。
作者声明没有利益冲突。
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