在牙髓卟啉单胞菌（Porphyromonas endodontalis）感染后，线粒体功能对于维持根尖乳头干细胞的存活至关重要

《INTERNATIONAL ENDODONTIC JOURNAL》：Mitochondrial Function Is Required to Preserve Viability of Stem Cells From the Apical Papilla Following Porphyromonas endodontalis Infection

干细胞存活机制与微生物感染关系研究。通过分离牙髓尖周干细胞并感染解脲支原体，结合CCK8、流式细胞术、透射电镜等技术，发现SCAP在6小时感染后存活率高于血管内皮细胞，其机制涉及线粒体膜电位稳定、自噬及裂变相关蛋白表达上调。

　　

摘要

研究目的

本研究旨在探讨Porphyromonas endodontalis对根尖乳头（SCAP）干细胞存活能力的影响，并探索线粒体功能在支持SCAP存活中的作用。

研究方法

从未成熟的第三磨牙中分离出SCAP，并将P. endodontalis添加到细胞培养基中。通过CCK8检测和流式细胞术评估细胞增殖和凋亡情况，以血管内皮细胞（VECs）作为对照组。利用透射电子显微镜观察线粒体形态和细菌超微结构。通过激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体膜电位（MMP）的变化。此外，还评估了线粒体自噬或线粒体分裂抑制剂对SCAP细胞存活能力和MMP的影响。通过转录组高通量测序分析P. endodontalis感染后SCAP和VECs中差异表达的mRNAs，并利用基因集富集分析进行进一步分析。通过Western blotting检测与线粒体自噬和线粒体分裂相关的蛋白质表达。利用激光扫描共聚焦显微镜观察微管相关蛋白轻链3（Tubulin light chain 3）与外膜转运蛋白20（TOM20）以及动力蛋白相关蛋白1（Dynamin-related protein 1）的共定位情况。数据使用SPSS 22.0进行分析，p值

研究结果

感染P. endodontalis6小时后，SCAP的细胞存活率高于VECs，细胞凋亡率低于VECs。此外，SCAP的线粒体形态更稳定，MMP值也更高。转录组分析显示，感染后的SCAP和VECs中差异表达的mRNAs主要集中在与线粒体膜、去极化和线粒体分裂相关的基因上。P. endodontalis感染还上调了SCAP中与线粒体自噬和线粒体分裂相关的蛋白质表达。抑制SCAP中的线粒体自噬或线粒体分裂会降低其存活能力。

结论

SCAP在短期P. endodontalis感染后仍能维持细胞存活。其潜在机制可能涉及线粒体分裂和线粒体自噬，这两种过程似乎是SCAP抵抗感染诱导的细胞损伤的关键保护机制。本研究有助于阐明SCAP在细菌感染下的存活分子基础。

利益冲突

作者声明不存在利益冲突。