《The American Journal of Pathology》：Loss of aquaporin-1 in tumor cells fosters intrahepatic cholangiocarcinoma progression
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AQP1抑制胆管内胆管癌进展并影响患者生存。通过敲除AQP1发现其缺失促进肿瘤细胞迁移增殖、EMT表型及干细胞特性，激活IGF2/IGF1R/IR通路。生存分析显示低AQP1表达与生存率下降相关。研究揭示AQP1作为肿瘤抑制因子的多效性机制。
César Gaspari | Carine Beaupere | Seth Richard | Estanislao Peixoto | Bouchra Lekbaby | Mirko Minini | Branko Dubravcic | Javier Vaquero | Marie Vallette | Ander Arbelaiz | Marion Janona | Corentin Louis | Pauline Le Gall | Cédric Coulouarn | Julieta Marrone | Juan Abrahante Lloréns | Raúl A. Marinelli | Sergio A. Gradilone | Laura Fouassier
索邦大学，Inserm，圣安东尼研究中心（CRSA），法国巴黎F-75012
摘要
水通道蛋白AQP1由胆管细胞表达，据报道可调节多种癌症中的细胞增殖和侵袭行为。然而，AQP1在胆管癌（CCA）中的作用尚未明确。我们的研究旨在探讨AQP1在CCA中的功能。通过转录组数据分析，对39例肝内CCA（iCCA）样本中的AQP1表达进行了评估。利用CRISPR-Cas9技术实现了HuCCT1 iCCA细胞中的AQP1基因敲除。通过下一代测序（RNAseq）技术研究了AQP1抑制对细胞表型的影响。利用Incucyte活细胞成像系统、RT-qPCR、Western blot和免疫染色技术评估了上皮-间充质转化（EMT）、细胞迁移和增殖以及信号通路的变化。体内实验采用异种移植CCA模型进行。在人类iCCA中，AQP1表达水平较低与总体生存率降低相关。体内实验表明，AQP1缺失的CCA细胞具有更高的肿瘤发生潜力和肿瘤负荷。体外实验显示，AQP1缺失的CCA细胞表现出肿瘤进展的特征，包括EMT现象；这些细胞表现出细胞分散、细胞间连接蛋白E-钙粘蛋白丢失、vimentin和ZEB1表达升高以及干性特征。功能上，AQP1的缺失与细胞迁移和增殖增强相关。此外，我们还发现AQP1缺失的CCA细胞中IGF2/IGF1R/IR通路被激活。我们的数据表明，AQP1在iCCA中具有肿瘤抑制作用。
章节摘要
引言
胆管癌（CCA）是一组致命性肿瘤，可发生在胆管的任何部位。它是继肝细胞癌之后第二常见的原发性肝癌类型，占所有原发性肝癌的15%以及大约3%的胃肠道肿瘤1。CCA主要起源于胆管上皮细胞或胆管细胞的恶性转化；然而，根据潜在的肝脏疾病或肿瘤位置的不同，肿瘤也可能从其他部位发展而来
试剂
Linsitinib购自Selleckchem，IGF2购自法国PreproTech。患者样本
新鲜冷冻的人类CCA样本（n=39）来自国家肝脏网络（BB-0033-00085），并按照先前的方法进行了分析34, 35。临床数据的分析使用Prism 8软件（GraphPad）完成，生存曲线通过Kaplan-Meier方法和log-rank检验进行分析35。基因表达数据挖掘采用了基因集富集分析（GSEA）算法AQP1表达水平低与iCCA患者总体生存率降低相关
利用法国雷恩队列的39名患者数据，评估了AQP1表达与iCCA患者总体生存率（OS）和无病生存期（DFS）之间的相关性34, 35, 43。根据AQP1 mRNA表达的中位水平，患者被分为两组：低表达组和高表达组。Kaplan-Meier生存分析显示，AQP1表达水平低的患者的总体生存期显著短于高表达组讨论
本研究发现，AQP1在肝内胆管癌（iCCA）的进展中起着关键作用，影响患者的生存情况、肿瘤生长、上皮-间充质转化（EMT）、癌干细胞（CSC）特征以及细胞增殖。我们的研究结果表明，AQP1在抑制侵袭性肿瘤表型方面具有多重作用，并具有潜在的治疗意义。
主要研究结果包括：i) AQP1表达水平低与...
作者贡献
C.G.、C.B.、B.L.、M.M.、S.R.、E.P.、J.V.、M.V.、A.A.、M.J.、C.L.和J.A.L.负责实验的实施、数据分析和收集。P.L.G.、C.C.、R.M.、S.A.G.和L.F.负责资金筹集、实验设计及监督工作。C.G.、C.B.、S.A.G.和L.F.共同撰写了本文。所有作者对文章进行了严格审阅。L.F.和S.A.G.是本研究的负责人，因此能够完全访问所有研究数据，并对数据的完整性负责
致谢
感谢圣安东尼研究中心（CRSA）的Tatiana Ledent及其团队，以及CRSA UMS_30流式细胞术-成像平台的Annie Munier和Romain Morichon。
