新型查尔酮2-噻嘧啶衍生物作为双重VEGFR-2/BRAF抑制剂：设计、合成、体外细胞毒性及分子对接研究

《RSC Medicinal Chemistry》：Novel chalcone 2-thiopyrimidine conjugates as dual VEGFR-2/BRAF inhibitors: design, synthesis, in vitro cytotoxicity, and molecular docking study

设计并合成了两类黄芩素/2-噻唑并嘧啶共轭化合物（4a–4d和6a–6i），通过单剂量和五剂量细胞实验评估抗癌活性，发现化合物4c对LOX IMVI细胞具有显著抑制效果（GI50=0.0128 μM），并抑制VEGFR-2（IC50=0.144 μM）和BRAF（IC50=0.201 μM/0.101 μM），诱导细胞周期G1阻滞和凋亡，伴随Bax/Bcl-2比值升高28.12倍及caspases-3/9活性增强，分子对接显示其以II型抑制剂模式结合靶点。

　　

基于查尔酮的衍生物通过多种机制（包括蛋白激酶抑制）显示出潜在的抗癌活性。在本研究中，设计、合成了两组查尔酮/2-噻嘧啶 conjugates（分别为 4a–4d 和 6a–6i），并评估了它们对 NCI-60 癌细胞系的抗增殖活性（单剂量实验）。共有十种化合物 4a–4d、6a–6c、6f、6h 和 6i 被选中进行五剂量实验，测定了它们的半数有效浓度（GI₅₀）。化合物 4c 对 LOX IMVI 黑素瘤细胞系表现出较强的抗癌活性，其半数有效浓度为 0.0128 μM。另外七种化合物 4a、4c、4d、6c、6f、6h 和 6i 对成纤维细胞（hFB）正常细胞系无细胞毒性。进一步研究发现，这十种化合物中 4c、4d 和 6i 具有显著的 VEGFR-2 抑制作用（IC₅₀ 分别为 0.144、0.105 和 0.072 μM），而索拉非尼的 IC₅₀ 为 0.081 μM。此外，4c 还能抑制 BRAF_WT 和 BRAF_V600E 激酶（IC₅₀ 分别为 0.201 和 0.101 μM），而维莫非尼的 IC₅₀ 分别为 0.156 和 0.063 μM）。4c 能使 LOX IMVI 细胞周期停滞在 G₁ 期，并诱导晚期凋亡。对 4c 在这些细胞中诱导凋亡的作用机制分析显示，Bax/Bcl-2 比值增加了 28.12 倍，caspase-3 和 caspase-9 的表达分别上调了 7.40 倍和 5.63 倍，同时还具有抗迁移作用。对最有前景的衍生物进行的分子对接研究揭示了它们在目标激酶结合位点上的共同结合模式：这种模式从铰链区域延伸至门控区域，再进入变构口袋，与关键氨基酸以类似 II 型抑制剂的方式相互作用。