Escin通过抑制p38 MAPK/ERK信号通路来抑制PD-L1的表达，并协同增强PD-1抑制剂在肝细胞癌中的疗效

《Phytomedicine》：Escin inhibits PD-L1 expression by suppressing the p38 MAPK/ERK signalling pathways and synergistically enhances PD-1 inhibitor efficacy in hepatocellular carcinoma

本研究评估 escin 与免疫检查点抑制剂（ICIs）联用在肝细胞癌（HCC）中的抗肿瘤效果。通过体外细胞实验、体内小鼠模型及转录组测序，发现 escin 抑制肿瘤增殖并诱导凋亡，机制涉及 p38 MAPK 和 ERK 信号通路，同时下调 PD-L1 表达，重塑免疫微环境。与 ICIs 联合显著减少 M2 巨噬细胞浸润，增强 CD8+ T 细胞和树突状细胞活性，提升疗效。

　　肝癌是一种常见的恶性肿瘤，尤其在世界范围内仍然是重要的公共卫生问题。据统计，超过80%的肝癌病例属于肝细胞癌（HCC），这种癌症不仅导致高死亡率，而且治疗难度大，特别是在晚期阶段。尽管手术切除和化疗是早期肝癌的主要治疗手段，但晚期肝癌的治疗仍面临重大挑战。近年来，免疫检查点抑制剂（ICIs）的出现极大地改变了肝癌的治疗格局，为无法手术切除的患者提供了新的希望。然而，ICIs在临床应用中仍存在局限性，例如多药耐受性和个体免疫差异等因素影响其疗效。因此，探索更安全、有效的治疗策略，尤其是结合ICIs的联合治疗方案，成为当前研究的重点。

免疫检查点分子在肿瘤免疫逃逸中起着关键作用，其中程序性细胞死亡配体1（PD-L1）是重要的一个。PD-L1能够抑制细胞毒性T细胞的免疫反应，使肿瘤细胞逃避免疫系统的攻击。在HCC中，PD-L1的高表达往往与不良预后和对ICIs治疗的耐受性相关。因此，调控PD-L1的表达是提高ICIs疗效的一种重要策略。然而，目前关于如何有效调控PD-L1的表达，以及如何将其与其它治疗手段结合，仍存在诸多未知。

在此背景下，研究者们开始关注天然化合物在癌症治疗中的应用。Escin是一种从马栗（Aesculus hippocastanum）中提取的三萜类皂苷，具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等多种药理作用。研究表明，Escin能够通过调控关键的信号通路，如JAK/STAT、PI3K/Akt和NF-κB，诱导癌细胞凋亡。然而，其在肿瘤免疫调节中的具体作用，以及在联合治疗中的效果，尚未得到充分研究。因此，本研究旨在探讨Escin在HCC治疗中的作用机制，特别是在PD-L1表达调控和增强抗肿瘤免疫方面的潜力。

研究采用多种实验方法，包括体外实验和体内实验，以评估Escin的抗肿瘤效果。在体外实验中，使用EdU染色、细胞活力检测、流式细胞术和Transwell迁移实验来分析Escin对HCC细胞的影响。这些实验结果显示，Escin能够有效抑制肿瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡。同时，Escin还能通过调控MAPK信号通路，降低HCC细胞中PD-L1的表达水平，从而改变肿瘤微环境中的免疫抑制状态。

在体内实验中，研究者构建了原位HCC小鼠模型，以评估Escin的治疗效果。通过转录组测序、网络药理学和生物信息学分析，研究揭示了Escin在HCC治疗中的作用机制。进一步的实验表明，Escin与抗PD-1抗体的联合使用能够显著降低CD206+ M2型肿瘤相关巨噬细胞的浸润，同时促进CD8+ T细胞和树突状细胞（DCs）在肝肿瘤中的浸润和活化，从而显著增强抗肿瘤活性。这些结果表明，Escin不仅具有直接的抗肿瘤作用，还能通过调节免疫微环境，增强ICIs的治疗效果。

此外，研究还分析了Escin在HCC细胞中的作用机制。通过细胞培养实验，研究者获得了多种细胞系，包括人源的HepG2、Hep3B、Huh7和LX-2细胞，以及小鼠源的H22细胞。这些细胞在不同的培养基中生长，包括RPMI-1640和DMEM，并在含有抗生素、胎牛血清的培养环境中进行培养。通过细胞活力检测实验，研究者评估了Escin对不同浓度下的HCC细胞和正常肝星状细胞的影响。结果显示，Escin在不同浓度和时间条件下对HCC细胞具有显著的抑制作用，同时对正常细胞的影响较小，表明其具有较好的选择性。

研究还探讨了Escin在联合治疗中的作用。通过分析Escin与抗PD-1抗体的协同效应，研究发现这种联合治疗能够显著降低PD-L1的表达水平，并恢复CD8+细胞毒性T细胞的免疫反应。这表明，Escin不仅能够直接抑制肿瘤细胞的生长，还能通过调节免疫微环境，增强免疫治疗的效果。这些发现为Escin在癌症治疗中的应用提供了坚实的科学依据，并为其作为免疫检查点抑制剂的辅助治疗药物提供了新的思路。

研究还讨论了免疫治疗在肝癌中的局限性。尽管ICIs在肝癌治疗中展现出良好的前景，但其多药耐受性仍然是影响疗效的重要因素。此外，肿瘤微环境（TME）的复杂性和动态性也是导致免疫治疗效果不佳的原因之一。TME中细胞毒性CD8+ T细胞的逐渐耗竭和功能障碍，使得免疫治疗难以发挥最大作用。因此，探索能够改善TME的治疗策略，是提高免疫治疗效果的关键。

综上所述，本研究不仅揭示了Escin在HCC治疗中的作用机制，还证明了其在联合免疫治疗中的潜力。通过调控PD-L1的表达和改善免疫微环境，Escin能够有效增强免疫治疗的效果，为肝癌的治疗提供了新的思路和方法。这些发现不仅具有重要的理论意义，还为未来的临床研究和药物开发提供了宝贵的参考。