大建中汤这种由多种中药成分组成的制剂，通过AMPK/PPARα/CPT1信号通路来改善非酒精性脂肪肝疾病

《Phytomedicine》：Constituents-composed Chinese medicine of Dajianzhong Decoction ameliorates Non-alcoholic fatty liver disease via AMPK/PPARα/CPT1 signaling

非酒精性脂肪肝（NAFLD）的防治需求迫切，本研究基于成分-组成中药策略（cc-CM），通过高脂饮食诱导小鼠模型和游离脂肪酸刺激的AML12细胞模型，首次制备了血清代谢组学导向的DJZ-cm复方，其核心活性成分包括人参皂苷Rg1（30.5%）、姜辣素（11.45%）等8种成分，并证实其抗NAFLD效果与原方相当。RNA测序和蛋白质组学分析揭示AMPK/PPARα/CPT1信号通路及TRPV1靶点在调控脂质代谢和胰岛素抵抗中起关键作用，为中药现代化提供了新思路。

　　非酒精性脂肪肝病（NAFLD）已成为全球范围内最常见的慢性肝病之一，其发病机制复杂，与脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗密切相关。NAFLD可以进一步分为非酒精性脂肪肝（NAFL）和其进展阶段的非酒精性脂肪性肝炎（NASH），并且是肝纤维化、肝硬化乃至肝细胞癌的重要诱因。目前，NAFLD影响了全球约38%的成年人口，但由于缺乏有效的治疗药物，患者的健康状况受到严重影响。在临床治疗中，目前仅有两种药物——Rezdiffra和Semaglutide——被美国食品药品监督管理局（FDA）批准，但它们的价格昂贵，多数家庭难以承担。因此，寻找更加安全、有效且经济的替代疗法已成为迫切需求。

传统中医（TCM）及其复方在多种代谢性疾病管理方面展现出良好的效果，如NAFLD、糖尿病和肥胖等。此外，自然药物，包括TCM，通常比合成药物具有更高的安全性，这也是其在现代医学研究中受到关注的重要原因之一。中药复方Dajianzhong（DJZ）也被称为日本的Daikenchuto，起源于东汉时期的《金匮要略》。DJZ主要由花椒（Zanthoxylum bungeanum）果实、生姜（Zingiber officinale）根茎和人参（Panax ginseng）根等组成，具有“温补脾肾、行气止痛”的功效，常用于治疗胃痛、肠易激综合征、术后肠梗阻等疾病。此外，DJZ还被报道可用于功能性消化不良、结肠炎和认知衰老的治疗。然而，目前对于DJZ的潜在成分及其作用机制仍然缺乏深入研究。

为了更好地理解DJZ在治疗NAFLD中的作用，研究人员采用了一种新的方法——成分组成中药（cc-CM）策略。该策略旨在从整体角度探索中药复方的潜在活性成分及其药理机制，从而提升中药复方的生物活性、质量稳定性和安全性。在本研究中，研究人员首次基于DJZ成分在血液中的吸收情况，制备了DJZ-cm，并进一步研究其对NAFLD的治疗效果和相关机制。通过这一方法，研究人员能够更精确地识别出DJZ中具有治疗作用的成分，并揭示其作用机制，为中药复方的现代化开发提供了新的思路。

在实验设计中，研究人员使用了高脂饮食（HFD）诱导的小鼠和游离脂肪酸（FFA）诱导的AML12细胞作为NAFLD的动物和细胞模型。通过这些模型，研究人员能够评估DJZ及其成分在治疗NAFLD方面的有效性。研究发现，DJZ能够显著改善HFD喂养小鼠的NAFLD症状，包括肝脂肪变、肝功能指标、口服葡萄糖耐受和胰岛素耐受。这一结果表明，DJZ具有良好的治疗潜力。同时，研究人员根据成分在血清中的含量比例，首次制备了DJZ-cm，其中主要成分包括人参皂苷Rg1（30.5%）、人参皂苷Re（9.52%）、人参皂苷Rb2（10.5%）、人参皂苷Rb1（15.1%）、羟基-α-山椒醇（11.45%）、羟基-β-山椒醇（5.11%）、香草酰乙酮（8.77%）和6-姜烯（9%）。值得注意的是，DJZ-cm在40 mg/kg剂量下的治疗效果与DJZ在400 mg/kg剂量下的效果相当，这表明通过成分优化可以显著提高中药复方的治疗效率。

为了进一步揭示DJZ-cm的作用机制，研究人员采用了RNA测序结合定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）验证的方法，分析DJZ-cm的潜在靶基因。结果显示，AMPK/PPARα/CPT1信号通路可能与DJZ-cm的抗NAFLD作用密切相关。通过后续的蛋白质印迹（Western blotting）、免疫组织化学（Immunohistochemistry）、免疫荧光（Immunofluorescence）、组织病理学检查（Histopathological examinations）和生化指标检测（Biochemical index assays），研究人员进一步验证了这一信号通路的作用。研究发现，DJZ-cm能够通过促进PPARα的核转移和增强AMPK的磷酸化，显著上调CPT1A的表达。这一机制为DJZ-cm的抗NAFLD作用提供了科学依据。

此外，研究还发现DJZ-cm可能通过多种药物靶点发挥治疗作用，包括TRPV1和AMPK。TRPV1是一种与脂肪代谢相关的受体，其激活可以促进脂肪分解和能量代谢。AMPK则是一种重要的能量传感器，其激活能够促进脂肪氧化和葡萄糖利用，从而改善胰岛素抵抗。因此，DJZ-cm可能通过调控这些靶点，达到改善NAFLD的效果。这一发现不仅拓展了对DJZ治疗机制的理解，也为未来开发基于DJZ的现代化药物提供了理论支持。

研究还探讨了中药复方在现代医学中的应用前景。由于中药复方通常包含多种成分，其治疗效果往往是多靶点协同作用的结果，这与现代医学中对单一药物的依赖形成了鲜明对比。然而，这种多成分的特性也使得中药复方的现代化开发面临挑战，因为需要明确哪些成分是主要的活性物质，以及它们如何协同作用。cc-CM策略提供了一种新的方法，通过基于成分在血液中的吸收情况，构建出更加精确的中药复方，从而提升其治疗效果和安全性。

在本研究中，研究人员首次基于DJZ成分在血清中的吸收比例，制备了DJZ-cm，并对其抗NAFLD作用进行了系统研究。这一方法不仅能够帮助识别中药复方中的有效成分，还能揭示其作用机制，为中药复方的现代化开发提供了可行的路径。通过这一策略，研究人员能够更精确地控制中药复方的成分比例，从而提高其生物活性和治疗效果。

研究还发现，DJZ在HFD喂养小鼠中能够显著降低体重，并改善肝脂肪变。这一结果表明，DJZ不仅具有抗NAFLD的作用，还可能对肥胖等相关代谢性疾病具有一定的治疗潜力。此外，DJZ的成分在血清中的含量比例与治疗效果密切相关，因此通过优化成分比例可以进一步提高其治疗效率。这一发现为未来开发基于DJZ的现代化药物提供了新的思路。

在讨论部分，研究人员指出，中药复方在治疗慢性疾病方面具有独特的优势，但同时也存在一定的挑战。由于中药复方通常包含多种成分，其作用机制往往是多靶点协同作用的结果，这使得中药复方的现代化开发变得复杂。然而，cc-CM策略提供了一种可行的解决方案，能够帮助研究人员更精确地识别中药复方中的有效成分，并揭示其作用机制。这一策略不仅能够提升中药复方的生物活性和质量稳定性，还能提高其安全性，为中药复方的现代化发展提供了新的方向。

本研究的结论表明，cc-CM策略是一种可行的方法，可以用于识别中药复方的活性物质及其作用机制，同时也为中药复方的现代化药物开发提供了支持。DJZ及其成分DJZ-cm通过调控AMPK/PPARα/CPT1信号通路，并靶向TRPV1和AMPK，能够有效治疗NAFLD。这一发现不仅为NAFLD的治疗提供了新的药物选择，也为中药复方的现代化发展提供了理论依据。未来，基于DJZ的现代化药物开发有望成为治疗NAFLD的新方向，为患者提供更加安全、有效且经济的治疗方案。

研究还强调了中药复方在现代医学中的重要性。随着对中药复方研究的深入，越来越多的证据表明，中药复方在治疗多种慢性疾病方面具有显著的优势。然而，中药复方的现代化开发仍面临诸多挑战，包括如何确定活性成分、如何优化成分比例以及如何确保药物的安全性和有效性。cc-CM策略的提出，为解决这些问题提供了新的思路和方法。通过这一策略，研究人员能够更精确地识别中药复方中的有效成分，并揭示其作用机制，从而提升中药复方的治疗效果和质量稳定性。

此外，研究还发现，DJZ在治疗NAFLD方面具有良好的临床应用前景。由于NAFLD的发病机制复杂，涉及多种代谢途径和信号通路，因此需要多靶点药物进行干预。DJZ及其成分DJZ-cm通过调控AMPK/PPARα/CPT1信号通路，并靶向TRPV1和AMPK，能够有效改善NAFLD的症状。这一发现不仅为NAFLD的治疗提供了新的药物选择，也为中药复方的现代化发展提供了理论支持。未来，基于DJZ的现代化药物开发有望成为治疗NAFLD的新方向，为患者提供更加安全、有效且经济的治疗方案。

在实验方法方面，研究人员采用了多种技术手段，包括RNA测序、qRT-PCR、蛋白质印迹、免疫组织化学、免疫荧光、组织病理学检查和生化指标检测。这些技术手段的综合应用，使得研究人员能够从分子水平全面分析DJZ-cm的作用机制。研究发现，DJZ-cm能够通过促进PPARα的核转移和增强AMPK的磷酸化，显著上调CPT1A的表达。这一机制为DJZ-cm的抗NAFLD作用提供了科学依据。

研究还发现，DJZ-cm的治疗效果与剂量密切相关。在40 mg/kg剂量下，DJZ-cm的治疗效果与DJZ在400 mg/kg剂量下的效果相当，这表明通过成分优化可以显著提高中药复方的治疗效率。此外，DJZ-cm的成分在血清中的含量比例与治疗效果密切相关，因此通过优化成分比例可以进一步提高其治疗效果。

在讨论部分，研究人员指出，中药复方在现代医学中的应用前景广阔，但同时也需要进一步研究和开发。由于中药复方通常包含多种成分，其治疗效果往往是多靶点协同作用的结果，这使得中药复方的现代化开发变得复杂。然而，cc-CM策略提供了一种可行的解决方案，能够帮助研究人员更精确地识别中药复方中的有效成分，并揭示其作用机制。这一策略不仅能够提升中药复方的生物活性和质量稳定性，还能提高其安全性，为中药复方的现代化发展提供了新的方向。

本研究的结论表明，cc-CM策略是一种可行的方法，可以用于识别中药复方的活性物质及其作用机制，同时也为中药复方的现代化药物开发提供了支持。DJZ及其成分DJZ-cm通过调控AMPK/PPARα/CPT1信号通路，并靶向TRPV1和AMPK，能够有效治疗NAFLD。这一发现不仅为NAFLD的治疗提供了新的药物选择，也为中药复方的现代化发展提供了理论依据。未来，基于DJZ的现代化药物开发有望成为治疗NAFLD的新方向，为患者提供更加安全、有效且经济的治疗方案。

在研究过程中，研究人员还考虑了伦理问题。所有涉及小鼠的实验均遵循伦理政策，并获得了成都中医药大学实验室动物管理与伦理委员会的批准。这一伦理保障确保了研究的科学性和可靠性，也为中药复方的现代化开发提供了良好的基础。

最后，研究还指出，未来的研究方向应包括对DJZ-cm的进一步研究，以确定其在不同疾病模型中的治疗效果，并探索其与其他中药复方的协同作用。此外，还需要对DJZ-cm的长期安全性和有效性进行评估，以确保其在临床应用中的可行性。通过这些研究，研究人员能够更全面地了解DJZ的治疗潜力，并为其现代化开发提供科学支持。