rVSV拉沙热疫苗候选物的安全性和免疫原性

《The New England Journal of Medicine》：Safety and Immunogenicity of an rVSV Lassa Fever Vaccine Candidate

拉沙热重组 vesicular stomatitis 病毒载体疫苗（rVSVΔG-LASV-GPC）在美国和利比里亚开展一期双盲试验，评估其安全性和免疫原性。试验纳入114名健康成人，剂量范围为2×10^4至2×10^7 PFU，结果显示疫苗仅引起轻微局部和全身反应，无严重不良事件或听力损失，单剂可诱导持久的中和抗体及细胞免疫应答，且无病毒传播。

　　这项研究围绕一种针对拉沙热的新型疫苗候选品rVSVΔG-LASV-GPC展开，旨在评估其在健康成年人中的安全性和免疫原性。拉沙热是一种由拉沙病毒（Lassa virus, LASV）引起的病毒性出血热疾病，主要流行于西非地区，每年估计导致数千人死亡。目前尚无针对该疾病的疫苗获批，因此开发安全有效的疫苗具有重要的公共卫生意义。rVSVΔG-LASV-GPC疫苗基于复制型的重组水疱性口炎病毒（rVSV）载体，通过替换VSV包膜糖蛋白基因为LASV的糖蛋白复合体（GPC）构建而成。这种疫苗的设计灵感来自于Merck公司开发的rVSVΔG-Zaire Ebola病毒（ERVEBO）疫苗，后者已被批准用于预防埃博拉病毒病。ERVEBO在埃博拉疫情中被广泛使用，显示出良好的安全性和免疫原性，这为rVSVΔG-LASV-GPC疫苗的开发提供了重要参考。

本研究是一项I期、双盲、随机、安慰剂对照的剂量递增试验，分别在美国和利比里亚进行。试验对象为18至50岁的健康成年人，随机分配至不同剂量组或安慰剂组，接受单次或两次接种。试验设计包括多个剂量组，其中美国的剂量组包括2×10?、2×10?、2×10?和2×10?的斑块形成单位（PFU），而利比里亚的剂量组则为2×10?、2×10?和2×10? PFU。试验过程中，参与者需要记录接种后的局部和全身反应，以及在28天内出现的任何未预期的不良事件。此外，由于拉沙热可能引起感音神经性听力损失，研究特别关注了接种前后听力的变化。主要终点为不良事件的发生率，次要终点则包括针对LASV GPC的结合抗体、中和抗体水平以及疫苗载体病毒RNA和PFU在血液、尿液和唾液中的分布情况。

在安全性和反应性方面，研究结果表明，rVSVΔG-LASV-GPC疫苗在所有剂量组中均表现出良好的安全性。没有严重的疫苗相关不良事件报告，且所有剂量均未导致听力损失。局部反应主要表现为接种部位的压痛和疼痛，这些反应在不同剂量组中出现的频率和严重程度有所不同。例如，在美国，接受单次接种的参与者中，有67%报告了局部反应，而在利比里亚，这一比例为31%。相比之下，接受安慰剂的参与者中，美国有40%报告了局部反应，而利比里亚则没有。全身反应包括乏力、头痛、肌肉疼痛和寒战等，这些反应在不同剂量组中也有所差异。美国的疫苗接种者中，88%报告了至少一次全身反应，而利比里亚的接种者中这一比例为52%。值得注意的是，接受2×10? PFU剂量的美国参与者中有26%出现了三级反应，主要表现为持续2至3天的乏力，伴有其他全身症状，但这些反应通常是自限性的，会在几天内自行缓解。利比里亚的三级反应发生率较低，仅有4%的参与者出现类似情况。此外，研究还发现，部分疫苗接种者出现了轻微的实验室异常，如天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平升高，但这些异常未与临床症状明显相关。

在免疫原性方面，研究结果表明，rVSVΔG-LASV-GPC疫苗能够诱导强烈的免疫反应。无论是美国还是利比里亚的参与者，所有剂量均能够引发针对LASV GPC的结合抗体和中和抗体。在12个月的随访期内，美国的36名疫苗接种者中有31人（86%）仍显示出抗体反应，而利比里亚的48名接种者中有30人（62%）在12个月后仍具有抗体反应。结合抗体的水平在接种后第29天开始上升，并在第85天达到峰值，随后略有下降，但总体仍保持较高水平。中和抗体的水平则在接种后3个月内迅速上升，并在12个月后仍能维持较高的中和能力。此外，疫苗还能够诱导针对LASV GPC的T细胞反应，这些反应在接种后第29天即被检测到，并在后续时间点保持稳定。研究发现，无论是单次接种还是两次接种，疫苗诱导的免疫反应均表现出良好的持久性，表明该疫苗具有长期保护潜力。

在疫苗病毒载量和脱落情况方面，研究通过逆转录-定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测了疫苗载体病毒RNA在血液、尿液和唾液中的分布。结果显示，疫苗载体RNA在接种后第4天即可在血液中被检测到，但在第29天后已无法在血液中检出。相比之下，唾液中的病毒RNA在第15天和第29天达到峰值，表明疫苗病毒在体液中的分布具有一定的时序性。值得注意的是，虽然在一些样本中检测到了疫苗病毒RNA，但并未在任何样本中检测到具有感染性的病毒颗粒，这表明疫苗载体病毒在体内可能并未成功复制或传播。这一发现对于疫苗的安全性评估具有重要意义，因为它排除了疫苗病毒在宿主体内造成二次感染的可能性。

此外，研究还发现，部分参与者在接种前已存在针对LASV的预存抗体。这些抗体可能来自于之前的自然感染或与其他沙状病毒（arenavirus）的交叉反应。在利比里亚的48名接种者中，有4人（7%）在筛选时已检测到LASV核蛋白（NP）特异性IgG抗体，而其中两人（分别接受剂量组5的疫苗和安慰剂）在接种前已具备中和抗体。这些预存抗体的存在可能影响疫苗诱导的免疫反应强度，但研究并未发现显著的差异，表明即使存在预存抗体，疫苗仍能够诱导有效的免疫反应。研究还发现，疫苗诱导的抗体具有广泛的交叉反应能力，能够针对多种LASV谱系，包括在利比里亚和塞拉利昂占主导地位的谱系IV，以及在尼日利亚占主导地位的谱系II和III。这一特性对于疫苗在不同流行区域的应用具有重要意义，因为它可能提供更广泛的保护作用。

尽管研究结果显示出rVSVΔG-LASV-GPC疫苗具有良好的安全性和免疫原性，但研究也指出了其局限性。首先，本研究是一项I期临床试验，样本量相对较小，且未进行正式的假设检验。其次，部分美国参与者在随访过程中失访，而利比里亚的少数参与者在接种前已存在LASV抗体，这可能影响疫苗效果的评估。此外，研究未设计比较美国和利比里亚人群之间的免疫反应差异，因此无法得出关于不同人群疫苗反应的明确结论。然而，研究发现美国人群的免疫反应强度略高于利比里亚人群，这可能与环境因素、遗传背景或既往暴露有关。为了进一步验证疫苗的有效性和安全性，一项II期临床试验正在进行中，旨在扩大样本量、评估疫苗在LASV暴露人群中的免疫反应，并进一步明确其在不同人群中的适用性。

总体而言，这项研究为rVSVΔG-LASV-GPC疫苗的开发提供了重要的临床数据支持。疫苗在不同剂量下均表现出良好的安全性，未导致严重的不良事件或听力损失。同时，疫苗能够诱导强烈的免疫反应，包括结合抗体、中和抗体和T细胞反应，且这些反应具有良好的持久性。研究还表明，疫苗载体病毒在体液中的分布具有一定的时序性，但并未在任何样本中检测到具有感染性的病毒颗粒，进一步支持了其安全性。尽管研究存在一定的局限性，但其结果为后续的疫苗研发和应用提供了坚实的基础。随着II期临床试验的推进，未来有望进一步确认该疫苗在更大人群中的安全性和有效性，并为应对拉沙热的全球性威胁提供新的解决方案。