针对新兴食源性病原体坂崎克罗诺杆菌（Cronobacter Sakazakii）的种特异性PCR检测方法的开发与应用

《Current Microbiology》：Development and Application of a Species-Specific PCR Assay for the Detection of the Emerging Food-Borne Pathogen Cronobacter Sakazakii

本研究开发了一种基于fhuF基因的PCR检测方法，具有高特异性，能区分Cronobacter其他物种，灵敏度达1.45×103 cfu/ml，并成功应用于海鲜样本检测。

　　

摘要

Cronobacter sakazakii是一种新出现的机会性食源性病原体，与多种食品相关，包括海鲜、肉类、植物性食品和乳制品。尽管海鲜是这种病原体的主要来源，但目前尚缺乏能够将C. sakazakii与其他Cronobacter物种区分开来的特异性和灵敏度较高的检测方法。在本研究中，开发了一种基于fhuF基因的PCR检测方法，并对其检测C. sakazakii的特异性和灵敏度进行了评估。所设计的引物对C. sakazakii具有高度特异性，且未观察到与其他Cronobacter物种及相关肠杆菌科细菌的交叉反应。通过使用纯培养的C. sakazakii样本以及人工添加了C. sakazakii的虾样来测试检测灵敏度。该fhuF特异性PCR方法在纯细菌培养物中可检测到低至1.45×10³ cfu/ml的细菌浓度，在添加了C. sakazakii的虾样中经过4小时富集后可检测到2.9 cfu/g的细菌浓度。当应用于新鲜和干制海鲜的天然样本时，该方法在选择性培养基中富集后从3个样本中检测到了C. sakazakii。本研究开发的新fhuF特异性PCR方法为C. sakazakii的检测提供了一种可靠且灵敏的工具，将在涉及海鲜的流行病学调查和风险评估研究中发挥重要作用。