细胞学制备技术对RNA质量的影响：一项关于涂片样本的比较研究

《Cancer Cytopathology》：The impact of cytological preparation techniques on RNA quality: A comparative study on smear samples

细胞学制备技术对RNA质量的影响研究。通过比较MGG、PAP、Diff-Quik和空气干燥4种技术对182例手术标本RNA质量的影响，发现MGG染色（ΔCt最高且最稳定）最佳，PAP最差（ΔCt最低），空气干燥结果最不稳定。RNA浓度差异不显著（p=0.07），但RNA质量直接影响qPCR和NGS等分子检测准确性。

　　

摘要

背景

高质量的RNA对于准确的分子检测至关重要。本研究评估了细胞学制备技术（May–Grünwald–Giemsa [MGG]、Papanicolaou [PAP]、Diff-Quik 和风干法）对涂片样本中RNA质量的影响。

方法

使用七种不同的技术从26名患者的新鲜手术标本中制备了总共182份涂片。提取RNA后进行逆转录，并使用定量聚合酶链反应（qPCR）进行分析。通过ΔCt（ΔCt = 45 – Ct，循环阈值）来评估RNA的质量，其中较高的ΔCt值表示更好的RNA质量。

结果

通过ΔCt测得的RNA质量在不同制备方法之间存在显著差异（p < 0.001），而不同类型的涂片之间的RNA浓度没有显著差异（p = 0.07）。MGG染色涂片（无论是贴在薄膜上还是盖玻片上）显示出最高且最稳定的ΔCt值。PAP染色涂片的ΔCt值最低，表明其RNA质量最差。风干且未染色的涂片显示出高度变异的ΔCt值以及频繁的扩增失败。Diff-Quik制备方法的性能介于两者之间。贴片方法（薄膜或盖玻片）对RNA质量没有显著影响。

结论

在各种细胞学涂片技术中，MGG方法对RNA的保存效果最好，PAP方法最差，而风干涂片的结果不稳定。这些发现强调了涂片制备在保存RNA以用于分子检测（尤其是基于RNA的下一代测序）中的关键作用。

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数据可用性声明

本研究中使用和/或分析的数据集可应相应作者的要求提供。