LncRNA MEG8通过吸附miR-296-5p调控人脐静脉内皮细胞功能促进深静脉血栓形成的机制研究

《Hereditas》：LncRNA MEG8 promotes deep vein thrombosis by sponging miR-296-5p to regulate human umbilical vein endothelial cells

本研究聚焦深静脉血栓(DVT)的早期诊断与靶向治疗难题，探讨了长链非编码RNA MEG8通过竞争性结合miR-296-5p调控人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能的新机制。通过临床样本分析发现MEG8在DVT患者血清中显著上调，且对DVT具有高诊断价值(AUC=0.898)；体外实验证实MEG8过表达可抑制HUVECs迁移和活力、促进细胞凋亡及炎症因子释放。该研究首次揭示MEG8/miR-296-5p轴在DVT中的作用，为血栓性疾病提供了新的分子靶点。

　　

深静脉血栓（Deep Vein Thrombosis, DVT）是一种常见的血管外科疾病，其特征是深静脉内形成病理性血栓，导致静脉回流受阻。这种疾病在股静脉等下肢部位发生率较高，且男性患病率略高于女性，并随年龄增长显著增加。DVT的严重后果包括血栓脱落引发致命性肺栓塞，以及部分患者会发展为血栓后综合征，严重威胁患者生命健康。长期以来，如何有效预防和治疗DVT一直是广泛关注且亟待解决的临床难题。

血管内皮细胞功能障碍被证实是DVT形成的关键因素。人脐静脉内皮细胞（HUVECs）作为血管内皮细胞的重要模型，在血栓形成研究中具有重要价值。近年来，长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）被发现在血管生物学过程中发挥重要调控作用。例如，lncRNA NORAD在DVT中高表达，并通过调控内皮细胞功能参与疾病进展。然而，lncRNA MEG8在DVT中的具体作用机制尚不明确。

本研究通过临床样本分析和体外实验，首次系统阐述了lncRNA MEG8通过竞争性结合miR-296-5p调控HUVECs功能的新机制。研究人员发现MEG8在DVT患者血清中显著上调，且对DVT诊断具有较高价值。实验证实MEG8过表达可抑制HUVECs迁移和活力，促进细胞凋亡和炎症因子释放，而这一作用是通过吸附miR-296-5p实现的。该研究为DVT的早期诊断和靶向治疗提供了新的分子靶点。

主要关键技术方法包括：收集120例DVT患者和100例健康对照者的血清样本进行RT-qPCR检测；使用Transwell实验、CCK-8法和流式细胞术分别检测HUVECs的迁移、活力和凋亡；通过ELISA试剂盒检测炎症因子水平；采用双荧光素酶报告基因验证MEG8与miR-296-5p的相互作用。

临床特征分析

研究纳入120例DVT患者和100例健康对照，两组在年龄、性别、BMI等基本特征上无显著差异，但DVT组的白细胞计数、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）和D-二聚体（D-Dimer）水平显著升高，表明DVT患者存在明显的炎症和凝血功能异常。

MEG8诊断DVT的能力

RT-qPCR结果显示，DVT患者血清中lncRNA MEG8表达显著上调。ROC曲线分析显示MEG8对DVT具有较高的诊断能力，曲线下面积（AUC）为0.898，最佳截断值为1.28，敏感性和特异性分别为77.5%和86.0%。Logistic回归分析进一步证实MEG8是DVT发生的独立危险因素。

MEG8与临床指标的相关性

Pearson相关分析显示，DVT患者血清MEG8水平与TAT（r=0.722）和D-Dimer（r=0.640）呈显著正相关，表明MEG8表达与凝血功能异常密切相关。

MEG8对HUVECs功能的影响

体外实验表明，沉默MEG8可促进HUVECs迁移和活力，抑制细胞凋亡，并降低IL-6、IL-1β和TNF-α等炎症因子水平；而过表达MEG8则呈现相反效果，证实MEG8通过调控内皮细胞功能参与DVT进展。

MEG8与miR-296-5p的相互作用

生物信息学预测和双荧光素酶报告实验证实MEG8与miR-296-5p存在直接结合位点。临床样本显示DVT患者血清miR-296-5p水平显著降低，且与MEG8表达呈负相关（r=-0.618）。功能实验表明miR-296-5p抑制剂可逆转MEG8沉默对HUVECs的调控作用。

MEG8与miR-296-5p的协同作用

共转染实验显示，miR-296-5p抑制剂可逆转沉默MEG8对HUVECs迁移、活力和炎症因子释放的促进作用，进一步证实MEG8通过吸附miR-296-5p调控内皮细胞功能。

本研究首次揭示lncRNA MEG8通过竞争性结合miR-296-5p调控HUVECs功能，促进DVT发展的新机制。研究发现MEG8在DVT患者血清中显著上调，且对DVT诊断具有较高价值。体外实验证实MEG8过表达可抑制内皮细胞迁移和活力，促进细胞凋亡和炎症反应，而这一作用是通过吸附miR-296-5p实现的。该研究不仅丰富了lncRNA在血栓性疾病中的调控网络，也为DVT的早期诊断和靶向治疗提供了新的理论依据。尽管研究存在下游靶基因未明确、缺乏动物模型验证等局限性，但为后续深入研究奠定了基础。该研究成果发表于《Hereditas》期刊，对血栓性疾病的防治具有重要临床意义。