硫黄素T在一步RT-PCR中的诊断性能：用于检测病毒RNA

《Analytical Methods》：Diagnostic performance of thioflavin T in one-step RT-PCR for detection of a viral RNA

硫黄素T与G-四联体结合的荧光PCR检测方法，通过在环式扩增中集成硫黄素T标记的G-四联体探针，构建了低成本的病毒RNA检测系统，并验证了其在不同载量样本中检测SARS-CoV-2的准确性和灵敏度。

近年来，硫黄素T（ThT）被用作插层荧光探针，用于生物传感器的开发。其中一种方法是通过监测ThT与G-四链结构（GQ）结合时的荧光信号来实现。GQ是由富含鸟嘌呤的序列形成的结构，这些序列可以在等温扩增或循环扩增过程中合成。基于ThT的荧光信号生成技术已与多种等温扩增方法相结合。然而，据我们所知，这种技术尚未与循环扩增方法（例如聚合酶链反应，PCR）结合进行研究。PCR技术具有诸多优势，使其在许多商业和FDA批准的诊断试剂盒中取得了成功；但传统的qPCR方法（采用TaqMan技术）存在价格高昂和依赖复杂仪器等挑战。目前，由于价格和可用性限制，商业化的qPCR试剂盒在公共卫生领域的应用范围较为有限。因此，开发新的基于扩增的核酸检测方法（NATs）对于改善公共卫生状况至关重要。本文介绍了一种新的检测方法：将硫黄素T引入合成的GQ结构中，通过荧光分析来检测病毒RNA。所设计的PCR引物具有与GQ互补的序列。该系统的有效性已在一步反应中得到了验证，用于检测来自不同病毒载量个体的样本中的SARS-CoV-2基因组。