定量即时检测PATHFAST D-二聚体方法的分析性能

《Thrombosis Update》：Analytical performance of the quantitative point-of-care PATHFAST D-dimer assay

D-二聚体快速POC检测法性能评估及与实验室方法比较。采用分析性能评价和样本比对方法，证实Pathfast试纸在血浆和全血中具有良好精密度（CV<5.8%）和线性（至4.3 μg/mL FEU）。与实验室Vidas和STA-Liatest方法比较，全血检测存在系统性高估（均值偏差1.16-1.20 μg/mL FEU），但<1 μg/mL FEU区偏差降至0.07-0.15 μg/mL FEU。该POC设备可作为VTE排除的补充工具，但需结合临床评分系统。

　　静脉血栓栓塞症（VTE）是全球范围内重要的公共卫生问题，它包括深静脉血栓（DVT）和肺栓塞（PE），其发病率在欧洲和美国估计为每千人每年1-2例，与显著的死亡率和发病率相关。然而，VTE的诊断仍然具有挑战性，因为其症状通常不特异，因此往往不能仅依赖临床检查，而需要借助复杂的影像学检查手段。在这一背景下，D-二聚体检测作为一种重要的辅助诊断工具，因其高灵敏度和良好的阴性预测值，被广泛用于排除VTE的可能性。然而，D-二聚体检测也存在较低的特异性，这使得其在某些情况下可能产生假阳性结果。

随着医疗技术的发展，点对点检测（Point-of-Care, POC）技术逐渐进入临床实践。POC D-二聚体检测因其便捷性、快速性和可在基层医疗环境中应用的潜力，被认为是传统实验室检测的重要补充。然而，POC设备的分析性能和临床应用价值仍需进一步评估。为此，本研究对Pathfast D-二聚体化学发光检测方法进行了分析性能评估，并将其与两种常用的实验室D-二聚体检测方法（Vidas D-二聚体排除II和STA-Liatest D-Di Plus）进行了比较，以探讨其在临床诊断中的可行性。

在分析性能方面，研究使用了低浓度和高浓度的人类血浆质量控制样品，以及健康对照者的全血和患者的全血样本，对Pathfast D-二聚体检测方法的重复性和批间差异进行了评估。结果显示，Pathfast D-二聚体检测方法在重复性方面表现出良好的性能，其变异系数（CV）分别在3.8%至4.4%之间，而批间差异则在4.5%至5.8%之间。这些数值均在可接受范围内，表明该检测方法具有较高的精密度。此外，通过遵循临床和实验室标准协会（CLSI）的指南，研究还确定了该检测方法的空白限（LoB）、检测限（LoD）和定量限（LoQ），进一步验证了其在不同浓度范围内的可靠性。

为了更全面地评估该方法的性能，研究还考察了其线性范围。通过使用高浓度D-二聚体血浆样本进行梯度稀释，研究发现该检测方法在浓度范围0.0033 μg/mL FEU至4.3 μg/mL FEU之间表现出良好的线性关系，线性回归分析的决定系数（r）达到了0.9964，说明其在宽广的浓度范围内具有较高的稳定性。

在比较研究中，研究使用了来自148名连续患者的144个新鲜样本，对Pathfast D-二聚体检测方法与实验室方法的结果进行了比较。研究发现，当使用全血进行检测时，Pathfast D-二聚体检测方法的D-二聚体浓度值普遍高于使用血浆进行检测的Vidas和STA-Liatest方法。通过使用Passing-Bablok回归分析和Bland-Altman分析，研究者发现Pathfast检测方法存在系统性偏差，特别是在D-二聚体浓度高于1 μg/mL FEU时，偏差幅度更大。然而，在D-二聚体浓度接近临床决策阈值（<1 μg/mL FEU）时，偏差较小，范围在0.07至0.15 μg/mL FEU之间，这表明该方法在关键临床范围内具有较高的准确性。

研究还特别关注了血红蛋白浓度对全血检测结果的影响。通过分析148名患者的血红蛋白浓度数据，发现当血红蛋白浓度偏离默认值40%时，Pathfast D-二聚体检测方法的偏差显著增加。例如，当血红蛋白浓度高于45%或低于30%时，偏差超过了8.82%的可接受范围。因此，研究建议在实际应用中应根据患者的个体血红蛋白浓度进行校正，以提高检测结果的准确性。

此外，研究还探讨了Pathfast D-二聚体检测方法与实验室方法之间的总体一致性。通过Lin’s concordance correlation系数评估，结果显示Pathfast与Vidas之间的总体一致性良好，但在D-二聚体浓度低于1 μg/mL FEU时，一致性较弱。同样，Pathfast与STA-Liatest之间的总体一致性也较高，但在低浓度区域表现出一定的差异。这些结果表明，虽然Pathfast D-二聚体检测方法在多数情况下能提供可靠的检测结果，但在某些特定条件下仍需进一步优化。

尽管Pathfast D-二聚体检测方法在分析性能上表现出色，但研究也指出了一些局限性。首先，本研究的数据来源于一个广泛的患者群体，而非专门针对VTE疑似患者的样本，这可能影响其在特定临床环境中的适用性。其次，研究仅在单一中心进行，结果可能无法完全推广到其他实验室或临床环境。此外，研究未评估试剂批次间的变异性，且仅在血红蛋白浓度的某些范围内获取了数据，这可能限制了研究结果的全面性。最后，研究未与另一种POC D-二聚体检测设备进行比较，这可能影响其在POC检测领域的竞争性评估。

综上所述，Pathfast D-二聚体检测方法在分析性能方面表现出良好的精密度和线性关系，且在临床决策阈值附近具有较高的准确性。然而，由于其检测结果与实验室方法存在系统性偏差，特别是在高浓度区域，因此在临床应用中应谨慎考虑其结果的解释和使用。为了确保其在实际临床环境中的可靠性，未来需要进一步开展大规模、多中心的临床研究，以验证其在VTE排除中的诊断性能。同时，研究还强调了在实际应用中应考虑血红蛋白浓度的校正，以提高检测结果的一致性和准确性。这些发现为POC D-二聚体检测方法的临床应用提供了重要的参考，同时也为未来的检测技术优化和临床研究方向提供了依据。