哥伦比亚可能出现的类似 scrub typhus 的感染：Villeta 市急性未分化发热患者中对 Orientia 属细菌的血清转化及血清学反应

《Travel Medicine and Infectious Disease》：Probable scrub typhus-like infection in Colombia: seroconversion and serological reactivity to Orientia spp. among patients with acute undifferentiated febrile illness in Villeta municipality

急性未分化发热综合征（AUFI）患者血清中检测到Orientia spp.抗体，27%血清阳性，其中8例（20%）为近期感染（含6例ELISA阳性、2例IFA阳性），3例为既往暴露。Western blot确认特异性反应。该研究为哥伦比亚首次提供Orientia活动的直接证据，提示scrub病可能成为当地AUFI病因之一，需进一步分子鉴定。

scrub typhus，一种由Orientia属细菌引起的人畜共患病，长期以来被认为主要流行于亚洲-太平洋地区，特别是被称为“tsutsugamushi三角”的地理区域。然而，近年来的研究发现该病在拉丁美洲的分布范围正在扩大，包括智利、洪都拉斯和秘鲁等地均有病例报道，甚至在哥伦比亚的农村地区也发现了与Orientia属相关的抗体。这些发现表明，Orientia属可能已经突破传统地理限制，成为全球范围内急性非特异性发热性疾病（AUFI）的一个重要病因。尽管如此，由于该病在拉丁美洲的流行情况仍不明确，特别是在哥伦比亚，缺乏系统性的研究来确认其在当地的流行状况，因此本研究旨在探讨Orientia属感染是否可能成为哥伦比亚Villeta地区AUFI的病因。

Orientia属是一类严格细胞内寄生的细菌，属于立克次体目、立克次体科。它们的形态为小而多形的革兰氏阴性杆菌，通常在宿主细胞内繁殖。Orientia的传播媒介主要是 Trombiculid 蜱（俗称“疥螨”），其幼虫阶段是唯一能通过叮咬传播病原体的阶段。这些幼虫在叮咬宿主时，会将细菌注入宿主的皮肤组织中，从而引发感染。Orientia tsutsugamushi 是该属的代表性物种，是一种生物安全等级为3的病原体，具有多种抗原性不同的菌株。这些菌株在主要外膜蛋白（MOMP）上表现出高度的基因变异，这可能与临床表现的多样性有关。

在自然循环中，Orientia的宿主主要是小型哺乳动物，尤其是鼠类，而人类和动物通常被视为偶然宿主。由于Orientia无法在宿主细胞外存活，因此其在人类中的传播主要依赖于蜱虫的活动。在人类中，感染通常表现为急性发热性疾病，伴随皮疹、发热和特征性的“焦痂”（eschar）形成。尽管这些症状在临床诊断中具有一定的提示意义，但它们并不总是显著，尤其是在早期感染阶段。因此，仅凭临床表现难以确诊，需要依赖实验室检测手段。

实验室诊断Orientia感染的方法主要包括分子生物学检测和血清学检测。分子检测通常采用实时聚合酶链反应（qPCR）技术，针对16S rRNA基因进行扩增。这种方法具有快速、高特异性的优点，但其灵敏度受限于病原体在血液中的浓度。由于Orientia是一种严格细胞内寄生菌，其在血液中的载量通常较低，尤其是在感染的早期阶段，这可能导致qPCR检测结果为阴性。因此，对于qPCR未能检测到Orientia DNA的病例，通常需要进一步进行血清学检测。

血清学检测主要依赖于间接免疫荧光分析（IFA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种方法。IFA通过检测患者血清中针对Orientia抗原的IgG抗体，可以评估患者是否曾接触过该病原体。ELISA则通过检测血清中的抗体浓度，提供更为定量的分析结果。此外，血清学检测还可以通过比较急性期和恢复期的抗体水平变化，判断是否发生了近期感染。例如，如果急性期抗体滴度为阴性，而恢复期抗体滴度显著升高，或者抗体滴度出现了四倍以上的增长，即可判断为近期感染。反之，若抗体滴度在急性期和恢复期均较高，但没有显著变化，则可能表示既往暴露。为了进一步确认血清学检测的特异性，还可以采用Western blot技术，通过检测患者血清与Orientia抗原之间的反应，确定是否与特定的免疫优势蛋白（如47kDa、56kDa等）发生反应。这些蛋白在Orientia感染中具有重要的诊断价值，因为它们能够引发宿主强烈的免疫反应。

本研究在哥伦比亚Villeta地区开展，目的是评估Orientia属感染是否可能成为该地区AUFI的病因。Villeta位于哥伦比亚中部的Cundinamarca州，是一个以农业和生态旅游为主要经济活动的地区。该地区的人口约25,957人，其中大部分居住在城市区域，但也有一定比例的农村人口。由于Villeta的地理位置和气候条件，该地区可能存在适合蜱虫繁殖的生态环境，从而增加Orientia感染的风险。此外，该地区的居民可能因接触野生动物、农业活动或户外工作而增加感染机会。

研究期间，共招募了56名发热但无明确病因的患者，其中41名患者提供了血液和血清样本用于进一步分析。通过qPCR检测，研究人员未能在任何样本中检测到Orientia的DNA。这可能与样本采集方式有关，因为qPCR检测的灵敏度较低，尤其是在感染的早期阶段，Orientia在血液中的载量可能不足以被检测到。因此，研究者建议未来的研究应更加关注与焦痂相关的样本，如皮肤活检或未结痂的病灶，因为这些样本更有可能检测到Orientia的DNA。

血清学检测结果显示，有27%（11/41）的患者体内存在针对Orientia属的抗体。其中，6名患者仅通过ELISA检测出阳性结果，2名患者仅通过IFA检测出阳性，而另外3名患者则同时通过两种方法检测出阳性。进一步分析发现，8名患者被归类为近期感染，其中3名患者表现出明确的IgG抗体滴度升高（即seroconversion），而另外3名患者则被归类为既往暴露。这些结果表明，Orientia属可能在Villeta地区存在一定的流行，尤其是在那些有接触蜱虫或其他潜在宿主的个体中。

值得注意的是，这11名阳性患者主要来自城市地区，且年龄分布较广，从12岁到72岁不等。其中，年轻成年人占大多数，且他们的职业多为小规模商业从业者、学生或安保人员。这些职业可能使他们更容易接触到蜱虫或其他传播媒介。此外，患者的临床表现也具有一定的多样性，包括发热、寒战、乏力、头痛、恶心、呕吐、淋巴结肿大等。大多数患者在治疗后康复，但有两名患者因病情严重被转诊至更高级的医疗机构。这些临床表现与Orientia感染的典型症状相符，进一步支持了该病原体在Villeta地区的存在。

为了确认血清学检测结果的特异性，研究者对11名阳性患者进行了Western blot检测。结果显示，所有阳性样本均对Orientia tsutsugamushi Karp株的抗原表现出特异性反应，尤其是对47kDa和56kDa蛋白的反应。这些蛋白被认为是Orientia感染的重要免疫优势蛋白，能够引发宿主较强的免疫反应。此外，部分样本还对22kDa和110kDa蛋白表现出反应，这表明Orientia属可能在该地区存在多种菌株或变种。Western blot的检测结果进一步强化了血清学检测的可信度，并提供了更具体的抗原反应信息。

尽管本研究通过血清学检测发现了Orientia属的流行迹象，但仍然存在一些局限性。首先，样本量相对较小，这可能影响研究结果的代表性。其次，研究中未系统采集焦痂样本，导致无法通过分子方法进一步确认感染的存在。此外，由于研究主要依赖于血清学数据，因此无法明确Orientia感染是否直接导致了AUFI的发生。尽管如此，这些结果仍然具有重要的临床和流行病学意义，因为它们表明Orientia属可能在哥伦比亚的某些地区存在，并且可能与发热性疾病的发病有关。

在拉丁美洲，尤其是智利，已有较多的研究发现Orientia属的流行。智利的南部地区，特别是Chiloé岛，被认为是该病的新发疫区。这一发现促使研究人员进一步关注Orientia在其他拉丁美洲国家的分布情况。例如，在秘鲁的亚马逊地区，研究人员发现了一些血清学证据，表明Orientia属可能在当地流行。而在洪都拉斯，军队人员的血清学检测也发现了Orientia属的感染迹象。这些研究结果表明，Orientia属的分布可能比以往认为的更为广泛，特别是在某些生态条件适宜的地区。

在哥伦比亚，尽管已有两项研究发现农村居民和土著人群对Orientia属的抗体水平较高，但这些研究并未关注近期感染的情况。因此，本研究的发现填补了这一空白，表明Orientia属可能不仅在农村地区存在，也可能在城市居民中传播。这提示我们，需要进一步加强对Orientia属感染的监测，特别是在那些可能接触蜱虫或野生动物的地区。

Orientia属感染的临床表现与AUFI相似，因此在临床诊断中容易被忽视。由于缺乏明确的诊断标准和流行病学数据，许多病例可能被误诊或漏诊。此外，Orientia感染的诊断依赖于实验室检测，而目前的检测手段在某些情况下可能不够敏感或特异。因此，为了提高诊断的准确性，需要进一步优化检测方法，并加强对临床医生的培训，使他们能够识别Orientia感染的可能病例。

未来的研究应重点关注Orientia属的分离和基因组分析，以明确其在哥伦比亚的具体流行情况。通过分离病原体，可以进一步确定其致病性、抗原性以及是否与当地AUFI病例有关。此外，基因组分析有助于了解Orientia属在不同地区的遗传多样性，从而为疫苗开发和流行病学研究提供依据。因此，尽管本研究提供了初步的证据，但还需要更多的研究来确认Orientia属在哥伦比亚的流行状况及其对AUFI的贡献。

总之，本研究在哥伦比亚Villeta地区发现了Orientia属感染的血清学证据，表明该病原体可能在当地存在，并与急性发热性疾病的发病有关。尽管qPCR未能检测到Orientia的DNA，但血清学检测和Western blot分析提供了有力的证据，支持了这一假设。这些发现不仅有助于提高对该病原体的认识，也为进一步研究Orientia属在拉丁美洲的分布和流行提供了基础。未来的研究应更加关注Orientia属的分离和基因组分析，以全面了解其在哥伦比亚的流行情况及其对AUFI的潜在影响。