乳腺癌不同分期中肿瘤蛋白p53表达水平的动态分析及其作为生物标志物的潜力

《Scientific Reports》：Analysis of tumor protein p53 expression levels in different stages of breast cancer

本研究针对乳腺癌(BC)管理中缺乏有效分子标志物的难题，探讨了肿瘤蛋白p53(Tp53)表达与疾病分期的关联。通过对70例BC患者组织样本进行实时RT-PCR分析，发现Tp53表达在晚期阶段(IV期)显著上调(100%)，而早期(I期)无检测表达。结果表明Tp53表达与肿瘤侵袭性、患者年龄(≥40岁)、家族史及分娩次数显著相关(P<0.001)，提示其作为早期BC诊断生物标志物的潜力。该研究为BC的分子分型和预后评估提供了新依据。

在全球范围内，乳腺癌(Breast Cancer, BC)一直是威胁女性健康的主要恶性肿瘤，每年新增病例约170万例，占女性所有癌症的25%。尽管诊疗技术不断进步，BC仍是导致癌症相关死亡的重要原因之一，这凸显了寻找有效分子生物标志物对于疾病管理、准确预测预后和预防干预的迫切需求。在众多候选分子中，肿瘤蛋白p53（Tumor Protein p53, Tp53）作为一种重要的肿瘤抑制基因，其角色备受关注，然而，关于其在BC中表达模式的研究结果却存在争议，尤其是在疾病不同发展阶段的具体变化规律尚不清晰。

为了厘清Tp53表达与BC进展的关系，由Daniyal Arab、Haniyeh Bashi Zadeh Fakhar等研究人员组成的团队开展了一项研究，成果发表在《Scientific Reports》上。他们的目标是精确分析Tp53基因表达水平在BC不同分期（I-IV期）中的动态变化，并探索其与患者年龄、家族史、肿瘤分级等临床病理特征的联系，以期评估Tp53作为BC生物标志物的潜力。

研究人员是如何开展这项探索的呢？他们从伊朗德黑兰Shohadaye Tajrish医院收集了70例经病理确诊的BC患者的肿瘤组织样本。所有样本均经过严格的病理学评估，包括根据美国癌症联合委员会(AJCC)第八版指南进行病理分期(pTNM)，以及采用诺丁汉分级系统进行肿瘤分级。关键的技术方法包括：从肿瘤组织中提取高质量的总RNA，经过DNA酶处理去除基因组DNA污染后，使用特异性引物通过实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术精确检测Tp53基因的信使RNA(mRNA)表达水平，并以β-肌动蛋白(β-actin, ACTB)基因作为内参基因进行标准化。获得的基因表达数据最终通过专业的统计软件(SPSS)进行分析，比较不同临床特征组别间的表达差异。

基因表达结果

研究发现，在70名BC患者中，仅有14名（20%）检测到Tp53基因的表达。进一步分析显示，Tp53的表达与疾病分期密切相关。

具体而言，IV期患者的Tp53表达率高达100%，而I期患者则完全检测不到表达。II期和III期患者的表达率分别为28.57%和71.43%，不同分期之间的表达差异具有高度统计学意义(P<0.001)。这一结果提示，Tp53的表达上调可能与BC的进展有关。

变量特征关联分析

研究还深入分析了Tp53表达与各种临床病理变量之间的关联。年龄方面，40岁及以上患者的Tp53表达率(47.83%)显著高于40岁以下患者(6.38%)。有BC家族史的患者，其Tp53表达率(66.67%)远高于无家族史的患者(4.27%)。疾病持续时间超过1年的患者，Tp53表达水平也更高。在肿瘤分级方面，高级别（G2和G3）肿瘤的Tp53表达率(75%)显著高于低级别（G0和G1）肿瘤。此外，生育次数超过1次的女性，其Tp53表达率(35%)也高于生育次数较少或未生育的女性(0%)。所有这些关联的P值均小于0.001，表明关联强度很高。

综合研究结果与讨论，本研究的结论清晰地揭示了Tp53基因表达在BC中的动态特性。最重要的发现之一是Tp53表达与疾病分期呈正相关，即分期越晚，表达水平越高。特别值得注意的是，在最早的I期BC中完全检测不到Tp53表达，这强烈暗示Tp53的失调可能并非BC发生的初始驱动事件，而是疾病进展和侵袭性表型的一个重要标志。这一模式与在某些其他癌症（如结直肠癌和肝细胞癌）中Tp53突变早期发生的情况有所不同，提示了BC致癌过程的组织特异性。因此，监测Tp53表达水平有望成为识别高风险早期BC、进行疾病进展监测和预后分层的有力工具。

此外，Tp53表达的上调还与一系列已知的不良预后因素紧密相关，包括高龄（≥40岁）、BC家族史、高肿瘤分级（G2/G3）、较长病程以及多次生育史。这进一步巩固了Tp53作为BC侵袭性生物学行为分子指标的地位。需要指出的是，本研究通过RT-qPCR检测的是Tp53的mRNA水平，无法直接区分野生型（有功能）和突变型（功能失常）的p53蛋白。在癌症中观察到的p53过表达，常常是由于p53基因发生突变后，其编码的突变型p53蛋白稳定性增加、半衰期延长所致，而非具有正常肿瘤抑制功能的野生型p53表达上调。

尽管本研究存在一些局限性，如单中心设计、样本量有限、缺乏蛋白水平验证（如免疫组化）和基因测序来确认突变状态，但其结果仍然提供了来自伊朗人群的有价值数据，增进了我们对BC中Tp53表达动态的理解。总之，这项研究强调了Tp53表达水平与BC临床病理特征的显著关联，特别是在疾病分期方面的规律，为将Tp53开发成为BC诊断和预后评估的分子生物标志物奠定了坚实的基础，并为未来更大规模、整合多组学数据的纵向研究指明了方向。