中国一家基层医疗机构中对非结核分枝杆菌皮肤感染的回顾性分析：诊断准确性、治疗效果及基于PCR的菌种检测

《Journal of Clinical Microbiology》：Retrospective analysis of non-tuberculous mycobacterial skin infections: diagnostic accuracy, treatment efficacy, and PCR-based species detection in a Chinese primary care hospital

非结核分枝杆菌（NTM）皮肤感染在沿海地区职业暴露人群中的诊断与治疗研究。2021-2022年回顾性分析144例患者，通过FFPE组织样本实时PCR验证临床诊断（符合率79.17%），发现Mycobacterium marinum和Mycobacteroides abscessus为主要病原体，联合抗生素（氯雷他定+利福平）治愈率达90.97%。证实整合临床-病理评估在资源有限地区可行，并建立FFPE样本PCR检测方法，为基层诊疗提供参考。

非结核分枝杆菌（Non-tuberculous mycobacteria, NTM）引起的皮肤感染在全球范围内逐渐增多，尤其在资源有限的基层医疗机构中，其诊断和治疗面临诸多挑战。这类感染通常由多种分枝杆菌引起，其中一些与水生环境密切相关，如*Mycobacterium marinum*和*Mycobacteroides abscessus*等。这些病原体在自然环境中广泛存在，能够通过各种途径进入人体，引发不同类型的感染，包括肺部、皮肤及全身性感染。由于NTM种类繁多，且临床表现与结核分枝杆菌（*Mycobacterium tuberculosis*）相似，准确的病原体鉴定对制定合适的治疗方案至关重要。

本研究聚焦于中国山东省寿光市的一家基层医院，该地区因靠近海洋，居民常接触水生环境，导致NTM皮肤感染的高发。研究时间跨度为2021年至2022年，共纳入144名疑似NTM皮肤感染的患者，旨在评估基层医疗机构在缺乏先进检测设备和专业人员的情况下，如何通过整合临床症状、暴露史和组织病理学检查进行诊断，并探讨治疗效果。研究结果表明，临床经验性诊断与分子生物学检测结果的一致性达到79.17%，说明基层医院在缺乏高通量检测手段时，仍能通过综合判断实现较高的诊断可靠性。此外，通过使用实时聚合酶链反应（real-time PCR）技术，研究人员成功对部分病例进行了物种级别的鉴定，其中*M. marinum*和*M. abscessus*是最常见的感染类型。

NTM皮肤感染的临床表现通常包括皮肤上的红肿、结节、斑块或溃疡等，病变多呈单侧分布，常见于手部、腕部及上肢区域。组织病理学检查显示，所有病例均表现为肉芽肿性炎症，主要由淋巴细胞、组织细胞和多核巨细胞构成，部分病例可见干酪样坏死或中性粒细胞微脓肿。然而，由于传统抗酸染色法的局限性，仅凭组织病理学无法明确区分不同NTM种类。因此，结合患者的暴露史和临床特征成为经验性诊断的重要依据。例如，对于有水产品处理史或因木刺等创伤性事件导致感染的患者，其皮肤病变特征和组织病理表现可以支持NTM感染的初步判断。

在治疗方面，该基层医院主要采用经验性抗生素治疗方案，以克拉霉素和利福平为主要药物，通常联合使用。这一组合疗法被证明在本研究中具有显著的疗效，144名患者中有131人（90.97%）达到临床治愈，即皮肤病变完全消退且无新发病灶。其余13名患者虽未完全治愈，但病变明显改善，仅有少数因不规律用药或自行停药导致复发。值得注意的是，部分复发患者在重新接受治疗后病情得到控制，且在随后的6个月随访期内未出现再次复发。这些结果表明，经验性治疗在资源有限的基层医疗机构中仍具有较高的应用价值，尤其是在无法进行复杂分子检测的情况下。

为了提高诊断的准确性，研究人员创新性地将实时PCR技术应用于存档的福尔马林固定石蜡包埋（formalin-fixed paraffin-embedded, FFPE）组织样本。这种方法不仅解决了传统PCR依赖新鲜样本的限制，还为回顾性研究提供了新的可能性。通过对144例FFPE样本的检测，研究人员成功识别出114例NTM感染（79.17%），并在其中26.32%的病例中实现了物种级别的鉴定。尽管部分样本因DNA降解或靶向基因的限制未能明确物种，但这一方法在提高诊断效率和减少对新鲜样本的依赖方面表现出色。未来研究可进一步结合高通量测序技术，如16S-23S rRNA间隔区（ITS）或rpoB基因测序，以实现更精确的物种分类。

在基层医疗环境中，传统诊断方法如抗酸染色和培养法存在诸多不足。抗酸染色的特异性较低，难以区分结核分枝杆菌与NTM；而培养法不仅耗时较长，而且需要专业的实验室设备和操作人员，限制了其在资源有限地区的应用。相比之下，实时PCR技术具有更高的灵敏度和特异性，能够在较短时间内完成检测，并提供更明确的病原体信息。此外，LAMP（环介导等温扩增）技术因其操作简便、成本低廉，也被认为是资源受限地区的一种可行选择。然而，尽管这些分子方法在提高诊断精度方面表现出色，它们仍面临一些挑战，如FFPE样本中DNA降解问题、检测成本以及对专业设备的依赖。

本研究的结果具有重要的现实意义。首先，它证实了在缺乏先进检测手段的情况下，基层医院可以通过综合临床症状、暴露史和组织病理学检查进行有效的经验性诊断。其次，利用存档的FFPE样本进行分子检测，为回顾性研究和疾病监测提供了新的途径。最后，经验性治疗方案的高治愈率表明，即使在资源有限的环境下，合理选择抗生素仍能显著改善患者预后。这些发现不仅对中国的基层医疗机构具有指导价值，也为全球范围内面临类似挑战的地区提供了借鉴。

此外，本研究还强调了分子诊断在提升NTM感染管理中的重要性。随着NTM感染在全球范围内的增加，尤其是与水生环境相关的感染，传统的诊断方法已难以满足临床需求。分子生物学技术的引入，不仅提高了诊断的准确性，还为治疗方案的优化提供了依据。例如，对于*M. abscessus*等可能具有耐药性的NTM种类，经验性治疗可能不足以控制感染，因此需要结合培养和药敏试验来调整用药策略。然而，在基层医院，由于设备和人力资源的限制，药敏试验的实施并不普遍，因此经验性治疗仍然是主要手段。

本研究还提出了未来改进的方向。首先，应进一步优化DNA提取方法，以提高FFPE样本中DNA的完整性和可用性。其次，需要简化PCR检测流程，降低操作复杂度和成本，使其更适用于基层医疗机构。最后，应推动分子检测技术的普及，使更多基层医院能够获得可靠的诊断工具，从而提高整体的疾病管理能力。通过这些措施，不仅可以提升NTM感染的诊断率，还能减少误诊和漏诊的风险，最终改善患者的治疗效果和生活质量。

综上所述，本研究通过整合临床评估与分子检测，为资源有限地区的NTM皮肤感染管理提供了一种可行的解决方案。研究结果表明，经验性诊断在基层医疗机构中具有较高的可靠性，而实时PCR技术的应用则显著提高了诊断的精确性。同时，研究也指出了当前检测方法的局限性，并提出了未来技术改进和资源优化的建议。随着分子生物学技术的不断发展，其在基层医疗中的应用将变得更加广泛，为全球范围内的NTM感染防控提供有力支持。