综述：基于CRISPR的多能干细胞功能基因组学

《Stem Cell Reviews and Reports》：CRISPR-Based Functional Genomics in Pluripotent Stem Cells

CRISPR技术与多能干细胞（PSC）结合为疾病建模和再生医学提供新工具，涵盖基因敲除、碱基编辑及激活/干扰技术，探讨方法学进展与局限，包括脱靶效应、表观遗传异质性及细胞特异性响应，并总结其在免疫逃逸细胞系、器官oid模型和表型筛选中的应用价值。

摘要

基于CRISPR的功能基因组学与多能干细胞（PSC）技术的结合已被认为是研究基因功能、模拟人类疾病和推进再生医学的一种变革性方法。本综述旨在全面评估CRISPR-Cas平台的最新进展，包括基因敲除、碱基编辑和prime编辑以及CRISPR激活或干扰（CRISPRa/i）在PSC系统中的应用。通过对人类PSC（包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞）的研究，总结了用于全基因组筛选、谱系追踪和治疗工程的方法。尽管在编辑效率、递送策略和基因组安全性方面取得了进展，但仍存在一些局限性，如脱靶修饰、表观遗传变异和细胞类型特异性反应。值得注意的应用包括生成具有免疫逃逸能力的PSC系、开发用于生理和病理研究的类器官模型，以及实施与疾病相关特征的表型筛选。总体而言，这些技术和方法的进步使得PSC-CRISPR功能基因组学成为一种多功能且强大的工具，有助于阐明人类生物学的基本方面、解析复杂性状，并加速将实验研究成果转化为临床应用。