弓形虫（Toxocara canis）感染在硫代乙酰胺诱导的慢性肝纤维化小鼠模型中的免疫调节和抗纤维化作用

《Acta Tropica》：Immunomodulatory and Anti-fibrotic Effects of Toxocara canis Infection in a Murine Model of Thioacetamide-Induced Chronic Hepatic Fibrosis

慢性肝纤维化由ECM异常积累引起，而弓首蛔虫幼虫引发的肝 toxocariasis则通过炎症介导。本研究首次探索TAA诱导的慢性肝纤维化模型中，犬弓首蛔虫幼虫的免疫调节作用，发现其通过M2巨噬细胞极化抑制减少胶原沉积，显著改善肝纤维化。

　　慢性肝纤维化是由于长期的肝脏损伤，如病毒、酒精和化学物质等因素引起的细胞外基质（ECM）异常积累所导致的一种严重病理状态。近年来，研究者们发现寄生虫感染可能在调节宿主免疫反应方面发挥重要作用，从而对肝脏疾病产生一定的治疗效果。在这一背景下，本研究探讨了犬弓首蛔虫（*Toxocara canis*）幼虫在慢性肝纤维化中的潜在作用，特别是其作为携带糖蛋白抗原的安全载体的可能。通过构建慢性TAA（硫代乙酰胺）中毒模型，研究者们评估了*Toxocara canis*感染对肝脏炎症和纤维化的影响，包括巨噬细胞极化动态、胶原沉积情况以及肝脏组织病理变化。

肝脏作为重要的免疫器官，其结构和功能的变化对疾病的进展至关重要。在慢性肝损伤过程中，肝星状细胞（HSCs）扮演了关键角色，这些细胞在炎症或损伤刺激下会转化为肌成纤维细胞样细胞，并在细胞外基质中沉积胶原蛋白等物质，形成纤维化瘢痕。此外，HSCs还释放多种促炎和促纤维化因子，进一步加剧肝脏损伤。研究发现，持续的免疫激活，尤其是通过转化生长因子-β1（TGF-β1）和氧化应激通路，会促进HSCs的活化，而HSCs与免疫细胞（如巨噬细胞）的相互作用则可能增强纤维化反应。

本研究通过使用TAA建立慢性肝损伤和纤维化模型，评估了*Toxocara canis*感染对肝脏病理变化的影响。实验结果显示，在TAA与*Toxocara canis*联合感染的组别中，M2型巨噬细胞的极化程度显著提高，有助于抑制纤维化进程。然而，与单独接受TAA注射的组别相比，M2型巨噬细胞的聚集量明显减少，这表明*Toxocara canis*感染可能对巨噬细胞的极化动态产生一定的调控作用。此外，研究还发现，TAA与*Toxocara canis*联合感染组别中，肝脏中胶原蛋白I和III的沉积量显著减少，与单独接受TAA注射的组别相比差异显著（p值<0.001），这进一步支持了*Toxocara canis*感染可能具有抗纤维化作用。

在肝脏组织病理学评估中，研究者们采用了Batts-Ludwig评分系统，对肝脏的炎症程度和纤维化阶段进行了系统评分。结果显示，*Toxocara canis*感染可能在一定程度上减轻了肝脏的炎症反应和纤维化程度。这种效果可能与寄生虫抗原的免疫调节机制有关，尤其是通过调控巨噬细胞的极化状态以及抑制细胞外基质的异常积累。此外，寄生虫感染可能通过影响HSCs的活化和功能，从而减少胶原蛋白的沉积，缓解纤维化进程。

在实验过程中，研究人员通过观察*Toxocara canis*感染对肝脏中幼虫数量的影响，进一步探讨了肝脏免疫和结构变化如何影响寄生虫的持续存在。结果显示，随着感染时间的延长，肝脏中*Toxocara canis*幼虫的数量显著减少，尤其是在16周感染后的组别中，幼虫数量降至最低水平。这表明，肝脏的免疫反应可能在一定程度上限制了寄生虫的存活和繁殖，同时也可能对肝脏的结构和功能产生一定的影响。

寄生虫感染的免疫调节作用不仅体现在对肝脏疾病的影响上，还可能涉及更广泛的免疫机制。例如，犬弓首蛔虫的分泌物（TESPs）含有多种免疫相关分子，如粘蛋白、糖蛋白、凝集素、酶等，这些分子可能通过不同的途径影响宿主的免疫反应。研究表明，某些TESPs成分可能促进免疫调节因子的释放，如TGF-β1和IL-10，这些因子在抑制炎症反应和促进组织修复方面具有重要作用。此外，某些TESPs成分可能通过影响AMPK的磷酸化，增强其免疫活性，从而对肝脏疾病产生一定的治疗效果。

本研究还探讨了TAA诱导的肝纤维化对*Toxocara canis*感染的影响。结果显示，在TAA与*Toxocara canis*联合感染的组别中，肝脏中*Toxocara canis*幼虫的数量显著减少，这可能与肝脏的免疫反应增强有关。此外，肝脏的结构变化可能影响寄生虫的存活和迁移，从而在一定程度上限制其对宿主的进一步感染。这些发现为利用寄生虫抗原开发新的抗纤维化策略提供了理论依据和实验支持。

在实验设计方面，研究人员采用了多种方法来评估*Toxocara canis*感染对肝脏疾病的影响。例如，通过观察巨噬细胞的极化状态（M1 vs. M2），研究者们能够了解肝脏免疫反应的动态变化。此外，通过评估胶原蛋白I和III的沉积情况，研究人员能够直观地观察肝脏纤维化的程度。这些评估方法不仅为研究提供了重要的数据支持，还帮助研究者们更好地理解寄生虫感染在肝脏疾病中的潜在作用。

在伦理方面，本研究遵循了埃及大学医学院伦理委员会的规定，并符合国际上对实验室动物使用和护理的普遍原则。实验过程中，研究人员使用了特定的动物模型，如小鼠，通过注射TAA或口服感染性幼虫来建立慢性肝损伤和纤维化模型。这些模型不仅能够模拟人类肝脏疾病的发生发展过程，还为研究提供了可靠的实验基础。

综上所述，本研究首次系统评估了*Toxocara canis*感染对慢性TAA诱导肝纤维化的影响，发现其可能具有一定的抗炎和抗纤维化作用。这些作用可能与寄生虫抗原的免疫调节机制有关，尤其是通过调控巨噬细胞的极化状态以及抑制细胞外基质的异常积累。此外，研究还发现，肝脏的免疫反应可能在一定程度上限制了寄生虫的存活和繁殖，同时也可能对肝脏的结构和功能产生一定的影响。这些发现不仅为理解寄生虫感染与肝脏疾病之间的相互作用提供了新的视角，也为开发基于寄生虫抗原的新型抗纤维化策略提供了理论支持和实验依据。未来的研究需要进一步探索这些机制，以期为临床治疗提供更多的可能性。