《European Journal of Medicinal Chemistry Reports》：Discovery of a First-in-Class Degrader for Microphthalmia-associated Transcription Factor (MITF)
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MITF靶向蛋白降解剂WZS0347通过PROTAC技术有效降解MITF，抑制黑色素瘤细胞增殖迁移，机制涉及 cereblon 依赖的泛素化降解通路。
沈伟忠|杨汉明|陈一涵|毕书阳|刘在洲|罗凯|王振|王静|丁凯
中国科学院上海有机化学研究所化学生物学国家重点实验室，中国上海凌凌路345号，200032
摘要
微小眼症相关转录因子（MITF）在恶性黑色素瘤的发病机制、进展和药物抗性中起着核心作用。然而，由于缺乏适合传统小分子抑制的明确作用位点，MITF历来被认为是一个难以攻克的药物靶点。在这项研究中，我们发现了WZS0347，这是一种针对MITF进行降解的首创蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC）。WZS0347显著降低了多种黑色素瘤细胞系（包括B16F10、A375和GAK）中的MITF蛋白水平。机制研究表明，其降解作用是通过cereblon依赖的泛素-蛋白酶体途径实现的。因此，WZS0347处理导致MITF下游靶基因的表达下调，并显著抑制了癌细胞的克隆形成和迁移能力。
章节摘录
引言
微小眼症相关转录因子（MITF）属于微小眼症（MiT/TEF）家族，具有基本的螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链（bHLH-Zip）结构域，在黑色素细胞生物学和黑色素瘤发病机制中发挥关键作用1, 2, 3, 4。MITF通过与其它bHLH-Zip家族成员（如转录因子EB（TFEB）、TFE3或TFEC）形成同源或异源二聚体来结合DNA5, 6，从而调控基因表达。其靶基因对黑色素生成至关重要，
结果与讨论
MITF PROTAC降解剂的设计。我们选择TT-012作为MITF PROTAC开发的靶结合配体（弹头），因为它具有较高的MITF结合亲和力，并且结构适合与E3 ligand结合（如图1A所示的生物素化衍生物TT-012-biotin仍保持结合亲和力）。基于这些发现，我们通过将TT-012与CRBN E3 ligase ligand通过不同的连接子连接，构建了一个针对性的PROTAC候选库（图1B）。
化学合成
结论
微小眼症相关转录因子（MITF）是黑色素瘤的潜在治疗靶点。然而，由于转录因子通常具有无序的结构，直接靶向MITF颇具挑战性。近年来，靶向蛋白降解已成为针对“难成药”靶点的一种有效策略25, 26。在本研究中，我们发现了WZS0347，这是一种首创的MITF PROTAC降解剂。WZS0347能够有效降解多种
实验部分
通用化学方法化学合成中使用的试剂和溶剂均来自商业供应商，无需进一步纯化。所有反应均通过薄层色谱（TLC）进行监测。最终化合物均通过硅胶（300-400目）柱层析进行纯化。核磁共振（NMR）谱图在Agilent DD2 500 MHz或Bruker Avance III HD 600 MHz NMR光谱仪上记录，溶剂为DMSO-d6。高分辨率质谱（HRMS）数据由Bruker提供。
CRediT作者贡献声明
王振：撰写、审稿与编辑、监督、资金获取、概念构思。丁凯：撰写、审稿与编辑、监督、资金获取、概念构思。毕书阳：验证。陈一涵：验证。杨汉明：验证、实验研究。沈伟忠：撰写初稿、验证、项目管理、实验研究。王静：撰写、审稿与编辑、监督、资金获取、概念构思。罗凯：实验研究。刘在洲：
利益冲突声明
作者声明不存在可能影响本文研究的已知财务利益或个人关系。
致谢
我们感谢国家自然科学基金（22521104）、中国科学院战略性先导科技专项（XDB1060000）以及化学生物学国家重点实验室的财政支持
