RP-HPLC方法用于同时测定德西他滨和瑞格列奈的开发和验证：在含有体外神经毒性评估的固体脂质纳米颗粒制剂中的应用

《CHROMATOGRAPHIA》：Development and Validation of RP-HPLC Method for Simultaneous Determination of Decitabine and Repaglinide: Application to Solid Lipid Nanoparticle Formulations with In Vitro Neurotoxicity Assessment

帕金森病治疗中，通过SLN系统联合DB和RP药物实现长效递送与脑靶向，并采用优化RP-HPLC技术实现双药同步高效检测。摘要：

　　

摘要

帕金森病（PD）会导致多巴胺能神经元的丢失以及代谢和表观遗传学的异常。DNA甲基化酶抑制剂地西他滨（DB）能够促进被甲基化抑制的神经保护基因的表达。瑞格列奈（RP）是一种用于治疗2型糖尿病（T2DM）的胰岛素促泌剂，该疾病是帕金森病的常见并发症。瑞格列奈通过改善胰岛素信号传导并调节SIRT1和HDACs来减少氧化应激和炎症。这两种药物的生物利用度和半衰期都存在问题。我们创新的RP-HPLC技术和固体脂质纳米粒子（SLN）系统实现了双药的同时释放、脑部靶向以及更好的药代动力学，从而有效治疗帕金森病。地西他滨和瑞格列奈的分离采用Waters? e2695 HPLC系统完成，该系统配备了PDA检测器和Phenomenex Luna PFP柱（250 × 4.6 mm，5 μm），以提高选择性。优化的等度流动相（溶剂A:B比例为40:60）有助于获得更好的峰形和分辨率。在6分钟的色谱过程中，地西他滨和瑞格列奈分别在2.7分钟和3.6分钟时被洗脱出来。这种方法能够精确、一致地同时检测这两种分析物，适用于高通量分析。根据常规建议，对该技术进行了适当性、特异性、线性、精度、准确性和稳健性的验证。验证结果显示，在地西他滨和瑞格列奈的SLN制剂中，药物的包封效率分别为53.26%和76.68%。MTT实验表明，这两种药物能够保护N2A细胞的存活能力，说明它们具有神经保护作用。这些结果证实了该方法的可靠性，使其适用于其他应用，例如在脂质体系统、聚合物-脂质混合纳米粒子以及脂质-药物缀合物中同时检测和定量这两种药物，用于体外和体内的释放及包封研究。