一种新型床旁舌拭子检测方法在肺结核诊断中的准确性：一项多中心前瞻性研究

《Clinical Microbiology and Infection》：Diagnostic Accuracy of a Novel Point-of-Care Tongue Swab Assay for Pulmonary Tuberculosis: A Multicenter Prospective Study

结核病非侵入性检测：便携式分子系统MiniDock在痰液和舌拭子中的诊断性能研究。该前瞻性多中心研究纳入594例疑似肺结核患者，评估MiniDock系统（基于RHAM专利技术）在痰液和舌拭子样本中的诊断性能。结果显示，痰液样本的MiniDock检测灵敏度为98.2%（95%CI 95.7-99.2%），特异性90.4%（95%CI 86.7-93.2%），与Xpert和MRS参考标准一致性达93.9%。舌拭子样本灵敏度80.0%（95%CI 74.8-84.3%），特异性95.4%（95%CI 92.5-97.2%），低载量样本灵敏度显著下降至47.8%（95%CI 29.2-67.0%）。研究证实MiniDock作为快速现场诊断工具，在痰液样本中表现优异，而舌拭子样本在非侵入性检测中具有实用价值，尤其适用于痰液采集困难者。

　　
本研究由广东省结核病控制中心主导，联合多家结核病专科医院，系统评估了MiniDock MTB Test在肺结核诊断中的性能。该技术采用创新性RNA酶杂交辅助扩增（RHAM）技术，通过舌咽部采样和痰液样本实现结核分枝杆菌的快速检测，为非侵入性分子诊断提供了新方案。

研究设计覆盖了珠江三角洲地区7家结核病定点医院，共纳入594例疑似肺结核患者。样本采集采用标准化流程：在晨间空腹状态下，通过专业器械采集舌面前3/4区域样本，同步收集3份痰液样本。值得注意的是，舌咽采样前严格禁止进食饮水30分钟，并采用压力旋转法（30秒旋转10次）确保样本均匀性。

在诊断性能方面，痰液样本的MiniDock检测显示98.2%的敏感性（95%CI 95.7-99.2%）和90.4%特异性（86.7-93.2%），与Xpert MTB/RIF检测结果高度一致（符合率93.9%）。该技术成功识别出Xpert漏检的31例阳性样本，其中19例经MGIT培养确认，临床追踪显示26例确诊为肺结核，5例为非肺结核感染。这一发现提示MiniDock在检测特定类型结核感染方面可能具有补充价值。

舌咽采样版本的MiniDock表现出独特的临床价值。尽管其敏感性（80.0%）较痰液检测低，但特异性达到95.4%（92.5-97.2%），在低负荷样本检测中仍保持47.8%的灵敏度（置信区间29.2-67.0%）。研究特别指出，在痰液采集困难群体（如儿童、老年或重症患者）中，舌咽采样成功率达97.3%，显著优于痰液采集的86.2%。

技术优势体现在三个维度：首先，检测流程仅需30分钟，较传统Xpert的1小时大幅缩短；其次，样本处理无需复杂离心或核酸提取步骤，符合WHO提出的POCT（即时检测）核心标准；再者，检测成本控制在5美元以下，具备WHO《结核病产品 Profiles》的经济可行性要求。

讨论部分揭示了关键创新点：1）通过专利号21870546.5的RHAM技术，实现无需预处理的样本快速检测；2）非侵入性采样方式使连续监测成为可能，这对追踪耐药结核病治疗具有重要价值；3）舌咽样本中结核菌负荷与检测灵敏度呈正相关，在菌量＞1000拷贝/毫升时灵敏度可达98.2%，提示未来可通过样本预处理技术提升低负荷样本检测能力。

研究局限性值得注意：1）样本来源于高预设概率的结核专科医院，可能影响社区筛查的适用性；2）未纳入儿童和免疫缺陷群体，这些人群的检测效能需要独立验证；3）未进行成本效益分析，特别是在资源受限地区。

该成果对结核病防控具有三重意义：临床层面，为无法获取痰液样本的群体提供了可靠替代方案；技术层面，验证了专利技术RHAM在POCT领域的适用性；公共卫生层面，检测时效性提升和成本优势将显著改善中西部地区的筛查覆盖率。研究建议后续重点开展社区队列研究，特别是无症状高危人群的筛查效能评估，这将是产品获得WHO认证的关键步骤。

值得注意的是，在痰液样本检测中，MiniDock展现了优于Xpert的漏诊检测能力（额外发现31例），这可能与检测靶点（IS6110和gyrb基因）的特异性差异有关。同时，舌咽采样版本与MGIT培养结果的符合率达到85.4%，虽低于痰液版本，但仍显著高于文献报道的口腔样本检测平均符合率（68.3%）。

技术改进方向方面，研究团队已启动基于磁珠富集和热裂解优化的新型预处理方案，实验室数据显示灵敏度可提升至89.5%。此外，开发多指标联合检测模块，整合结核菌素试验和分子检测，有望实现单一平台的结核病综合诊断。

该研究获得多项省级科研基金支持（B2025492、2021B1212030003），为后续产品迭代提供了重要数据支撑。作者特别强调，虽然检测包由广州 Pluslife 生物科技公司提供，但研究过程中严格遵循盲法检测原则，所有实验室操作均由认证人员执行，确保结果客观性。

未来研究计划包括：1）开展多中心社区筛查试验，目标人群涵盖健康志愿者和长期随访者；2）开发便携式检测设备，实现床旁即时诊断；3）建立基于深度学习的样本预筛模型，提升检测效率。这些进展将推动该技术纳入WHO《结核病诊断指南》推荐方案。

总之，本研究不仅验证了舌咽采样在结核病诊断中的可行性，更通过创新检测平台实现了速度、准确性和成本效益的平衡。其技术特性与WHO 2024年新型诊断工具要求高度契合，为全球结核病防控提供了具有商业化潜力的解决方案。