一种源自苔藓的、具有微生物特征的萜类合成酶CrMTPSL3的发现、作用机制及生物生产研究：该酶能够生成三环球烷骨架结构

《ACS Catalysis》：Discovery, Mechanism, and Bioproduction Studies of a Moss-Derived Microbial-like Terpene Synthase CrMTPSL3 Generating the Tricyclic Sphaeroane Scaffold

三环齐墩果烷类二萜合酶CrMTPSL3的立体化学结构及合成途径解析，通过化学计算与结晶实验确定产物绝对构型，氘代扫描揭示其合成步骤包括GGPP异构化、多步环化及氢转移等，突变研究阐明结构基础，成功构建百毫克/升级工程细胞工厂。

　　

球烷二萜类化合物是一种具有三环骨架的天然产物，但其生物合成机制至今仍不清楚。我们从Claopodium rostratum中分离出一种球烷二萜合成酶CrMTPSL3，并通过化学计算和结晶实验确定了其产物的绝对立体化学结构。进一步的氘代扫描实验表明，CrMTPSL3通过以下步骤逐步构建球烷骨架：GGPP异构化、1,11-和10,14-环化、两次连续的1,2-氢转移、1,2-甲基转移、pro-S氢的1,2-氢转移、1,6-环化以及pro-R氢的去质子化。我们还通过一系列突变研究探讨了该酶的结构基础。最终成功开发出一种工程化细胞工厂，能够以每升数百毫克的产量大量生产球烷类化合物。