脾切除术会调节肾脏内的B细胞分化过程，并影响缺血后肾脏的修复功能

《Frontiers in Immunology》：Splenectomy modulates intrarenal B cell differentiation and impairs repair of post-ischemic kidney

缺血再灌注损伤（IRI）后脾切除术通过改变肾脏B细胞亚群和炎症微环境，加剧肾小管损伤及纤维化。流式细胞术和免疫组化显示，脾切除术促使肾脏B细胞向激活型、记忆型及MHC II+表型分化，并上调IL-17、MCP-1和TGF-β等促纤维化炎症因子表达。该研究揭示了脾-肾轴在IRI修复中的关键作用，提示脾切除术可能通过干扰肾脏B细胞平衡和炎症调控，导致组织修复障碍。

　　### 脾脏切除对肾脏缺血再灌注损伤修复的影响研究

肾脏缺血再灌注损伤（Ischemia-Reperfusion Injury, IRI）是器官移植过程中常见的病理现象，其特点是组织缺血后恢复血流供应，从而引发一系列炎症反应、氧化应激和细胞损伤。这种损伤不仅影响移植后的肾脏功能，还可能导致慢性肾脏疾病（Chronic Kidney Disease, CKD）的进展。在IRI的修复过程中，淋巴细胞介导的免疫反应被认为是关键的调控机制之一。然而，脾脏作为全身免疫系统的上游调节器，其在IRI修复中的作用尚未被充分阐明。因此，本研究通过构建小鼠模型，探讨了脾脏切除对肾脏IRI修复的影响，特别是在免疫微环境和炎症因子表达方面的变化。

#### 脾脏切除与IRI修复的关系

脾脏在维持免疫稳态方面发挥着重要作用，尤其在调节T细胞和B细胞的功能方面。尽管已有研究表明，脾脏切除可能在急性IRI阶段具有一定的保护作用，如通过减少早期炎症反应来减轻肾损伤，但其在修复阶段的具体影响仍不明确。本研究发现，脾脏切除不仅未能改善IRI后的肾脏功能，反而导致了更严重的组织损伤和纤维化。在实验中，接受脾脏切除的小鼠在IRI修复的第10天和第30天表现出显著的肾功能下降，主要体现在血清肌酐水平的升高。此外，这些小鼠的肾小管损伤和纤维化程度也明显高于未接受脾脏切除的对照组。

肾小管损伤是IRI修复过程中常见的病理特征，通常与肾功能恢复缓慢相关。本研究中，脾脏切除组在第30天的肾小管损伤比例显著高于对照组，尤其是在肾皮质和外髓部。这种损伤的加剧可能与脾脏切除后免疫细胞的异常募集和激活有关。进一步的免疫组化分析显示，脾脏切除组的肾组织中CD45阳性细胞（即免疫细胞）的比例在第30天显著增加，表明脾脏切除可能促进了免疫细胞在肾脏中的持续浸润，从而加重了炎症反应和组织修复的障碍。

#### 免疫微环境的变化

除了肾功能和组织结构的变化，脾脏切除还显著影响了肾脏的免疫微环境。在IRI后的第30天，脾脏切除组的B细胞亚群表现出更明显的激活和记忆表型。具体而言，脾脏切除组中表达CD69（激活标志）和MHCII（主要组织相容性复合体II类分子，与抗原呈递相关）的B细胞比例显著增加，而记忆B细胞（CD27+）的比例也高于对照组。这些变化可能与脾脏作为B细胞的主要储存器官有关，脾脏切除后，B细胞的分布和功能发生了改变，导致其在肾脏中的异常分化和激活。

相比之下，T细胞亚群的比例在脾脏切除组和对照组之间没有显著差异。然而，T细胞在IRI修复中的作用同样不可忽视，特别是在调节免疫反应和组织修复方面。尽管本研究未发现脾脏切除对T细胞表型的显著影响，但其在肾脏中的分布和功能可能仍然受到间接调控。例如，脾脏切除可能影响T细胞与B细胞之间的相互作用，从而间接影响免疫微环境的稳定性。

#### 炎症因子和细胞因子的表达

在IRI修复过程中，炎症因子和细胞因子的表达水平对组织修复和纤维化具有重要影响。本研究发现，脾脏切除组的肾脏中IL-17、MCP-1和TGF-β的表达水平显著升高。这些因子在促进炎症反应和纤维化形成方面具有重要作用。IL-17是一种促炎性细胞因子，能够通过上调CXCL12的表达，促进B细胞的招募和纤维化灶的形成。MCP-1则通过吸引单核细胞和巨噬细胞，加剧了肾组织的炎症反应。TGF-β是纤维化过程中的核心因子，能够通过激活一系列促纤维化信号通路，导致肾间质纤维化和肾小管萎缩。

值得注意的是，脾脏切除组的肾组织中IFN-γ的表达水平在对侧肾脏中显著降低。IFN-γ通常由自然杀伤细胞（NK细胞）和T细胞产生，具有重要的抗炎和免疫调节作用。脾脏切除后，IFN-γ的减少可能反映了脾脏作为其主要来源的缺失，进而影响了系统性免疫调节的平衡。这一现象提示，脾脏不仅在IRI的急性阶段发挥作用，其在修复阶段的免疫调节功能同样不可忽视。

#### 机制探讨与未来研究方向

本研究的结果表明，脾脏在IRI修复中的作用可能远比预期复杂。脾脏不仅是B细胞的储存器官，还通过调控免疫细胞的分布和功能，影响肾脏的修复过程。脾脏切除后，B细胞的异常分化和激活可能通过促进促炎性细胞因子的释放，进一步加重肾脏的损伤。此外，脾脏还可能通过其调控的胆碱能抗炎通路，抑制炎症反应，从而保护肾脏免受进一步损伤。当脾脏功能受损时，这种保护机制可能被削弱，导致炎症反应的持续和纤维化的加剧。

为了进一步验证这些机制，未来的研究可以考虑使用B细胞缺陷小鼠或通过特定的B细胞耗竭技术，明确B细胞在IRI修复中的具体作用。同时，研究还应关注脾脏与肾脏之间的免疫相互作用，特别是脾脏切除后是否会导致次级淋巴组织（Tertiary Lymphoid Tissues, TLTs）的形成，从而促进慢性炎症和纤维化。此外，脾脏切除可能对其他类型的免疫细胞（如巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞和先天性淋巴细胞）产生影响，这些细胞在IRI修复中的作用尚未被充分研究。

#### 临床意义与研究局限性

本研究的结果对临床实践具有重要意义。脾脏切除作为一种传统的预处理策略，曾被用于减少ABO不相容肾移植中的B细胞数量。然而，随着免疫抑制剂如利妥昔单抗的广泛应用，脾脏切除的应用逐渐减少。然而，本研究提示，脾脏切除可能在某些情况下增加IRI后的肾损伤风险，特别是在修复阶段。因此，对于接受脾脏切除的患者，尤其是那些存在肾移植风险的人群，应加强术后肾功能的监测，并采取适当的保护措施，以减少AKI向CKD转化的可能性。

尽管本研究提供了重要的线索，但仍存在一些局限性。首先，本研究主要关注了B细胞和T细胞的亚群变化，而忽略了其他免疫细胞在IRI修复中的潜在作用。其次，肾组织中TLTs的识别和分析尚未进行，这可能影响对免疫微环境变化的全面理解。此外，肾功能的评估主要依赖于血清肌酐和胱抑素C水平，这些指标在单侧IRI模型中可能不够敏感，未来研究可采用更精确的评估方法，如透皮肾小球滤过率（GFR）或生物标志物（如NGAL和KIM1）来更准确地反映肾脏损伤的程度。

#### 结论

综上所述，脾脏切除在肾脏IRI修复过程中可能具有负面作用，尤其是在促进B细胞的激活和分化方面。这种变化可能导致促炎性因子的过度表达，从而加剧肾小管损伤和纤维化，影响肾脏的修复能力。虽然脾脏切除在急性IRI阶段可能具有一定的保护作用，但其在修复阶段的负面影响不容忽视。因此，未来的研究应进一步探讨脾脏与肾脏之间的免疫调控机制，以及如何通过干预B细胞或免疫通路来改善IRI后的修复过程。这些研究不仅有助于理解IRI的病理机制，还可能为临床提供新的治疗策略，以减少脾脏切除带来的潜在风险。