云母通过抑制CNOT2/c-Myc轴和诱导ROS产生在非小细胞肺癌中展现凋亡潜能及协同治疗前景

《Advances in Traditional Medicine》：Apoptotic and combinatorial potential of processed Mica via inhibition of CCR4-NOT transcription complex subunit 2/c-Myc and production of reactive oxygen species in non-small cell lung cancer cells

本研究针对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗难题，探讨了炮制云母(PMC)通过抑制CCR4-NOT转录复合体亚基2(CNOT2)/c-Myc信号轴、诱导活性氧(ROS)产生，进而促进癌细胞凋亡的分子机制。研究发现PMC不仅单用可诱导G1期阻滞和凋亡，还与多柔比星具有显著协同效应，为传统药物与现代化疗联合应用提供了新策略。

　　

肺癌作为全球男性发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌病例的80%。尽管手术、化疗和放疗等领域取得进展，但多数患者确诊时已属晚期，总体5年生存率仅10-15%。分子靶向治疗和联合治疗策略的出现为肺癌治疗带来新希望，但KRAS、EGFR等基因突变及ROS信号通路的复杂性仍制约疗效提升。

传统 Ayurveda 医学中长期用于痢疾、出血和炎症的云母，近年来被发现具有抗菌抗肿瘤潜力，但其在肺癌中的具体作用机制尚不明确。发表于《Advances in Traditional Medicine》的这项研究，首次系统揭示了炮制云母(PMC)通过双重机制诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的分子通路，并验证了其与常规化疗药物的协同效应。

研究人员采用MTT法检测细胞毒性，流式细胞术分析细胞周期，Western blotting检测蛋白表达，免疫共沉淀验证蛋白互作，DCFDA荧光探针测定ROS水平，并通过CompuSyn和SynergyFinder软件评估药物协同作用。

PMC抑制细胞活力并诱导凋亡

研究发现PMC在100μg/ml浓度以上对A549和H460细胞产生明显毒性作用，显著增加Sub-G₁期细胞比例（A549细胞达19.83%，H460细胞达25.41%）。Western blotting结果显示PMC处理组pro-PARP和pro-caspase-3蛋白表达量下降，证实了凋亡通路激活。

PMC调控细胞周期相关蛋白

PMC显著降低CDK2蛋白表达，但对Cyclin A影响不明显。同时发现PMC对核因子E2相关因子2(NRF2)和β-连环蛋白(β-catenin)具有抑制作用，提示其可能通过多通路发挥抗肿瘤作用。

CNOT2/c-Myc信号轴的关键作用

TCGA数据分析显示CNOT2在肺癌组织mRNA水平显著高表达且与患者不良预后相关。cBioPortal数据库分析发现CNOT2与c-Myc存在正相关性（Pearson系数0.24）。实验证实PMC能剂量依赖性地降低CNOT2和c-Myc蛋白表达，免疫共沉淀进一步揭示PMC可破坏CNOT2与c-Myc之间的直接结合。

ROS介导的凋亡机制

PMC处理使A549和H460细胞ROS水平分别提升至83.55%和88.47%，而抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)可逆转PMC对CNOT2、c-Myc、pro-PARP和pro-caspase-3的调控作用，证实ROS在PMC诱导凋亡中的核心地位。

协同治疗潜力验证

PMC（300μg/ml）与多柔比星（4μM）联合使用时，协同指数(CI)小于1，协同得分达53.83，显示强协同效应。Western blotting表明联合用药对c-Myc和CNOT2的抑制作用显著优于单药治疗。

该研究首次阐明PMC通过抑制CNOT2/c-Myc信号轴和诱导ROS产生双重机制促进非小细胞肺癌细胞凋亡，并证实其与多柔比星的协同治疗效果。这不仅为云母的抗肿瘤作用提供了分子水平证据，更为传统药物与现代化疗联合应用提供了理论依据，对开发低毒性、高疗效的肺癌治疗方案具有重要意义。后续研究需进一步验证PMC在动物模型中的安全性和药代动力学特性，推动其向临床转化。