木犀草素对高葡萄糖诱导的米勒细胞铁死亡（ferroptosis）的保护作用

《International Ophthalmology》：Protective effects of luteolin on high glucose-induced ferroptosis in müller cells

本研究探讨槲皮素对高糖环境下视网膜Müller细胞保护作用及机制，发现高糖通过诱导铁依赖性细胞凋亡导致损伤，槲皮素通过抑制该过程及上调抗氧化基因（xCT、GPX4）改善细胞功能，恢复线粒体健康。

　　

摘要

目的

本研究旨在探讨卢丁醇在高葡萄糖条件下对穆勒细胞（Müller cells）的保护作用，并阐明其潜在的作用机制。

方法

首先，将原代大鼠视网膜穆勒细胞分为三组：对照组（Control）、高葡萄糖组（HG）和添加卢丁醇的高葡萄糖组（HG + luteolin）。为确认铁死亡（ferroptosis）确实参与了细胞死亡过程，又将细胞分为另外三组：对照组（Control）、高葡萄糖组（HG）以及添加Ferrostatin-1的高葡萄糖组（HG + Fer-1）。此外，为进一步确定铁死亡是卢丁醇治疗的特异性靶点，细胞又被分为三组：对照组（Control）、铁死亡激活剂组（RSL3）和添加卢丁醇的RSL3组（RSL3 + luteolin）。通过流式细胞术（flow cytometry）和TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。利用生化试剂盒测定细胞内活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）的水平。通过透射电子显微镜观察线粒体形态，并通过定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction）和Western blotting技术检测与铁死亡相关的因子xCT和GPX4的表达情况。

结果

与对照组相比，高葡萄糖组（HG）的细胞凋亡、活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）水平升高，线粒体损伤加重，而超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）以及xCT和GPX14的水平降低。添加卢丁醇的高葡萄糖组（HG + luteolin）逆转了这些不良效应，减少了细胞凋亡和氧化应激，恢复了线粒体功能，并增强了保护性基因的表达。Ferrostatin-1（Fer-1）能够抑制高葡萄糖诱导的细胞凋亡，并促进细胞内xCT和GPX4蛋白的表达；卢丁醇同样能够抑制RSL3诱导的细胞铁死亡，并促进细胞内xCT和GPX4蛋白的表达。

结论

研究结果表明，高葡萄糖水平会诱导穆勒细胞发生铁死亡。相反，卢丁醇干预通过抑制细胞铁死亡过程，有效减轻了高葡萄糖对穆勒细胞的损伤。