新兴的多重耐药机会性真菌病原体Candida haemulonii对纤维连接蛋白的识别

《Folia Microbiologica》：Fibronectin recognition by the emerging multidrug-resistant opportunistic fungal pathogen Candida haemulonii

Candida haemulonii通过表面结合纤维连接蛋白增强粘附并促进生物膜形成，其分泌的50和60 kDa丝氨酸蛋白酶参与纤维连接蛋白的降解。

　　

摘要

多重耐药病原体Candida haemulonii（Candidozyma haemuli）可导致易感个体的表浅性和系统性感染。C. haemulonii与细胞外基质（ECM）成分相互作用的能力目前仍很大程度上未被探索。在本研究中，我们探讨了C. haemulonii结合纤维连接蛋白的能力，并评估了这种ECM蛋白对真菌黏附和生物膜形成的影响。实验结果表明，C. haemulonii酵母能够以剂量依赖性和菌株特异性的方式识别并作用于可溶性纤维连接蛋白，这一现象通过流式细胞术得到证实。共聚焦显微镜观察发现，纤维连接蛋白结合分子主要位于酵母细胞表面。此外，与未涂层（28.4±6.5）或白蛋白涂层（28.7±5.3）表面相比，C. haemulonii在涂有固定化纤维连接蛋白的聚苯乙烯表面上表现出显著更强的黏附能力（48.8±5.1个酵母/显微镜视野）。与未涂层对照组相比，纤维连接蛋白涂层表面上的真菌生物膜形成显著减少，通过结晶紫和番红花素染色法检测发现，其生物量及ECM产量均降低了约50%。Western blot分析显示，在生物膜形成过程中C. haemulonii细胞会降解纤维连接蛋白。值得注意的是，无细胞生物膜上清液能够切割可溶性纤维连接蛋白；PMSF部分抑制了这种降解作用，表明丝氨酸蛋白酶参与了这一过程。酶谱分析进一步证实存在两种能够降解固定化纤维连接蛋白的丝氨酸蛋白酶（分子量分别为50 kDa和60 kDa）。综上所述，这些结果表明C. haemulonii具有结合纤维连接蛋白的分子，这些分子不仅促进了其黏附过程，还在其致病机制的早期阶段发挥了关键作用。