越南北方网箱养殖斑点叉尾鮰中Dollfustrema bagarii（复殖目：牛首科）的流行规律及其中间宿主鉴定

《Parasitology Research》：Occurrence and host associations of Dollfustrema bagarii (Digenea: Bucephalidae) in channel catfish cage culture in Northern Vietnam

本研究聚焦于在越南北方斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）养殖中造成严重损失的“灰白蛴螬”病病原——Dollfustrema bagarii（Digenea: Bucephalidae）的传播规律。研究人员通过广泛调查，首次确定入侵物种Limnoperna fortunei（黄金贻贝）为该吸虫的第一中间宿主，描述了其幼虫形态，并通过28S rDNA测序验证。该研究阐明了关键传播环节，为制定针对性防控策略提供了科学依据，对保障水产养殖业可持续发展具有重要意义。

　　

在越南北方，斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）作为一种引进的养殖鱼类，近年来已发展成为重要且具有经济价值的水产养殖物种。然而，一种被称为“灰白蛴螬”病的寄生虫病给养殖户带来了严重损失，其病原被鉴定为Dollfustrema bagarii（Digenea: Bucephalidae）的后囊蚴。尽管该吸虫的成虫期最早在越南Hoa Binh省的Bagarius bagarius（ dwarf goonch catfish）中有报道，其后囊蚴期也发现感染斑点叉尾鮰的内脏器官（如肝脏、肾脏），但D. bagarii的完整生活周期，特别是其第一中间宿主，此前一直未被确认。了解其生活周期，尤其是第一中间宿主的身份，对于制定有效的防控措施至关重要。

为了回答D. bagarii的第一中间宿主是什么以及更新越南北方养殖斑点叉尾鮰中“灰白蛴螬”病的流行状况信息，研究人员在越南北方11个省展开了调查。这项研究的结果发表在《Parasitology Research》期刊上。

研究人员主要运用了几项关键技术方法：首先，在越南北方四个省份（ Yen Bai, Son La, Hoa Binh, Bac Ninh）的养殖网箱区域采集软体动物（螺类和双壳类）和来自103个养殖网箱的斑点叉尾鮰样本。其次，通过压片法检查软体动物是否感染吸虫幼虫（尾蚴），并利用光学显微镜观察和描述尾蚴的形态特征。第三，使用聚合酶链式反应（PCR）和桑格测序（Sanger sequencing）对从软体动物中获得的尾蚴组织以及从鱼类中获得的D. bagarii后囊蚴进行28S rDNA基因片段扩增和序列分析，通过分子数据确认物种鉴定。最后，对鱼类感染数据进行了统计学分析，比较了不同地理区域（山区与低地）和水体类型（水库/湖泊与河流）的感染率差异。

研究结果主要体现在以下几个方面：

软体动物物种及吸虫感染

调查共采集到2111份软体动物标本，分属6科10种。其中，Limnoperna fortunei（黄金贻贝）和Melanoides tuberculata（瘤拟黑螺）是优势种。在178个受感染的软体动物标本中，记录了四种不同的尾蚴形态类型。其中，瘤拟黑螺感染了三种形态的尾蚴（侧棘口型、棘口型、矛口型），而黄金贻贝则感染了一种叉尾型尾蚴。

确定第一中间宿主及幼虫形态

分子鉴定结果显示，从Duong河和Hoa Binh水库的黄金贻贝中获得的叉尾型尾蚴，其28S rDNA序列与从斑点叉尾鮰和 dwarf goonch catfish中获得的D. bagarii成虫/后囊蚴序列（特别是GenBank登录号OM457011）具有100%的相似性。基于28S rDNA序列的UPGMA（非加权组平均法）系统发育树分析也证实了这些尾蚴与D. bagarii的相似性。因此，首次确定黄金贻贝（Limnoperna fortunei）是D. bagarii的第一中间宿主。

研究对D. bagarii的尾蚴和子胞蚴进行了详细的形态学描述。尾蚴为叉尾型，身体椭圆形，体表覆盖微细棘刺，具穿刺器，腹吸盘位于身体后半部，排泄囊囊状。焰细胞公式为2×[(3+3+3)+(3+3+3)]。子胞蚴体延长呈囊状，分为前部和后部，前部包含发育成熟的尾蚴和生长尖端。

斑点叉尾鮰中D. bagarii后囊蚴的流行率

对来自103个养殖网箱的337尾斑点叉尾鮰的检查发现，D. bagarii后囊蚴感染广泛存在，72个网箱（占69.9%）和44.51%的受检鱼类呈阳性。感染率在不同省份间差异较大，从Tuyen Quang省的11.54%到Hung Yen省的82.35%不等。统计分析表明，低地省份的感染率是山区省份的3.14倍，具有极显著差异（p < 0.001）。然而，在水库/湖泊中养殖的鱼类与在河流中养殖的鱼类之间，感染率无显著差异（p = 0.634）。

讨论与结论

本研究成功确定了入侵物种黄金贻贝（Limnoperna fortunei）作为Dollfustrema bagarii的第一中间宿主，完善了该吸虫的生活史。黄金贻贝在调查点感染率高，且被观察到密集附着在养殖网箱上，这解释了养殖鱼类高感染率的原因。鉴于黄金贻贝是世界性的入侵物种，由此病引发的问题可能不仅限于越南，有潜力传播到更广泛的区域。分子数据证实了所研究尾蚴与D. bagarii的高度相似性，但也提示从斑点叉尾鮰获得的成虫可能存在细微的遗传分化，值得进一步研究。

研究指出，在重感染情况下，后囊蚴不仅存在于肝脏和肾脏，也可见于脾脏、心脏、体腔及周围组织。高感染率可能与调查侧重于已有疫情报告的农场有关，存在抽样偏差。低地地区感染率显著高于山区，可能与下游第一中间宿主密度更高有关。

研究结论强调，为了斑点叉尾鮰养殖业的可持续发展和减少养殖户的经济损失，控制养殖环境中的第一中间宿主——黄金贻贝，是一项实用且有效的策略。改进养殖场和池塘管理实践可以有效减少寄生虫感染，而利用黑鲩（Mylopharyngodon piceus）作为生物控制剂来减少中间宿主种群，则是一种更具可持续性的控制方法，且该鱼种在本土分布，引入风险较低。

总之，该研究揭示了D. bagarii在越南北方斑点叉尾鮰网箱养殖中的流行情况及其关键传播环节，为理解该寄生虫的生物学和控制其引起的疾病提供了重要的科学依据。