针对环境问题中具有神经毒性的有机磷蓝藻毒素——胍基毒素（guanitoxin）的优化提取与分析方法

《Analytical Methods》：Optimized extraction and analytical protocols for guanitoxin: an organophosphate cyanobacterial neurotoxin of environmental concern

本研究评估了蓝藻Sphaerospermopsis torques-reginae（ITEP-24菌株）在不同培养基中52天的细胞生长、叶绿素a产量及胍基毒素（GNT）合成能力。Z8培养基总GNT产量达峰值，BG-11与ASM-1氮浓度优化后分别实现产量与稳定性平衡及高效GNT合成。70%甲醇结合超声破碎的优化提取法，配合硅胶SPE柱半纯化（61%回收率），结合LC-HR-QTOF-MS检测，为规模化生产、参考标准制定及环境监测提供技术支撑。

　　

本研究评估了蓝细菌（菌株ITEP-24）在不同培养基中52天内的细胞生长、叶绿素-a的产生以及瓜尼毒素（GNT）的合成情况。最大总GNT产量出现在Z8培养基中，且在第45天达到峰值，这表明该菌株具有潜在的生物技术研究价值。含5%氮的BG-11培养基在产量和稳定性之间取得了良好的平衡，而含5%氮的ASM-1培养基则表现出更高的细胞GNT生产效率，适合用于代谢研究。一种优化的提取方法使用70%甲醇、0.3%醋酸以及超声裂解技术，能够有效保证GNT的高回收率和分子完整性。在半纯化过程中，硅胶SPE柱（500毫克）的回收率达到了61%，优于C18柱的48%。两种方法均存在一定程度的损失，主要是由于该毒素本身的化学不稳定性所致。基于这些实验结果，采用填充硅胶的玻璃柱的优化方法从1.375克干生物质中成功分离出了1.2毫克的GNT。在避免温度波动的情况下，富集样品的冷冻干燥技术表现出较高的可靠性；通过LC-HR-QTOF-MS（ZIC-HILIC柱）检测，该毒素具有较高的灵敏度和选择性。这些进展为该毒素的规模化生产、参考标准制定、毒理学研究、环境监测以及公共卫生保护提供了支持。