甲基3-(2-甲酰基-5-甲氧基萘-1-基)丙酸酯作为用于人类血清白蛋白折叠和结合研究的荧光探针

《New Journal of Chemistry》：Methyl 3-(2-formyl-5-methoxynaphthalen-1-yl)propanoate as a fluorescent probe for folding and binding studies of human serum albumin

MFMNP合成及其作为荧光探针用于研究HSA构象变化与结合机制，通过光谱分析、FRET实验和分子模拟揭示探针与白蛋白的相互作用及热力学参数。

　　

甲基-3-(2-甲酰基-5-甲氧基萘-1-基)丙酸酯（MFMNP）被合成并选为最有前景的荧光探针，因为它在所有衍生物中表现出优异的荧光强度和最大的斯托克斯位移。在水溶液中，MFMNP的双重发射行为归因于醛形式与其对应的偕二醇形式之间的平衡。通过包括稳态和时间分辨测量在内的综合光谱分析，揭示了MFMNP的光物理性质。研究了MFMNP与人血清白蛋白（HSA）的天然形式和变性形式之间的相互作用，以及其对牛血清白蛋白（BSA）的结合亲和力。利用稳态和时间分辨荧光光谱展示了十二烷基硫酸钠（SDS）的变性作用以及SDS在尿素变性HSA中的复性作用。华法林和布洛芬分别作为位点I和位点II的标记物，用于竞争性结合实验，以评估MFMNP与HSA的位点特异性相互作用。进行了从HSA到MFMNP的F?rster共振能量转移（FRET）实验，证明了MFMNP显著的荧光淬灭效率。通过分子对接和分子动力学（MD）模拟进一步阐明了MFMNP与HSA之间的结合机制，确定了参与该相互作用的关键氨基酸残基。实验测定了MFMNP-HSA复合物的结合常数和荧光淬灭常数，理论计算得出的结合常数与实验结果吻合良好。