柴胡疏肝散通过重新编程M1巨噬细胞中的SMS2介导的鞘脂代谢，改善了慢性胰腺炎的症状

《Phytomedicine》：Chaihu shugan powder ameliorated chronic pancreatitis by reprogramming SMS2-mediated sphingolipid metabolism in M1 macrophages

慢性胰腺炎（CP）的靶向治疗研究：柴胡同疏肝散（CSP）通过调控鞘脂代谢抑制M1巨噬细胞极化及胰腺星状细胞（PSC）激活。

　　慢性胰腺炎（CP）是一种复杂的纤维化炎症性疾病，其特点是胰腺形态和功能的不可逆改变，常常导致糖尿病、外分泌功能不全、疼痛综合征、代谢性骨病以及胰腺癌风险的增加。尽管目前尚无根治手段，但现有的治疗策略主要集中在缓解症状、控制疼痛、补充营养和使用胰酶替代疗法等方面。然而，这些方法往往只能暂时改善患者的生活质量，无法从根本上阻止疾病的发展。因此，探索新的治疗策略和药物成为研究的重点。

本研究聚焦于传统中药方剂柴胡疏肝散（CSP）在慢性胰腺炎治疗中的作用。CSP源于明代医学典籍《医宗金鉴》，其成分包括柴胡、香附、川芎、金钱草、青皮、白芍、甘草等，主要用于疏肝理气、缓解肝气郁结引起的胸痛和情绪不畅。近年来，临床观察发现CSP在慢性胰腺炎患者中表现出一定的疗效，包括减轻胰腺纤维化、改善外分泌功能以及降低促炎因子如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和转化生长因子-β（TGF-β）的水平。这些初步的临床效果促使研究人员进一步探讨其潜在的治疗机制和关键活性成分。

慢性胰腺炎的病理过程涉及多种细胞和分子机制的相互作用。其中，胰腺星状细胞（PSCs）被认为是胰腺损伤的核心效应细胞之一。在疾病进展过程中，各种刺激因素如缺氧、细胞因子和毒素会激活PSCs，使其从静息状态转变为具有肌成纤维细胞特征的激活状态。这些激活的PSCs会大量分泌细胞外基质蛋白，从而导致胰腺组织的纤维化。与此同时，巨噬细胞在慢性胰腺炎的早期阶段通常表现出促炎的M1表型，分泌多种促炎因子，如IL-1β、IL-6和TNF-α，这些因子能够激活PSCs，进一步加剧胰腺纤维化。而在疾病后期，巨噬细胞逐渐向促纤维化的M2表型转化，释放TGF-β，刺激PSCs产生α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），从而促进组织重塑和纤维化进程。

近年来的研究表明，代谢适应在调节巨噬细胞极化和功能方面起着关键作用。鞘脂类（sphingolipids）是细胞膜的重要组成成分，占巨噬细胞膜脂质的大约四分之一。它们不仅在细胞膜结构中发挥作用，还作为重要的信号分子调控巨噬细胞的活性。例如，鞘磷脂（SM）和某些鞘氨醇（Cer）亚型能够促进Toll样受体4（TLR4）信号通路的激活，而鞘磷脂合成酶2（SMS2）的缺失则会减少TLR4在脂筏中的招募，从而抑制炎症反应。因此，调控SMS2可能成为干预M1巨噬细胞极化和抑制PSC激活的有效策略。

基于上述背景，本研究旨在揭示CSP在慢性胰腺炎治疗中的作用机制，并探索其关键成分和作用靶点。通过整合多种实验方法，包括体内和体外实验、靶向鞘脂分析、单细胞RNA测序（scRNA-seq）、流式细胞术、基因敲除技术以及分子对接和分子互作分析，研究人员系统地评估了CSP对胰腺纤维化和巨噬细胞极化的调控作用。研究结果表明，CSP能够显著减轻胰腺纤维化，抑制M1巨噬细胞的极化，并恢复胰腺和血液中鞘脂代谢的平衡。进一步分析发现，CSP中的黄酮类化合物 hesperetin 与 SMS2 有较高的结合能力，能够抑制 M1 巨噬细胞的极化，从而减少 PSC 的激活。

这一发现不仅揭示了CSP在慢性胰腺炎治疗中的潜在机制，也为开发基于中药成分的新型治疗策略提供了理论依据。通过调控 SMS2，CSP 可能能够干扰 M1 巨噬细胞介导的 PSC 激活，从而减缓胰腺纤维化的进程。此外，CSP 对鞘脂代谢的重新编程也可能是其发挥治疗作用的重要途径之一。鞘脂代谢的紊乱与多种炎症和纤维化疾病密切相关，而恢复其正常代谢可能有助于维持细胞功能的平衡，减少炎症反应和组织损伤。

在实验设计方面，研究人员首先构建了慢性胰腺炎的小鼠模型，通过连续四周的胆囊收缩素（cerulein）注射诱导胰腺炎，并在最后两周给予 CSP 或阳性对照药物 PF 进行治疗。通过组织病理学分析（如苏木精-伊红染色和Masson三色染色）评估胰腺组织的炎症和纤维化程度，同时通过免疫荧光和Western blot等方法检测相关蛋白的表达水平。在体外实验中，研究人员分离并培养了骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）和原代 PSCs，模拟体内环境，进一步验证 CSP 对细胞极化和激活的影响。

此外，研究还采用了靶向脂质组学技术，对胰腺组织和血液中的鞘脂代谢物进行了系统分析，识别出在慢性胰腺炎模型中发生显著变化的代谢物和相关酶。通过结合单细胞RNA测序数据，研究人员能够更深入地了解不同细胞类型的基因表达特征及其在疾病中的作用。这些数据为揭示 CSP 的作用机制提供了重要线索，也为寻找新的治疗靶点奠定了基础。

在药物筛选方面，研究团队利用分子对接和分子互作分析技术，对 CSP 的多种成分进行了系统评估，以确定其在调控 SMS2 和巨噬细胞极化中的关键作用成分。结果表明，hesperetin 是 CSP 中最具活性的成分之一，其通过与 SMS2 的结合，能够有效抑制 M1 巨噬细胞的极化，并减少 PSC 的激活。这一发现不仅有助于理解 CSP 的药理作用，也为开发基于 hesperetin 的新型药物提供了可能。

本研究的意义在于，它为慢性胰腺炎的治疗提供了一种新的思路。传统中药在现代医学中常常被视为辅助治疗手段，但随着对中药成分和作用机制的深入研究，越来越多的证据表明，中药可能在某些疾病中具有显著的治疗潜力。CSP 的研究不仅验证了其在临床中的应用价值，也揭示了其可能的作用靶点和机制，为未来的药物开发提供了重要的参考。此外，本研究还强调了鞘脂代谢在慢性炎症和纤维化疾病中的重要性，提示通过调控鞘脂代谢可能成为干预这类疾病的新策略。

在实验方法上，本研究采用了多种先进技术，以确保结果的准确性和可靠性。例如，靶向脂质组学技术能够高通量地检测特定代谢物的水平变化，为理解鞘脂代谢在慢性胰腺炎中的作用提供了有力支持。单细胞RNA测序技术则能够揭示不同细胞类型的基因表达谱，帮助研究人员识别与疾病进展相关的关键基因和通路。流式细胞术和Western blot等方法则用于评估巨噬细胞极化状态和相关蛋白的表达水平，从而验证 CSP 的治疗效果。这些技术的综合应用不仅提高了研究的深度，也为未来类似研究提供了方法上的借鉴。

从研究结果来看，CSP 的治疗效果与其对鞘脂代谢的调控密切相关。鞘脂代谢的紊乱被认为是慢性炎症和纤维化的重要诱因之一，而恢复其正常代谢可能有助于维持胰腺组织的稳态。同时，CSP 对 M1 巨噬细胞的抑制作用也可能是其治疗效果的重要机制之一。M1 巨噬细胞在慢性胰腺炎的早期阶段起着关键的促炎作用，其激活会导致 PSC 的过度增殖和细胞外基质的沉积，从而加速胰腺纤维化的进程。通过抑制 M1 巨噬细胞的极化，CSP 可能能够减少促炎因子的释放，从而减轻胰腺组织的炎症反应和纤维化程度。

此外，研究还发现，hesperetin 在 CSP 中具有重要的治疗作用。作为一种天然黄酮类化合物，hesperetin 在多种疾病模型中表现出抗炎、抗氧化和抗纤维化等特性。在本研究中，hesperetin 通过与 SMS2 的结合，干扰了 M1 巨噬细胞的极化过程，从而减少了 PSC 的激活。这一发现不仅为理解 CSP 的作用机制提供了新的视角，也为开发基于 hesperetin 的新型药物提供了可能。未来的研究可以进一步探讨 hesperetin 在其他炎症和纤维化疾病中的应用潜力，以及其与其他药物的联合使用效果。

总的来说，本研究通过整合多种实验方法，系统地揭示了 CSP 在慢性胰腺炎治疗中的作用机制，为未来药物开发和临床治疗提供了重要的理论依据。研究结果表明，CSP 可能通过调控鞘脂代谢和抑制 M1 巨噬细胞的极化，从而减轻胰腺纤维化和炎症反应。这一发现不仅拓展了对传统中药治疗慢性胰腺炎的理解，也为探索新的治疗策略提供了方向。随着对中药成分和作用机制的进一步研究，未来可能会有更多基于传统医学的创新药物被开发出来，为慢性胰腺炎患者带来新的希望。