升温后的培养处理以及使用透明质酸和催乳素进行准备，随后进行单个玻璃化冻融后的囊胚移植：一项随机对照试验

《Reproductive BioMedicine Online》：Post-warming incubation and transfer with hyaluronic acid and prolactin before single vitrified-warmed blastocyst transfer: a randomised controlled trial

本研究通过三臂双盲随机对照试验，评估了在单次解冻移植胚胎后使用透明质酸（HA）和催乳素（PRL）联合治疗对活产率的影响。结果显示，联合治疗组活产率显著高于单独使用HA或对照组（P=0.0279和0.0347），且妊娠损失率降低。该方案对发育较快的胚胎及孕酮不足患者效果更佳。

　　这项研究聚焦于辅助生殖技术中一个关键环节——胚胎移植，探讨了一种新的治疗方案，即在冷冻胚胎复苏后进行培养和移植时，使用透明质酸（HA）和催乳素（PRL）的联合治疗是否能够提高活产率。研究团队由来自日本东京的Kato Ladies Clinic的Kenji Ezoe、Tetsuya Miki、Nanoha Fujiwara、Satoshi Ueno、Mika Narisawa、Kiyoe Shimazaki、Ryosuke Akino、Shogo Nishii、Sachie Onogi、Satoshi Tsuchiyama、Keiko Wada、Tomoko Kuroda，以及来自美国的David K. Gardner和Keiichi Kato共同参与。研究设计为一项三组、双盲、随机对照试验（RCT），从2020年10月至2021年5月期间，共招募了1,236对接受单个冷冻复苏囊胚移植（SVBT）的夫妇，按1:1:1的比例随机分配至对照组、HA富集的胚胎移植介质组（EG组）以及EG介质中加入PRL的联合治疗组（EGP组）。研究的主要目的是评估这种联合治疗对活产率的影响。

在研究设计方面，所有参与者均在移植前将囊胚置于相同的介质中培养2小时，对照组使用不含HA或PRL的普通培养基，EG组使用HA富集的介质，而EGP组则在EG介质的基础上进一步添加PRL。这种设计确保了实验条件的一致性，同时通过添加两种不同的生物分子，测试它们对胚胎着床和妊娠结局的潜在影响。在结果分析中，研究发现EGP组的活产率显著高于对照组（P=0.0279）和EG组（P=0.0347），表明联合治疗可能对提高妊娠成功率具有积极作用。此外，尽管三组在着床率和临床妊娠率上没有显著差异，但EGP组的持续妊娠率却明显优于其他两组，这提示了联合治疗可能在维持妊娠方面发挥了额外的作用。值得注意的是，EGP组的早期妊娠丢失率也显著降低，进一步支持了该治疗方案的潜在价值。

研究的背景表明，随着冷冻胚胎技术的不断进步，选择性冷冻胚胎移植（FET）的使用率在全球范围内持续上升。尤其是在欧洲和日本，FET的普及率分别达到了2019年的35%以上和2020年的87%。尽管FET技术已经取得了显著进展，但其临床妊娠率在过去十年中却保持在20%至30%之间，未能显著提高。这一现象引发了对影响妊娠结局因素的深入研究，尤其是在胚胎着床和早期妊娠阶段的失败。已有研究表明，大约50%至70%的妊娠丢失发生在这些关键阶段，这可能与多种因素有关，包括卵子和精子的质量、子宫内膜的接受性等。因此，提高子宫内膜的接受性以及促进胚胎与子宫内膜之间的相互作用，成为改善FET妊娠率的重要方向。

在这一背景下，研究者提出了一个重要的假设：HA和PRL的联合使用可能通过增强胚胎与子宫内膜之间的相互作用，提高着床和妊娠的成功率。HA是一种广泛存在于子宫内膜中的天然多糖，它在子宫内膜的分泌期和分泌后期分泌，被认为是促进囊胚附着和侵入的重要因素。HA通过与CD44受体结合，增强细胞间的黏附和细胞与基质的相互作用，从而有助于胚胎在子宫内膜中的着床。此外，HA还能促进血管生成和免疫抑制，为胚胎着床创造更有利的微环境。因此，将HA添加到胚胎移植介质中，被认为是一种有潜力的策略。

PRL则是一种由垂体前叶分泌的激素，近年来的研究表明，PRL也在子宫内膜细胞中表达，并且在着床过程中起着重要作用。研究表明，PRL的信号传导不足可能导致着床失败和妊娠丢失。因此，补充PRL可能有助于增强子宫内膜的接受性，并促进胚胎的着床。此外，PRL在胚胎发育过程中也表现出一定的生物活性，尤其是在囊胚形成和滋养层细胞的扩展方面。例如，PRL的添加可以促进上皮-间质转化（EMT）和整合素基的黏附结构，从而提高滋养层细胞的扩展能力。这些发现为HA和PRL的联合使用提供了理论基础，即通过同时增强胚胎与子宫内膜之间的相互作用，提高妊娠成功率。

基于上述背景，研究者认为，HA和PRL的联合使用可能在FET过程中发挥协同作用，从而改善胚胎着床和妊娠结局。为了验证这一假设，他们设计了一项三组、双盲、随机对照试验。该研究不仅关注整体的妊娠率，还特别关注不同类型的囊胚和不同子宫内膜条件下的效果。研究结果显示，EGP组的活产率显著高于其他两组，尤其是在快速发育的囊胚和子宫内膜中PRL水平不足的患者中，联合治疗的效果更为明显。这一发现为临床实践提供了新的思路，即在特定情况下，通过优化移植介质，可能提高FET的成功率。

此外，研究还涉及了一些重要的伦理和数据管理方面的问题。试验方案已经通过Kato Ladies Clinic的伦理审查，并在UMIN临床试验注册系统中登记。所有参与试验的患者均在签署知情同意书后加入研究，确保了试验的合法性和伦理性。研究数据由独立的数据监测和管理团队进行评估，以确保数据的准确性和客观性。这种严谨的数据管理方式有助于提高研究结果的可信度，并为后续研究提供可靠的依据。

研究的结论指出，这种联合治疗方案在提高活产率方面具有显著效果，尤其是在那些子宫内膜PRL水平不足或囊胚发育较快的患者中。这表明，HA和PRL的联合使用可能在特定人群中表现出更好的效果，从而为个性化治疗策略提供了支持。然而，研究也提到，尽管联合治疗在某些情况下效果显著，但其具体作用机制仍需进一步探索。例如，HA和PRL在子宫内膜中的作用是否相互补充，还是存在某种协同效应，这些问题需要更多的实验数据来解答。

研究的意义在于，它为FET的优化提供了新的方向。传统上，FET的成功率受到多种因素的影响，包括胚胎质量、子宫内膜条件以及移植技术等。而这项研究通过引入HA和PRL的联合治疗，提供了一种新的方法来改善这些因素，从而提高活产率。特别是，对于那些子宫内膜PRL水平不足的患者，联合治疗可能提供额外的支持，帮助其成功妊娠。因此，这项研究不仅为临床实践提供了新的治疗策略，也为未来的研究指明了方向，即如何通过生物分子的补充，进一步优化FET的条件。

在实际应用中，这项研究的发现可能对辅助生殖技术的临床实践产生重要影响。首先，它提示了在某些情况下，单独使用HA或PRL可能不足以显著提高妊娠率，而两者的联合使用则可能带来更好的效果。其次，它强调了个体化治疗的重要性，即针对不同患者的子宫内膜条件和囊胚发育速度，选择不同的治疗方案，以最大化妊娠成功率。这种个体化的策略可能在未来成为FET治疗的标准之一，从而进一步提高患者的妊娠率。

研究还提到，尽管HA和PRL的联合使用显示出积极的效果，但其具体作用机制仍需进一步研究。例如，HA和PRL如何在子宫内膜中相互作用，以及它们对胚胎发育的具体影响。此外，研究还指出，需要进一步探索这种治疗方案在不同人群中的适用性，以及是否存在特定的适应症或禁忌症。这些研究的进一步开展，将有助于更全面地理解HA和PRL在FET中的作用，并为临床应用提供更具体的指导。

研究的局限性也需要被关注。首先，研究的样本量虽然较大，但可能仍不足以代表所有患者群体。其次，研究的随访时间可能较短，无法全面评估长期妊娠结局。此外，研究中未涉及其他可能影响妊娠率的因素，如患者的年龄、生活方式、其他激素水平等，这些因素在实际临床中同样重要。因此，未来的研究需要考虑这些变量，以更全面地评估HA和PRL联合治疗的效果。

总的来说，这项研究为FET的优化提供了新的视角和方法。通过引入HA和PRL的联合治疗，研究者不仅验证了这种治疗方案在提高活产率方面的有效性，还揭示了其在特定患者群体中的作用机制。这些发现可能对辅助生殖技术的发展产生深远影响，特别是在提高妊娠成功率和减少早期妊娠丢失方面。同时，研究也强调了个体化治疗的重要性，为未来的临床实践提供了新的思路。然而，为了更广泛地应用这种治疗方案，还需要更多的研究来验证其长期效果和适用范围。